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药敏实验

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药敏实验

检验原理:含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上,纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断的向纸片周围区域扩散,形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制,形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈越大,MIC越小。

样本要求:鉴定后的致病微生物纯菌落

检验方法:

1、菌液制备:挑选鉴定后的致病微生物纯菌落3~4个菌落置于灭菌0.9%氯化钠液中,制成均匀悬液。

经与浊度管(0.5麦氏单位比浊管)比较,浊度一致。

2、接种平板:用灭菌的棉拭子蘸取制备好的接种菌液,在管壁上旋转挤压几次,去掉过多的菌液,再用试子涂布整个培养基表面,反复几次,每次将平板旋转60℃,最后沿平皿周边绕两圈,用镊子压平。?每张纸片间距不少于24mm,纸片中心距平皿边缘不少于15mm。

3、孵育:贴好纸片后在15min内放到35℃孵箱,将平板倒置培养。平板孵育16~18h后取出。

4、结果判定:培养后取出平板,测量抑菌环的直径,抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。 【检测结果的解释】

用毫米尺量取抑菌环直径,参照下表判读结果,按敏感(S)、中介(I)、耐药(R)报告。

纸片法药敏试验抑菌环直径判断标准(非苛养菌)

抑菌环直径判断标准 抗生素 菌名 纸片含药量 R I S 苯唑西林 青霉素G 葡萄球菌 1μg ≤10 ≤28 ≤14 ≤19 ≤13 ≤15 ≤15 ≤14 ≤16 — ≤14 — — 11-12 ≥13 ≥29 ≥15 ≥16 ≥23 ≥21 ≥21 ≥18 ≥21 ≥15 ≥17 ≥17 ≥17 红霉素 大观霉素 克拉霉素 万古霉素 葡萄球菌 肠球菌 其他链球菌 葡萄球菌 肺炎链球菌 其他链球菌 淋病奈瑟菌 其他链球菌 葡萄球菌 肠球菌 肺炎链球菌 其他链球菌 10μg 15μg 100μg 15μg 30μg — — 20—27 14—22 16—20 16—20 15—17 17—20 — 15—16 — — 克林霉素 氯霉素 四环素 米诺环素 诺佛沙星 环丙沙星 左氟沙星 多粘菌粘B 复方新诺明 SMZ/TMP 葡萄球菌 肺炎链球菌 其他链球菌 葡萄球菌 肠球菌 肺炎链球菌 其他链球菌 葡萄球菌 肠球菌 肺炎链球菌 其他链球菌 葡萄球菌 葡萄球菌 肠球菌 葡萄球菌 肠球菌 葡萄球菌 肠球菌 肺炎链球菌 其他链球菌 2μg ≤14 ≤15 ≤15 ≤12 ≤12 ≤20 ≤17 ≤14 ≤14 ≤18 ≤18 ≤14 ≤12 ≤12 ≤15 ≤15 ≤13 ≤13 ≤13 ≤13 ≤8 ≤10 30μg 30μg 30μg 10μg 5μg 5μg 30μg 23.75μgSMZ /1.25μgTMP 300μg 10μg 15—20 16—18 16—18 13—17 13—17 — 18—20 15—18 15—18 19—22 19—22 15—18 13—16 13—16 16—20 16—20 14—16 14—16 14—16 14—16 9—11 11—15 ≥21 ≥19 ≥19 ≥18 ≥18 ≥21 ≥21 ≥19 ≥19 ≥23 ≥23 ≥19 ≥17 ≥17 ≥21 ≥21 ≥17 ≥17 ≥17 ≥17 ≥12 ≥12 呋喃妥因 氨苄西林 葡萄球菌 肠球菌 肠杆菌 铜绿假单胞菌和不动杆菌 ≤14 ≤14 ≤13 ≤11 ≤18 ≤15 ≤14 ≤14 ≤14 ≤16 ≤15 ≤15 ≤14 ≤14 — ≤13 ≤13 ≤14 ≤14 氨曲南 头孢唑啉 头孢噻吩 头孢呋辛 头孢哌酮 头孢噻肟 嗜血杆菌 肠杆菌 肠杆菌 肠杆菌 嗜血杆菌 肠杆菌 铜绿假单胞菌和不动杆菌 30μg 30μg 30μg 30μg 75μg 30μg 肠杆菌 铜绿假单胞菌和不动杆菌 头孢曲松 头孢吡肟 头孢他啶 嗜血杆菌 肠杆菌 铜绿假单胞菌和不动杆菌 30μg 30μg 30μg 肠杆菌 15—16 15—16 14—16 12—14 19—21 16—21 15—17 15—17 15—17 17—19 16—20 16—20 15—22 15—22 — 14—20 14—20 15—17 15—17 ≥16 ≥17 ≥17 ≥15 ≥22 ≥22 ≥18 ≥18 ≥18 ≥20 ≥21 ≥21 ≥23 ≥23 ≥26 ≥21 ≥21 ≥18 ≥18 铜绿假单胞菌和不动杆菌 头孢西叮 氧氟沙星 链霉素 妥布霉素 卡那霉素 哌啦西啉 嗜血杆菌 肠杆菌 肠杆菌 铜绿假单胞菌和不动杆菌 ≤14 — 30μg 5μg 10μg 10μg 30μg 100μg ≤14 ≤12 ≤12 ≤11 ≤12 ≤13 ≤17 ≤17 ≤17 ≤12 ≤14 肠杆菌 肠杆菌 肠杆菌 肠杆菌 铜绿假单胞菌 不动杆菌 庆大霉素 阿米卡星

肠杆菌 肠杆菌

10μg 30μg 15—17 — 15—17 13—15 13—16 12—14 13—14 14—17 18—20 — 18—20 13—14 15—16 ≥18 ≥26 ≥18 ≥16 ≥16 ≥15 ≥15 ≥18 ≥21 ≥18 ≥21 ≥15 ≥17

药敏实验

药敏实验检验原理:含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上,纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断的向纸片周围区域扩散,形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制,形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度,并与该药对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)呈负相关,即抑菌圈越大,MIC越小。样本要求:鉴定后的致病微
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