3. 在做比色皿检测时样品臂必须放下来。 4. 使用电脑上的软件对仪器进行初始话。
5. 当检测完成后,移出比色皿,倒出样品,清洗干净比色皿。
空白对照和吸收光计算
当Nanodrop 2000/2000C分光光度计做好空白对照后,仪器会自动记录空白参照液的光谱结果并保存起来作为波长的光强度参比值。当进行样品检测时,透过样品的光强度将被记录下来。样品的透过光强度和空白对照的透过光强度按下列公式来计算样品吸光值:
这样,可以通过样本和空白对照的透过光强度来计算特定波长下的吸光值。 通过Beer-Lamber定律来确定样品浓度和吸光值之间的关系:
A=吸光值(A)
ε=波长依赖的摩尔消光系数(单位 L/mol*cm) b=光程(单位 cm)
c=样品浓度(单位 mol/L)
参比溶液,或者空白溶液,通常是那些融解靶向分子的溶剂,这个溶剂要和样品溶液具有相同的pH值和离子强度。
基座检测空白循环
我们建议把空白对照当成样品来检测,这样可以确认仪器性能完好并且基座上没有样品残留,按下列操作来运行空白循环:
1. 软件中打开将进行的操作模式,把空白对照加到基座上,并把样品臂放下。 2. 点击Blank来进行空白对照检测并保存参比图谱。
3. 重新加空白对照到基座上,把它当成样品一样来检测,点击Measure来进行检测,
结果应该是差不多为一水平线,吸光值变化应不超过0.04A(10mm光程)
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4. 擦去上下基座上的液体,重生进行上面的操作,直到检测光谱图的变化不超过
0.04A(10mm光程)。
虽然不需要在每个样品之间进行空白校准,但我们建议在检测多个样品时,最好每30min进行一次空白校准。30min后,最后一次做空白检测的时间将显示在软件下面的状态栏上。
荧光染料
在进行Micro Array 和Protein & Labels检测时,软件使用Beer-Lambert定律来进行荧光染料计算。用户可以使用Dye/Chrom来编写新的新的染料。下表是软件中保存的染料的参数:
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2.软件
电脑配臵
Microsoft Windows XP或者Vista(32bit)操作系统 1.5GHz或者更高速的处理器 CD ROM光驱
1GB或者更高的内存(Vista系统需要2GB) 40MB硬盘空间
具有USB端口(仪器通过USB与电脑连接)
软件安装
系统软件必须在仪器连接到电脑上之前安装好,安装软件时必须使用管理员用户进入电脑。按下列步骤来正确的安装软件: 1. 关闭所有程序,并把USB线拔出。
2. 把软件光盘插入到驱动器中,软件的安装menu会自动显示,如果安装不能自动开
始,点击Start并选择Run。在Run对话框,输入 x:\\Set-up,这里的“x”代表电脑的光驱,点击OK.
3. 按照屏幕提示来进行操作来安装软件,然后连接USB线。如果出现“发现新硬件提
示”,Windows XP SP2操作系统将询问是否需要通过Internet来寻找合适的软件,选择—No,not this time,然后自动进行软件安装。
这时NanoDrop 2000/2000c分光光度计就可以使用了。如果软件不能打开,参考“Diagnostics and Troubleshooting”来寻找解决办法。 可以在NanoDrop公司的网站上及时下载软件更新。
Thermo软件安装资质
Thermo软件的安装资质程序执行NanoDrop 2000/2000c软件的安装资质。安装资质检验安装的是否是正确的软件,并可用来检验这些文件在安装时是否被修改,删除或者覆盖。
运行Thermo软件安装资质程序: 1. 选择桌面Start打开Start menu。
2. 选择All programs>Thermo>Thermo Software IQ。 3. 按照操作提示来认证您系统软件的安装。
4. 使用Help菜单进入 Thermo IQ User Guide PDF.
