卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化

卡氏肺孢子菌55kDa抗原的原核表达与纯化

陈金铃;段义农;朱丹丹;王建新;秦永伟

【期刊名称】《中国人兽共患病学报》 【年(卷),期】2009(025)003

【摘要】目的 体外扩增卡氏肺孢子菌(Pneumocystis carinii,Pc)55kDa抗原(p55)570bp的基因片段,构建原核表达载体pGEX-570,诱导表达并纯化重组蛋白.方法 以卡氏肺孢子菌DNA为模板,扩增其基因片段,连接至pGEM-T载体,随后构建pGEX-570重组表达质粒, 经双酶切、PCR及测序鉴定后将其转化入BL21大肠杆菌中,经IPTG诱导表达融合蛋白.采用透析袋电泳法纯化融合蛋白.结果 重组表达质粒pGEX-570经酶切,PCR鉴定及测序结果表明构建成功.IPTG诱导表达融合蛋白GST-p55/570,分子量约为47kDa.用透析袋电泳法纯化重组蛋白,经SDS-PAGE确认正确.结论 本研究成功构建了pGEX-570原核表达载体,诱导表达并纯化GST-p55/570融合蛋白.为进一步开展肺孢子菌55kDa抗原的研究奠定了基础.

【总页数】4页(249-252)

【关键词】卡氏肺孢子菌;p55抗原;基因克隆;蛋白纯化 【作者】陈金铃;段义农;朱丹丹;王建新;秦永伟

【作者单位】南通大学医学院寄生虫学教研室,南通,226001;南通大学医学院寄生虫学教研室,南通,226001;南通大学医学院寄生虫学教研室,南通,226001;南通大学附属医院临床检验中心;南通大学医学院寄生虫学教研室,南通,226001 【正文语种】中文 【中图分类】R382.9