应用DHPLC技术检测非缺失型DMD致病基因的新突变
陈亚男;周鑫;金春莲;徐岩;林长坤;曹丽华;李宁;张学;罗阳
【期刊名称】《中华儿科杂志》 【年(卷),期】2007(045)006
【摘要】目的 建立检测Duchenne型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,DMD)致病基因dystrophin突变的快速、敏感的微小突变筛查系统.方法 选择经多重PCR检测未发现dystrophin基因大尺度缺失的DMD患儿20例,年龄在2～10岁,以其基因组DNA为模板,通过PCR反应,分别扩增dystrophin基因外显子及侧翼序列,采用变性高效液相色谱(DHPLC)技术进行突变筛查,对DHPLC峰形变异的外显子片段行PCR产物直接测序,确定突变的具体位点和类型.结果 筛查了包括2个缺失热点区dystrophin基因的68个外显子和3'UTR部分片段,分别在4例患儿中检测出该基因的4种致病突变:c.6808_6811delTTAA,c.4959_4960insA,c.8656C＞T和c.8608C＞T.前两例引起移码突变分别导致p.Leu2270MetfsX9和p.Ser1654LysfsX5,后两例为无
义
突
变
分
别
导
致
p.R2886X
和
p.R2870X.
其
中
c.6808_6811delTTAA,c.4959_4960insA和c.8656C＞T为文献未曾报道的新突变.结论 DHPLC可以作为有效地筛查DMD微小突变的检测方法. 【总页数】4页(413-416)
【关键词】肌营养不良,杜氏;色谱法,高效液相;突变
【作者】陈亚男;周鑫;金春莲;徐岩;林长坤;曹丽华;李宁;张学;罗阳
【作者单位】110001,沈阳,中国医科大学医学基因组学教研室,卫生部细胞生物学重点实验室;110001,沈阳,中国医科大学医学基因组学教研室,卫生部细胞生物
应用DHPLC技术检测非缺失型DMD致病基因的新突变
