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药理实验方法学

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(克) 用药前 用药后

1 氯丙嗪

2 氯丙嗪 3 NS 4 NS 【注意事项】

1、挑选异笼饲养雄性小白鼠,以30克左右为宜。

2、刺激电压从低到高,过低不引起激怒,过高会使小白鼠逃避,激怒反应不典型。

3、应随时清除导电铜丝板上的大小便,以免影响导电。

二、药物的抗惊厥作用(电刺激致惊厥法)

【目的】观察药物的抗惊厥作用。 【材料】

动物:小白鼠2只。

仪器:药理生理多用仪、小白鼠笼。1ml注射器2只、天平。 药品:0.5%苯巴比妥钠溶液、生理盐水。

【方法】

取小白鼠2只,分别称重并编号。将多用仪“刺激方式”扭旋到“单次”的位置上,“频率”扭拨到4Hz。再用导线由后面板两芯插座引出交流电压,把后面板上的开关拨向“电惊厥”一边,并将输出的导线前端两鳄鱼夹的两端用生理盐水浸润。一只鳄鱼夹夹在小白鼠两耳间的皮肤上,另一只夹在下颌的皮肤上,也可直接夹小鼠两耳。接通多用仪的电源导线,打开电源开关,按“启动”按钮,即可使小白鼠产生惊厥(电压强度从80V开始,如未产生惊厥,可把电压提高到90~100V),如仍不出现惊厥,可将“频率”扭由4Hz改为2Hz或1Hz,(如再无效,则将该鼠弃之另换)。

观察小白鼠的惊厥过程:潜伏期→强直期→阵挛期→恢复期。以后肢强直作为惊厥指标。然后甲鼠腹腔注射0.5%苯巴比妥钠溶液0.1ml/10g(50mg/kg),乙鼠给以生理盐水(同容积同途径)作为对照。30分钟后,以药前同样参数进行刺激,观察两鼠的反应有何不同。

【结果】 动物号 体重 药物与剂量 通电参数 惊厥反应 (克) 用药前 用药后

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甲 乙

【注意事项】

通电参数由于动物个体差异而有所不同。电压以能引起惊厥为宜,不宜过大。

三、抗疲劳实验

(一) 小鼠游泳实验

【目的】观察药物对小鼠游泳时间长短的影响,评价药物的抗疲劳作用。 【材料】

动物:成年雄性小鼠4只。

仪器:游泳箱(大小约50cm×50cm×40cm)、电子天平、铅皮、1ml注射器。

药品:待测药物、生理盐水

【方法】

取小鼠4只,随机分为对照组和给药组,给药组腹腔注射待测药物,另一组给予等量的生理盐水作为对照。给药后30分钟,置小鼠在游泳箱里游泳,水深不超过30cm,水温保持恒定,常用25-30℃。鼠尾根部负荷5%体重的铅皮,用秒表计算鼻孔沉下水面(超过5秒钟)所需的时间,为小鼠游泳时间。观察两组游泳时间有无差异。

【结果】 鼠号 体重 药物 游泳时间(分)

(克)

【注意事项】

1、水温对小鼠的游泳时间有明显的影响,因此要求各组水温控制一致,以25℃为宜,如果过低可能引起小鼠痉挛,影响实验结果。

2、铅皮缠绕松紧应适宜。

3、观察者应在整个实验过程中使每只小鼠四肢保持运动,如果小鼠漂浮在水面四肢不动,可用木棒在其附近搅动。

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4、受试动物应采用同一批动物进行,避免因饲养环境、年龄、大小等原因所造成的差异。

(二)棒式疲劳仪实验

【目的】观察药物对于小鼠在转棒式疲劳仪上剧烈运动时间长短的影

响,评价药物的抗疲劳作用。

【材料】

动物:成年雄性小鼠4只。

仪器:XZC-4B转棒式疲劳仪、天平、1ml注射器。 药品:待测药物、生理盐水

【方法】

取小鼠4只,随机分为对照组和给药组,给药组腹腔注射待测药物,另一组给予等量的生理盐水作为对照。给药后30分钟,置小鼠于转棒式疲劳仪上,调整传送带位置,挂到24转/分,按动转动按钮,转棒转动,提小鼠尾将小鼠放到转棒上按下清零按钮,清零后开始记数(显示圈数)。并插上前挡板。当小鼠跌落下来后压动下踏板,记数器被锁住,此时显示的数字就是停留在转棒上的圈数,计算小鼠在转棒上停留的时间(分)=记数显示值/每分钟转数。比较二组时间上有无差异。一批实验结束后将鼠拿出,并将踏板托起以备下批使用。

