CYP3A5基因多态性与他克莫司血药浓度的相关性分析
齐 林 刘永芳 刘金瑞 张 华 罗 登
【摘 要】目的 对CYP3A5基因多态性与他克莫司血药浓度的相关性进行分析，探讨其在临床肾移植患者个体化治疗中的应用意义。方法 选择2014年3月～2016年5月间，笔者医院收治的获得明确诊断、符合条件接受同种异体肾移植手术患者115例作为研究对象，对受试者展开CYP3A5基因型检测，而后对不同基因型患者的他克莫司血药浓度/剂量比值、急性排斥反应、不良反应的发生情况进行对比分析。结果 肾移植术后随访3个月，不同基因型者的他克莫司血药浓度/剂量比值差异有统计学意义，表现为*3/*3基因型患者最高(P<0.05)；术后不良反应发生率比较发现，*3/*3基因型患者的发生率高于其他基因型(P<0.05)；不同基因型患者术后急性排斥反应发生率比较，*1/*1型急性排斥反应发生率高于其他基因型(P<0.05)。结论 CYP3A5基因多态性会影响到应用他克莫司血药浓度/剂量比值，不同基因型的不良反应发生率不同，在今后的临床工作中，应对其给予足够的重视。 【期刊名称】医学研究杂志 【年(卷),期】2017(046)006 【总页数】3
【关键词】他克莫司 血药浓度/剂量比值 CYP3A5基因多态性
肾衰竭终末期有效的临床治疗途径是肾移植，虽然该技术日臻完善，但移植排斥反应依然是器官及受者存活质量中的关键问题之一。他克莫司(tacrolimus, FK506)因具有良好的免疫抑制效果及较弱的肝肾毒性，已成为首选的肾移植术后基础免疫抑制剂。但在临床实践中发现，不同患者对他克莫司的反应性差异
较大。有研究表明，他克莫司生物利用度显著的个体差异主要是由于药物基因位点的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)引起，不同的基因型与血药浓度具有密切相关性[1～4]。由于单核苷酸多态性改变了个体对药物的代谢，这对于临床个体化用药具有重要的意义。所以，评价CYP3A5基因多态性的临床价值，探讨其与他克莫司血药浓度/剂量比个体差异的关系，有利于他克莫司的个体化治疗。本研究出于对CYP3A5基因多态性与他克莫司血药浓度的相关性进行分析探讨的目的，对笔者医院115例肾移植应用他克莫司的患者展开了基因型检测，并对检测结果进行了统计分析。
资料与方法
1. 研究对象: 选择2014年3月～2016年5月间笔者医院收治的，获得明确诊断的，接受肾移植手术治疗患者，共计选择115例作为研究对象，其中男性77例，女性38例，患者年龄21～65岁，平均年龄39.8±11.2岁，体重43～65kg，平均58.7±14.2kg。所有患者均符合临床诊断标准，自愿接受临床治疗与检查，并签署了知情同意书。
2.实验方法:(1)研究对象均在肾移植术后接受他克莫司+麦考酚吗乙酯+肾上腺皮质激素三联免疫抑制方案治疗。他克莫司生成厂家为爱尔兰藤泽药品有限公司，用药剂量为0.15～0.30mg/(kg·d)，每天给药2次，饭前1h或者是饭后2h口服给药。对受试者均展开他克莫司血药浓度及CYP3A5基因型检测，而后对不同基因型患者的他克莫司血药浓度/剂量比值、急性排斥反应、不良反应的发生情况进行对比分析。(2)他克莫司血药浓度测定:给药12h后清晨空腹抽取静脉血2～3ml,EDTA抗凝，精确吸取200μl全血样本及200μl样本萃取液于1.5ml微型离心管，立即涡旋混匀5～10s，38500r/min离心5min，倒上
清至预处理样本转移管，再次涡旋混匀5～10s，装入Architect i2000化学发光免疫分析系统进行测定。他克莫司血药浓度测定试剂盒由美国雅培公司提供。(3)CYP3A5基因型检测:在ABI Steponeplus实时荧光定量PCR分析仪上进行，试剂盒购自天津秀鹏生物技术开发有限公司。按操作说明书提取相应的样本DNA，用PCR-SSP技术进行基因扩增。PCR反应体系配制：取25μl的工作液置于PCR管，加入3μl DNA，混匀，离心数秒；在引物板中，每人份(2孔)每孔加入10μl上述混合液，再加入15～20μl石蜡油，封板膜封板。循环参数：96℃2min；96℃20s，68℃60s，5个循环；96℃20s，65℃45s，72℃30s，10个循环；96℃20s，63℃45s，72℃30s，15个循环；72℃2min。用ABI Steponeplus Software Version2.2.2软件在每阶段的循环末收集荧光信号，并进行溶解曲线分析。结果判读：记录每个检测孔位Ct值及特征性熔解曲线导数峰，若Ct >22或者D(1)/D(2)>1.5，该孔为阴性；若10 3.统计学方法：所有数据均采用SPSS 19.0统计软件进行处理，计量资料结果以均数±标准差±s)表示，采用t 检验比较各不良反应组间的差异，非正态分布的变量进行对数转换。计数资料采用例数(百分率)[n(%)]表示，进行χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 结 果 1.受试者 CYP3A5基因分布：本组受试者，经基因检测发现，CYP3A5*1/*1型者18例，CYP3A5*1/*3型者35例，CYP3A5*3/*3型者62例。
CYP3A5基因多态性与他克莫司血药浓度的相关性分析