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线连接
在使用仪器进行样品检测前,需要使用USB连接线把仪器和电脑相连,把12V的电源线接到仪器背面的插口上,并连接电源。
当仪器不使用时,电源不用拔下,当仪器处于“待命”状态时,其功率为5W,这时闪烁氙灯处于关闭状态。在仪器背面的电源线插口上面有一个LED灯指示仪器正连接上12V电源。
注册您的仪器
请及时注册您的仪器,我们会在网上升级软件并且免费增加新的特性。我们会及时更新我们的用户名单,这样我们可以及时通知您这些软件的更新。所有提供的信息都市完全可信的,请在网上注册您的仪器。
软件特征
NanoDrop 2000/2000c软件被分为左右两块,状态栏和工作按键在左侧,而右侧显示主菜单和数据窗口。在NanoDrop 2000的用户守则中有一个“附件”中包括一页软件特征总则。
软件左侧部分 任务栏
任务栏选项包括以下几个选项:
Home-显示特定用户群所能够操作的应用的主菜单,默认的用户群为Classic。 My Date-管理数据的存档和恢复。样品数据保存在用户指定的文件夹中,请参考“数据和帐户管理”来查看详细内容。
Options-包括4个控制键,请参考“数据和帐户管理”来查看详细内容。
任务工具栏选项可以打开特定的应用,包括:
Measure(指定应用)-显示最近选择的应用。 Reports-包括下列三个功能键:
? Report-显示累积的样品数据结果表格,并显示选择样品的吸光图谱。 ? Configuration-选择一个报告栏显示,并选择报告栏显示的顺序。 ? Print-选择需要打印的相关信息,设定打印页面格式和报告中打印图标的
格式。
Oligo Calc(仅应用于核酸和Micro Array)-计算特定核酸分子的分子量,激发效率,浓度因子和熔点。请参考“核酸”和“Micro Array”中的“Oligo Calc”来获取详细信息。
Dye/Chrom.Editor(仅应用于Miro Array和Protein & Labels)-让用户进入并编写新的染料参数,参考Miro Array和Protein & Labels中的Dye/Chrom.Editor来获取详细信息。
Editor Options(方法编辑栏内)-微编辑方法设定可用的选择。
功能键
当应用被打开时,下列的四个功能键被显示在左侧栏的顶部:
Measure-开始进行样品检测,这个功能键在刚进入一个应用时是灰色的,当做好空白对照后才能使用。
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Print Screen-在默认打印机上打印样品的数据和相应的光谱图。 Blank-使用溶解样品的缓冲液来做空白对照。在进行样品检测前必须先做空白对照。
Re-Blank-使用溶解样品的缓冲液来再做个空白对照。Re-Blank功能会对最近的一个样品浓度重新计算,并在屏幕上显示修正后的光谱图。
当选择Method Editor或者Kinetic Editor时,会显示下列四个功能键: New-开始建立一个新的客户定制型方法。 Save-在当前选择的组中保存编写的方法。 Measure-打开新编写好的方法。 Delete-删除一个方法。
左侧栏的其他特征选择 主工具栏选择
File-主工具栏下拉菜单中包括下列选项:
? New Workbook-打开一个新的工作本,而当前使用的工作本将被保存并
自动关闭。
? Close Workbook and go Home-关闭当前的工作本并回到主页面,当
工作本被关闭时所有的数据都会自动保存。
? Close All Workbook and go Home-关闭所有工作本(所有运用和方
法)并回到主页面。
? Print Report-在默认打印机上打印当前报告。
? Use current setting as default-当一个新的应用工作本被打开时,把当
前的应用参数如:样品类型,单位,基线校准波长和比色皿类型设定为默认。设定好后,当前报告格式也会被设定为默认。这个功能在每个应用和方法中设定特定用户选择时非常有用。
? E-mail current workbook-把当前的工作本粘贴到一个新的Email中。当
要把这些数据发到NanoDrop残破技术支持那里时,请使用My Date 任务栏来定位合适的自动保存文件。使用软件打开文件并发送给技术支持。
注意:虽然在打开自动保存的文件时所有报告内容不能显示,但是所有内容可以被技术支持恢复。
Help-在任何界面下都有可以运用[Ctrl]-m,[Ctrl]-h或者F1键来进入帮助文件。 在帮助菜单下的上诉选项都市针对当前的软件版本和仪器型号的。
左栏仪器设定
Add to Report-显示哪些样品数据被添加到当前的报告中。虽然所有数据被备份到自动保存工作本中并可以以后恢复。在日常使用中最好 把Add to Report选择上,这样使数据恢复更容易。在样品检测前选择添加到报告中来把结果保存到报告和工作本中。
Overlay spectra-显示独个光谱图,一个交叉指针被显示并和最近检测的样品相关联。当覆盖光谱被选择,点击一个光谱来关联交叉指针。 ? 覆盖的样品编号显示在左侧突变的顶部,最后一个检测的样品显示在图的最上
面并被标记为红色。在不同的图谱上点击可以把这个图谱显示为红色。 ? 在进行新样品检测时,去选择Overlay Spectra将清空所有光谱。
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Nanodrop 2000中文操作手册
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