【结果】 鼠号 体重 药物 停留时间(分)

(克)

【注意事项】

1、用小鼠实验时应提前进行筛选和训练,应选用在棒上爬动3分钟而不落下的小鼠进行实验,小鼠实验前的学习和适应对实验至关重要。

2、不可强行限制转轴转动,需要更换转速时请先按停止按钮,待停止后更换皮带位置。

3、受试动物应采用同一批动物进行,避免因饲养环境、年龄、大小等原因所造成的差异。

四、迷宫趋食实验

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【目的】动物饥饿时,趋食反应较强,通过复杂迷宫游走后取得食物,

获得记忆。本实验观察待测药物对于这种记忆力的保护作用。

【材料】

动物:成年雄性小鼠2只。

仪器:复杂迷宫装置、天平、1ml注射器。 药品:待测药物、生理盐水

【方法】

取禁食12小时的小鼠2只进行训练。在迷宫中心小室放置食饵。通过训练,使小鼠记忆取食的截近。以小鼠从迷宫起点到中心室所需时间和通入盲道的错误次数为指标。记录小鼠取得食物的时间及错误次数。然后甲鼠腹腔注射待测药物,乙鼠给以生理盐水(同容积同途径)作为对照。30分钟后,以药前同样条件放入迷宫,观察两鼠取得食物的时间及错误次数有何不同。

【结果】 鼠号 体重 药物与剂量 时间(分) 错误次数

(克) 用药前 用药后 用药前 用药后

【注意事项】

1、实验时必须保持环境安静,室内光线不宜过强,要保持稳定,室温在25℃为宜。

2、实验动物实验时应提前进行筛选和训练,禁食时间应一致,否则影响实验结果。

五、镇咳祛痰平喘实验

(一)药物的平喘作用

【目的】1. 观察组织胺的致喘作用。

2.了解氨茶碱的平喘作用。

【材料】

动物:豚鼠,250g左右。

仪器:透明喷雾室一个、喷雾器一个、人工呼吸机一台、1ml注射器两副。

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药品:0.1%磷酸组织胺、2%氯化乙酰胆碱、2.5%氨茶碱。

【方法】

取体重250g左右的豚鼠两只,甲鼠腹腔注射2.5%氨茶碱0.6ml/100g,乙鼠腹腔注射等量生理盐水。将两鼠放入喷雾室内,观察其活动情况及呼吸快慢。注射后20 分钟,用喷雾器将2%氯化乙酰胆碱10ml 和0.1%磷酸组织胺5ml 的混合液,喷入 喷雾室。观察两鼠一般活动及呼吸情况有何改变。记录两只豚鼠从致喘至倒下这段时间的长短,以证实药物的拮抗作用(停止喷雾后应连续观察5分钟,如5 分钟内不出现上述现象,则表示药物有保护)

【结果】

一般情况

鼠号 体重 药物 倒下时间

喷雾前 喷雾后

甲 2.5%氨茶碱

乙 生理盐水

(二)可待因的镇咳作用

【目的】1. 学习用浓氨水引咳的方法;

2. 观察可待因的镇咳作用;

3. 学习量反应资料的显著性检验(t-test)。

【材料】

动物:昆明种小白鼠,体重18-22g,♀♂兼用 仪器:鼠笼、天平、灌胃器、棉球、大烧杯

药品:0.3%磷酸可待因,0.9%生理盐水,浓氨水

【方法】

1. 每组取8只小鼠,称重,标记,随机分两组;

2. 给药:实验组i.g. 可待因0.2ml/l0g,对照组i.g. 生理盐水0.2ml/l0g,每只小鼠给药间隔4min左右;

3. 给药后30分钟将小鼠扣入500ml烧杯中,再将注入0.2ml浓氨水的棉球迅速放入烧杯中,立即记录小鼠的咳嗽潜伏期和2分钟内的咳嗽次数。

【结果】

全室结果汇总,做咳嗽次数的t-test。

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药理实验方法学

(克)用药前用药后1氯丙嗪2氯丙嗪3NS4NS【注意事项】1、挑选异笼饲养雄性小白鼠,以30克左右为宜。2、刺激电压从低到高,过低不引起
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