临床检验技士考试辅导
微生物检验
第十三章 病原性球菌及检验
葡萄球菌——分类 按色素及生化反应
金黄色葡萄球菌：金黄色。 表皮葡萄球菌：白色。 腐生葡萄球菌：柠檬色。 按血浆凝固酶
凝固酶阳性葡萄球菌：金黄色葡萄球菌。
凝固酶阴性葡萄球菌：表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。 葡萄球菌——生物学特性 形态与结构 形态：球形。
大小：0.5～1.5μm（中等）。 排列：葡萄状。 染色：G。
特殊结构：无鞭毛和芽胞，个别有荚膜。
+
培养特性 营养要求：一般。
气体环境：需氧或兼性厌氧。 温度环境：35～37℃；pH7.4。
菌落特征：普通琼脂平板24～48小时培养，形成直径2～3mm、圆形、凸起、表面光滑湿润、边缘整齐不透明、色素、溶血环。
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抗原
蛋白抗原：完全抗原，有种属特异性。结合在细胞壁的肽聚糖部分，具有抗吞噬作用，称葡萄球菌A蛋白。 多糖抗原：半抗原，具有型特异性，有三种：①A型多糖抗原；②B型多糖抗原；③C型多糖抗原。 抵抗力：耐热，耐干燥，耐高盐，是抵抗力最强的无芽胞细菌。 葡萄球菌——微生物检验及鉴定
标本采集：脓汁、渗出液、血液、尿液、粪便、痰液等。 形态学检查：革兰阳性球菌呈葡萄串状排列。 分离培养：
血标本肉汤增菌35℃ 24h后或脓汁、尿道分泌物、脑脊液离心沉淀物接种血琼脂平板。35℃18～24h，可见典型产生不同色素的菌落。金黄色葡萄球菌在菌落周围有透明溶血环。
粪便、呕吐物接种高盐卵黄或高盐甘露醇琼脂平板，经35℃ 18～24h培养，可形成细小菌落，48h后形成典型菌落。 生化试验（鉴定）
金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 耐药性检测：
苯唑西林耐药的葡萄球菌（MRS），耐甲氧西林的金葡菌（MRSA），耐甲氧西林的表葡菌（MRSE），耐万古的金黄色葡萄球菌（VRSA），耐万古的表皮葡萄球菌（VRSE）。 葡萄球菌——致病性及临床意义
感染类型 染） 疾病 致病因素 侵袭性疾病（化脓性感皮肤软组织感染：如毛囊炎、疖、痈等 全身性感染：如败血症、脓毒血症、骨髓炎、心内膜炎、脑膜炎等 血浆凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素 医院内感染 触酶试验 血浆凝固酶试验 + + + + - - 甘露醇发酵试验 + 新生霉素敏感试验 + + - 食物中毒，急性胃肠炎 毒素性疾病 烫伤样皮肤综合征 中毒性休克综合征 肠毒素、表皮溶解毒素、毒性休克综合征毒素
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葡萄球菌性肠炎（假膜性肠炎）
金黄色葡萄球菌：引起疖、痈、外科伤口、创伤的局部化脓性感染，播散入血后可引起深部组织的化脓性感染；其产生的肠毒素可引起食物中毒，表现为急性胃肠炎。 表皮葡萄球菌：皮肤正常菌群，是导致血培养污染的常见细菌。已成为医院感染的重要条件致病菌。 腐生葡萄球菌：导致尿路感染的常见病原菌之一。 链球菌——分类
按血琼脂平板溶血现象： 甲型（α）溶血性链球菌：草绿色链球菌，条件致病菌。 乙型（β）溶血性链球菌：溶血性链球菌，致病菌。 丙型（γ）链球菌：非致病菌。
按细胞壁抗原（C抗原）分类：A、B、C、D……共18个群，对人致病的90%为A群。
链球菌——生物学特性 形态与结构 形态：球形。 大小：0.8～1.0μm。 排列：链状。 染色：G。
