胃癌组织EZH2与凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax
表达的关系及意义
高德全1，张建波1，王联林2，崔利军3
【摘 要】[摘要] 目的 探讨胃癌组织中果蝇zeste 基因增强子同源物2(EZH2)、Caspase-3、Bcl-2、Bax的表达关系及其临床意义。方法 收集62例胃癌手术患者的肿瘤及52例癌旁正常胃黏膜组织石蜡标本进行免疫组织化学(SP)染色，同时检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白的表达，相关分析探讨EZH2与这3种蛋白质之间的关系及意义。结果 胃癌组织中EZH2、Bcl-2表达与癌旁正常组织比较明显增强(P均<0.05)，Caspase-3、Bax蛋白在胃癌组织中表达较癌旁组织明显降低(P均<0.05)；EZH2蛋白表达随肿瘤分化程度降低而升高、随分期的升高而升高；相关分析显示，EZH2与Caspase-3、Bcl-2与Bax表达存在负相关关系(P均<0.05)；其余蛋白之间表达无明显相关性(P>0.05)。结论 EZH2蛋白在胃癌组织中表达增强，且与肿瘤分化程度及分期有关；EZH2蛋白参与胃癌的发病机制在于其可能通过抑制Caspase-3表达而增强胃癌细胞抗凋亡能力。 【期刊名称】现代中西医结合杂志 【年(卷),期】2014(000)015 【总页数】3
【关键词】[关键词] 胃癌；果蝇zeste 基因增强子同源物2；凋亡相关蛋白 凋亡状态异常是恶性肿瘤细胞的常见现象，恶性肿瘤细胞往往具有较强的抗凋亡能力。与肿瘤细胞凋亡有关的主要有死亡受体途径及线粒体途径[1-2]，许多凋亡相关基因参与其中。由于胃癌凋亡调控机制极为复杂，目前尚未完全阐明。
有研究表明，果蝇zeste 基因增强子同源物2(EZH2)可促进多种恶性肿瘤发生进展[3-5]，但迄今有关EZH2蛋白与胃癌细胞凋亡关系的研究还不多见。因此，本研究应用免疫组化(SP)法检测了EZH2蛋白在胃癌和癌旁正常组织中的表达情况，同时检测了与胃癌凋亡关系密切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2、Bax在胃癌中的表达，进一步分析了EZH2蛋白与这些凋亡相关蛋白的关系，对EZH2蛋白在胃癌细胞凋亡调节中的作用和意义进行了初步探讨。
1 临床资料
1.1 一般资料 收集2005年8月—2011年7月在平山县人民医院确诊为胃癌行手术切除肿瘤并术后病理证实的胃癌患者石蜡标本62例，其中52例有癌旁正常组织。所有患者临床病理资料完整，患者术前均未接受放、化疗，均有术后随访资料。其中男48例，女14例；年龄37～72(59.2±11.3)岁；高分化腺癌35例，低分化腺癌27例；TNM分期中Ⅰ～Ⅱ期18例，Ⅲ～Ⅳ期44例。 1.2 免疫组织化学染色(SP)法检测EZH2、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达情况 兔抗人EZH2多克隆抗体购自美国Abcam公司，兔抗人Caspase-3、Bcl-2、Bax多克隆抗体均购自美国Santa Cruz公司。SP试剂盒购自北京中杉生物技术公司。严格按免疫组化试剂盒说明分别对胃癌肿瘤组织和癌旁正常组织进行染色。染色结果由2位病理专业医师分别进行判定评分。每张切片均随机取400倍视野5个，每个视野计数100个细胞，根据肿瘤细胞染色的阳性率计算评分。EZH2蛋白以细胞核出现黄褐色或棕褐色为染色阳性，Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白以细胞浆或细胞核出现黄褐色或棕褐色为染色阳性。细胞内阳性表达率<10%记为(-)，阳性细胞表达10%～50%记为(+)，阳性细胞表达≥50%
记为()。
1.3 统计学处理 采用SAS 8.0统计分析软件对实验数据进行分析。实验数据应用2检验、Spearman相关分析进行处理。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 胃癌、癌旁正常组织中EZH2、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达情况 62例胃癌组织中EZH2、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白阳性表达率分别为69%(43/62)、31%(19/62)、77%(48/62)、35%(22/62)；癌旁正常组织各蛋白表达阳性率分别为21%(11/52)、71%(37/52)、27%(14/52)、62%(32/52)。经成组秩和检验比较，胃癌组织中EZH2、Bcl-2表达阳性率明显高于癌旁正常组织(P均<0.05)，胃癌组织中Caspase-3、Bax表达阳性率明显低于癌旁组织(P均<0.05)。见表1。
2.2 胃癌组织中EZH2、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达与胃癌病理分化程度、临床分期的关系 EZH2、Bcl-2蛋白表达强度均随肿瘤病理分化程度降低、临床分期进展而增强，Caspase-3、Bax表达则随肿瘤病理分化程度降低、临床分期进展而减弱。见表2。
2.3 胃癌组织中EZH2、Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达的关系 Spearman相关分析显示：胃癌组织中EZH2与Caspase-3、Bcl-2与Bax间表达均具有负相关关系(r=-0.378 4、-0.439 6,P=0.002、P=0.000 4)，EZH2与Bcl-2(r=0.224 3,P=0.080)、EZH2与Bax(r=0.115 8,P=0.370 1)、Caspase-3与Bcl-2(r=0.206 6,P=0.107 2)、Caspase-3与Bax(r=-0.186 8,P=0.146)之间关系均无相关性。
3 讨 论
胃癌组织EZH2与凋亡相关蛋白Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的关系及意义
