家兔动脉血压系列实验家兔动脉血压系列实验I. 家兔动脉血压测定及神经、体液调节。II. 家兔减压神经放电。实验目的1.掌握学习动脉插管直接测量和记录动脉血压的实验方法;2.了解减压神经放电的引导记录方法;3.观察某些神经和体液因素对动脉血压的调节;4.观察减压神经传入冲动的发放特征,进一步认识动脉血;5.压变动与减压神经传入冲动发放的相互关系。实验原理?动脉血压的动态平衡和相对稳定性是通过神经和体液因素的调节而实现的;?参与支配心脏活动的神经主要有心交感神经和心迷走神经,支配血管的神经有缩血管神经和舒血管神经。实验原理?在神经调节中以颈动脉窦-主动脉弓的减压反射尤为重要。支配血管的交感缩血管神经兴奋时,使血管收缩、外周阻力增加,动脉血压升高。?体液因素主要为肾上腺素和去甲肾上腺素。它们的作用主要是调节心脏的心输出量、外周阻力等。实验原理心脏的神经支配--心交感神经?其节前神经纤维发自脊髓的第1~5胸段的中间外侧柱,节后神经元位于星状神经节或颈交感神经节内。?节后神经元的轴突形成心脏神经丛,分布在心脏的窦房结、房室交界、房室束、心房肌和心室肌等处。实验原理?心交感节后神经元末梢释放的去甲肾上腺素与心肌细胞膜上的β-肾上腺素受体结合,通过增加自律细胞和心室肌细胞钙内流,导致心率加快,房室交界的传导加快,心房肌和心室肌的收缩能力加强(正性变时、变力、变传导作用)。实验原理心脏的神经支配--心迷走神经?节前神经元的胞体位于延髓的迷走神经背核和疑核,在胸腔内与心交感神经一起组成心脏神经丛,相伴行进入心脏,与心内神经节细胞发生突触联系;?节后神经纤维支配心脏的窦房结、房室交界、心房肌、房室束及其分支;实验原理?心迷走神经节后纤维末梢释放神经递质乙酰胆碱,作用于心肌细胞膜的M型胆碱受体,通过抑制钙内流和自律细胞的内向电流,导致心率减慢,心房肌不应期缩短,房室传导速度减慢,心房肌收缩能力减弱(负性变时、变力、变传导作用);实验原理血管的神经支配与生理作用交感缩血管神经中枢递质延髓的缩血管中枢(T1-L2-3侧角) 去甲肾上腺素交感舒血管神经皮质运动区乙酰胆碱副交感舒血管神经脑干副交感核S2-3外侧核链乙酰胆碱分布作用绝大多数血管多为单一支配)α受体→血管缩β受体→血管舒①调节血压作用大②持续发放紧张性冲动紧张性↑→血管缩紧张性↓→血管舒骨骼肌血管血管舒张①不参与血压调②平时无作用③与情绪、运动有关软脑膜、消化腺、外生殖器血管血管舒张①不参与血压调节②参与调节局部血流特点实验原理心血管活动的神经调节心血管中枢(延髓)迷走神经窦神经心迷走神经心交感神经交感缩血管神经感受器(颈动脉窦和主动脉弓)效应器(心、血管)实验原理血压升高时,可引起压力感受性反射,其反射效应是使心率减慢,外周血管阻力降低,血压回降,这一反射也称为减压反射;减压反射是一种负反馈调节机制。它在平时经常起作用,使动脉血压维持在比较恒定的水平。实验原理减压神经放电是自发的、与心动周期同步而有规则的的群集型放电,电位幅度约100~200μV,3~5次/s。每次放电幅度是突然增加,然后逐渐减弱至终止,即在心缩期动脉血压升高时放电增加,在心舒期动脉血压下降时放电减少。借助监听器可听到类似火车开动时所发出的有节奏的隆隆声。神经放电的细胞外记录实验材料1、动物:2、器械:家兔。兔手术台,动物手术器械,动脉插管,压力换能装置,神经放电记录电极,BL-420F生理记录系统。3、药品和试剂:20%氨基甲酸乙酯,肝素化生理盐水(300单位/mL),0.01%肾上腺素,0.01%乙酰胆碱。实验步骤1.家兔麻醉?称重麻醉:20%氨基甲酸乙酯(乌拉坦),1 g/kg (5 ml/kg),耳缘静脉注射。??固定:上肢在背侧交叉,门齿的固定。实验步骤2.家兔颈部手术?手术:钝性分离双侧颈总动脉和迷走神经、右侧减压神经(血管和神经),穿线备用。?插管:左侧颈总动脉——结扎远心端——夹闭近心端——向心方向插管——动脉插管固定。实验步骤?手术结束后给动物静脉注射肝素,全身抗凝,注射剂量为10mg/kg(1ml/kg),使家兔全身肝素化。实验步骤3. 仪器的连接与标定(实验室已准备)a.连接压力换能器和记录通道b.设定血压配置文件c.用水银检压计定标d.肝素生理盐水填充测压系统实验步骤4安放电极注意防止神经干燥,可用液体石蜡。567记录动脉血压和减压神经放电,并监刺激神经或注射药物改变血压,观察处死动物,整理清洗器材,处理动物听声音。并记录神经放电的变化。尸体,打扫卫生。注意事项?麻醉药注射时速度要缓慢,如实验时间较长,动物苏醒挣扎,可适量补充麻醉药;?分离神经时要用玻璃分针,保护神经不要过度牵拉,并滴加生理盐水保持神经湿润;?动脉插管与动脉方向一致,防止刺破血管或影响压力传递障碍;注意事项减压神经很细,不易分辨,利用图示中的“外翻”手法更容易找到需要分离的血管和神经;保证仪器与动物接地良好,避免交流电干扰。每观察一项之前,待前一项结果平稳后,再进行。观察指标1.观察正常血压曲线(一级波、二级波等)。2. 记录正常减压神经冲动发放的情形,并注意减压神经冲动、监听的声音的特点。3. 由耳缘静脉注入0.01%去甲肾上腺素溶0.3m1,观察减压神经冲动、监听的声音的变化,并记录血压变化。4. 由耳缘静脉注入0.01%乙酰胆碱溶液0.2ml,观察减压神经冲动、监听的声音的变化,并记录血压变化。5.夹闭一侧颈总动脉5~10 秒,血压变化?6.电脉冲(5V, 25Hz)分别刺激减压神经外周端和中枢端,观察减压神经冲动、监听的声音的变化,血压变化?7.电脉冲(5V, 25Hz)刺激迷走神经外周端,观察减压神经冲动、监听的声音的变化,血压变化?实验结果正夹闭常颈总血压动脉脉刺激迷走神经注射去甲肾上腺素实验结果正夹闭常颈总血动脉压脉刺激迷走神经注射去甲肾上腺素实验结果兔减压神经正常放电实验结果加乙酰胆碱后兔减压神经放电思考题?待补充参考文献1.解景田, 刘燕强, 崔庚寅. 生理学实验(第4版). 高等教育出版社. 2016 2.张才乔. 动物生理学实验(第二版). 科学出版社. 2014年3.李光华. 人体生理学实验指导. 科学出版社. 20134.金天明. 动物生理学实验教程. 清华大学出版社. 20125.项辉, 龙天澄, 周文良. 生理学实验指南科学出版社. 2008 6.李仁德,董守良,陈强. 人体及动物生理学实验指导. 兰州大学出版社. 20017.thFox. Human physiology lab manual (9Ed.). 2002
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