大鼠急性心肌梗死模型的建立

大鼠急性心肌梗死模型的建立

杨文慧 郭 涛1 杨 莉 华宝桐1 刘 娟2

【摘 要】摘 要〔〕 目的 探讨建立一种能模拟临床心肌梗死事件及其病理生理变化的动物模型。方法 SD大鼠麻醉后，经口插管连接小动物呼吸机，开胸高位结扎冠状动脉左前降支。术后1 w超声检测大鼠心功能，TTC染色测量心肌梗死面积，评价模型制作效果。结果 手术成功率为100%，术后1 w动物存活率为90.9%。术后1 w超声检查见大鼠LVEDS、LVEDD较术前扩大，LVFS较术前降低(P<0.05)。大体见缺血区心室壁变薄塌陷。TTC染色测算梗死面积占左室面积的百分比为 35.80%±4.32%。结论 本文成功建立大鼠心肌梗死模型。该模型成功率高、心肌梗死面积稳定，可运用于心肌缺血、心力衰竭、心肌重构的发病机制和治疗方法研究。 【期刊名称】中国老年学杂志 【年(卷),期】2015(000)021 【总页数】3

【关键词】关键词〔〕 动物模型；心肌梗死 1 昆明医科大学第一附属医院心内科 2 昆明医科大学第二附属医院心内科

第一作者：杨文慧(1982-)，女，在读博士，主治医师，主要从事冠心病、心律失常的基础及临床研究。

心肌梗死是冠心病最严重的类型〔1～3〕，深入认识其发病机制并预防它的发生、改善心肌梗死患者的预后一直是研究的重点。为此，需要建立稳定的动物模型来模拟人体发生心肌梗死的病理生理过程，并在此基础上开展研究。因模

型制作过程中进行麻醉、呼吸机使用、手术操作以及心肌梗死病变本身的病理特点，导致造模的成功率低、动物术后存活时间较短、模型平行性差等问题，不利于后续的研究。本研究采用开胸高位结扎大鼠左冠前降支的方法建立大鼠急性心肌梗死模型，旨在为进一步的研究提供稳定可信的动物模型。

1 材料与方法

1.1 动物 7周龄雄性SD大鼠55只，体重230～290 g，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供〔SCXK(湘)2013-0004〕。

1.2 主要试剂 氯化三苯基四氮唑(TTC)：美国Sigma公司(批号：101060270)；异氟烷：上海雅培制药有限公司(批号：685632U)；乌拉坦注射液；4%甲醛溶液。

1.3 主要仪器 小动物呼吸机(上海奥尔科特生物科技有限公司制造，ALC-V9型)，心脏超声仪(GE Vivid E9)；SHA-B水浴恒温振荡器(上海比朗仪器有限公司)；手术器械若干。 1.4 模型制作

1.4.1 麻醉及气管插管 术前禁食、水12 h。9%乌拉坦按照1 ml/100 g剂量进行腹腔注射麻醉〔4〕。注射前回抽针管，以确定没有刺入血管中。大鼠麻醉后，用皮筋挂住大鼠的门齿及四肢，将大鼠仰卧位固定于180 mm×250 mm自制木板上。手术灯探照大鼠颈部，用纱布包裹大鼠舌并向外向上牵拉，可清晰观察到声门，用18 G 38 mm笔筒型静脉留置针经口插入大鼠气管插管，连接小动物呼吸机。观察大鼠的呼吸频率与呼吸机一致，确认气管插管成功后用胶布固定。呼吸机参数设定为：呼吸频率75次/min，吸呼比1∶1，潮气量13 cc。

1.4.2 冠脉结扎 大鼠胸部去毛，消毒手术区域，沿胸骨左缘剪开皮肤，钝性分离肌肉，剪断第3、4肋骨，暴露胸腔。用小动物开胸器撑开胸廓，拉出胸腺并固定。小心剪开心包膜暴露心脏，以肺动脉圆锥与左心耳交界处找到左前降支，在左心耳下方1～2 mm处与肺动脉圆锥间用5-0号线缝合〔5〕。进针深度1～1.5 mm，约缝合5 mm宽心肌，以保证结扎住动脉〔6〕。以心尖处变苍白为结扎成功标志。清除胸腔内残存积血。

1.4.3 关闭胸腔及围术期护理 检查无出血后，用0号线连续缝合肋骨。关闭胸腔之前用5 ml针筒连接套管针负压吸引胸腔内空气及残留渗血，同时挤压胸壁。然后逐层缝合肌肉、皮肤。约5 min后先松开呼吸机接口，观察到大鼠自主呼吸恢复再拔出气管插管。观察大鼠呼吸情况，若呼吸道分泌物过多或者有舌后坠应及时处理。术中及术后麻醉未苏醒前可用烤灯照射，保持动物体温，利于术后恢复。 1.5 模型鉴定

1.5.1 心脏功能评价 造模后1 w行心脏超声检查。异氟烷吸入麻醉大鼠，心前区备皮，仰卧位固定。心前区涂抹耦合剂，使用GE Vivid E9彩色超声仪、9L-D高频探头(频率10.0 MHz)，在二维超声引导下运用M型超声经胸骨旁左室长轴切面，观察室壁运动情况，测量左室收缩末内径(LVEDS)、左室舒张末期内径(LVEDD)和左室短轴缩短率(LVFS)，取3个心动周期的平均值。 1.5.2 大体病理 造模后1 w处死大鼠，迅速取出心脏，置于预冷生理盐水中洗去血液，剔除心房、右心室及筋膜组织。余左心室组织置-20℃冰箱中2 min，取出后沿横切面将左室心肌均匀切成1 mm薄片。将切片放入37℃预热过的1%TTC溶液中，置于水浴恒温振荡器中，37℃振荡染色10～15 min，用4%