SP-C基因exonⅡ结构基因突变与新生儿呼吸窘迫综合征
的关系
牛银萍 1，郭淼 1，付朝阳 1，王喆 2
【摘 要】摘要:目的 探讨表面活性物质蛋白C（SP-C）基因exonⅡ结构基因突变与新生儿呼吸窘迫综合征（NRDS）的关系。方法选取2014年2月至2017年12月在我院治疗的NRDS患儿110例（NRDS组），同时选取新生儿病房非NRDS患儿110例作为对照组，采用PCR及基因分析技术检测SP-C基因exonⅡ突变。结果 SP-C基因exonⅡ基因测序发现第115位基因位点杂合突变c.115G＞T，为错义突变；NRDS组G/T基因型比例为8.18%，明显高于对照组0.00%，差异比较有统计学意义（P＜0.05）；G/T患儿胸片Ⅲ～Ⅳ级比例和病死率分别为100.00%和66.67%，明显高于GG型患儿51.49%和6.93%（P＜0.05）；G/T和GG型患儿性别、胎龄、出生体重、使用机械通气比例和PS使用3～4剂比例差异比较无统计学意义（P＞0.05）。结论 SP-C基因exonⅡc.115G＞T基因突变可能与NRDS严重程度有一定关系，值得进一步研究。
【期刊名称】实验与检验医学 【年(卷),期】2024(036)005 【总页数】4
【关键词】表面活性物质蛋白C；exonⅡ结构；基因突变；新生儿呼吸窘迫综合征
新生儿呼吸窘迫综合征 （neonatal respiratory distress syndrome，NRDS）是临床上较为常见的呼吸系统疾病，流行病学研究显示，NRDS的发病率可达
233～455/1万人左右，在孕周介于28～32周之间时，NRDS的发病率可进一步上升[1]。
表面活性物质蛋白C（surfactant protein C，SPC）的功能状态或者表达缺失是影响到NRDS发生的重要因素，蛋白水平的修饰或者空间结构的改变，能够通过影响到SP-C的合成量及生理功能，促进NRDS的发生[2]。SP-C基因exonⅡ结构基因突变能够通过影响到SP-C的表观遗传学的改变，影响到肺泡表面凝脂的分泌，降低了SP-C前体成分的卷曲、末端修饰及磷酸化等过程，增加了肺泡扩张过程中肺泡表面张力，促进了肺泡的萎缩[3，4]。部分研究揭示了SP-C蛋白的表达异常对于NRDS的发生的影响，认为SP-C的表达下降是促进NRDS发生的重要因素[5]，但对于基因水平的改变研究不足。为了进一步探讨SP-C基因exonⅡ结构基因突变与新生儿呼吸窘迫综合征的关系，本研究选取2014年2月至2017年12月在我院治疗的NRDS患儿110例，探讨了exonⅡ基因突变与NRDS临床特征的关系，报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取2014年2月至2017年12月在我院治疗的NRDS患儿110例（NRDS组），纳入标准：⑴符合《实用新生儿学》第4版中的诊断标准；⑵患儿监护人知情同意。排除标准：⑴有严重先天性疾病、遗传代谢性疾病、严重窒息等；⑵母亲孕后期有明确感染史；⑶孕期糖尿病、胎膜早破。同时选取新生儿病房住院未发生NRDS患儿110例作为对照组，两组患儿性别、胎龄、出生体重及母亲年龄比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。本研究获得医院伦理委员会批准。
1.2 试剂和方法 离心机minix-6k购自上海精密仪器有限公司，Applied
Biosystems ABI 2720购自美国墨塞飞公司，荧光PCR试剂盒Real-Time PCR Reagents&Kits购自美国墨塞飞公司。
1.3 检测方法 采集患者抗凝血5ml（2.5%枸椽酸钠溶液抗凝），按照10000r/min的离心速度进行离心分离血清，每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的氯仿，加0.2ml氯仿，剧烈摇动30s，室温 3min，12000×g，4℃离心 15min 得到 RNA。加等体积异丙醇，-20℃，30min，弃上清，加75%乙醇 1ml，振荡，20μl DEPC 水，室温放置 5min 使其完全溶解。加入逆转录酶5ul，室温下放置20min后植入37℃水浴锅中孵育30min，在底物中加入上游引物0.5uM、下游引物0.5uM，RT-PCR反应混合液 5ul，dNTP 稀释至 20ul， 反应条件：95℃3min、95℃15s、90℃5s，一共 40 个循环，产物扩增长度为134bp。
1.4 统计学处理 统计分析采用SPSS 19.0软件，计量资料采用（±s）表示，组间比较使用t检验，计数资料比较使用χ2检验，以P＜0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 SP-C基因exonⅡ基因突变筛查 SP-C基因exonⅡ基因测序发现，第115位基因位点发现杂合突变c.115G＞T，为错义突变，基因型为G/T（突变型），c.115G＞T突变基因测序序列见图1。
2.2 两组SP-C基因exonⅡ c.115G＞T基因突变分析 NRDS组G/T基因型比例为8.18%，明显高于对照组，差异比较有统计学意义（P＜0.05），见表2。 2.3 SP-C基因 exonⅡ c.115G＞T基因突变与NRDS临床特征关系 G/T患儿胸片Ⅲ～Ⅳ级比例和病死率分别为100.00%和66.67%，明显高于GG型患儿
SP-C基因exonⅡ结构基因突变与新生儿呼吸窘迫综合征的关系