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特殊结构：无鞭毛和芽胞，个别有荚膜。
培养特性 营养要求：较高。
气体环境：需氧或兼性厌氧，5% CO2最好。 温度环境：35～37℃；pH7.4～7.6。
菌落特征：血清肉汤中，溶血性菌株呈絮状或颗粒状沉淀生长。不溶血菌株均匀浑浊生长。
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血琼脂平板上培养可形成灰白色、圆形、透明或半透明，似针尖大小、凸起，菌落周围可出现α-溶血或β-溶血，也可不出现溶血。
抗原性：细胞壁抗原（即C抗原）。
抵抗力：不强，对各种常用消毒剂敏感，60℃加热30min即可杀灭。 链球菌——微生物检验及鉴定
标本采集：脓汁、咽拭、痰、血、尿等标本。 形态学检查：革兰染色阳性，圆形呈链状排列。 分离培养：
血标本：肉汤培养基，分别置需氧和厌氧环境中增菌，然后接种于血平板，置需氧和厌氧环境中培养。 脓汁和咽拭标本：接种血平板并涂片染色镜检，见形态酷似链球菌，并革兰阳性。上述的培养物经35℃ 18～24h培养后，观察菌落特征和溶血情况。（甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌可产生α-溶血） 生化试验（鉴定）
A群链球菌 B群链球菌 D群链球菌 肺炎链球菌 甲型（α）溶血性链 球菌 其他试验：直接检测抗原。 链球菌——致病性及临床意义
A群、B群及肺炎链球菌是链球菌属的3种重要致病菌。
感染类型 疾病 丹毒、痈、蜂窝组织炎 急性化脓性感染 咽炎、鼻窦炎、中耳炎 脑膜炎、产褥热 猩红热 A群 病原菌 致病因素 侵袭性： 透明质酸酶 链激酶 链道酶 M蛋白 变态反应性疾病 风湿热和肾小球肾炎 亚急性心内膜炎 其他感染
呼吸道和泌尿道感染 草绿色链球菌（条件致病） D群链球菌 毒素： 链球菌溶血素 致热外毒素 - - 触酶试杆菌肽敏感试CAMP试胆汁七叶苷试奥普托欣胆汁马尿酸盐水解验 - - - - 验 + 验 + 验 可生长 试验 敏感 溶菌 试验 + 新生儿肺炎、脑膜炎和败血症 B群链球菌
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临床检验技士考试辅导 肺炎链球菌——生物学特性 形态与结构
形态：革兰阳性球菌。 大小：0.5～1.25μm。
微生物检验
排列：矛尖状，钝面成双排列，有时呈短链状。 染色：G。
特殊结构：有荚膜，无鞭毛，无芽胞。
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培养特性 营养要求：较高。
气体环境：需氧或兼性厌氧。 温度环境：35～37℃；pH7.6～8.0。
菌落特征：在肉汤及琼脂培养基上生长不良，在含3%～5%兔或羊血清肉汤中生长良好。在血琼脂平板上可形成灰色扁平、中心凹陷直径为0.5～1.0mm的菌落（脐窝状），周围有草绿色溶血圈。在液体培养基中培养24h，呈均匀混浊，培养时间过长，可因自溶，培养液变澄清，管底沉淀。
抗原性：荚膜多糖抗原。 抵抗力：较弱。
肺炎链球菌——微生物检验及鉴定 标本采集
形态学检查：革兰阳性矛尖状双球菌。 分离培养：
血液、脑脊液经葡萄糖硫酸镁肉汤增菌后，可呈均匀混浊，而且有绿色荧光。
脓汁或脑脊液沉渣接种于血琼脂，置5%～10% C02环境中，经35℃ 18～24h培养后观察菌落。 生化试验（鉴定）
肺炎链球菌 触酶试验 - 动物试验 敏感 荚膜肿胀试验 + 奥普托欣试验 敏感 胆汁溶解 + 菊糖发酵试验 +
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临床检验技士-微生物检验 讲义 13
