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细菌毒素试验步骤：
1、准备工作：
移液管：0.1ml1支，1ml10支
试管：10ml×4支，试管架2个（大小） 烧杯40ml2个，锥形瓶2个
试验所用器皿需经处理除去可能存在的外源性毒素，玻璃器皿置电热干燥箱180℃干烤至少2小时。
细菌毒素检查水10ml×4支
细菌毒素工作标准品1支，每安瓿含毒素10EU 鲎试剂 0.1ml×8支 同一批号3支瓣膜 浸提介质：细菌毒素检查水
浸提介质体积计算公式：V=L?=8.6（ml）
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8.6×3=25.8（ml）
把细菌毒素检查水4支外表擦净打开，倒入烧杯中，用移液管取25.8ml倒入装3只瓣膜烧杯中，用锡纸封口，放进提前打开升温至37℃恒温培养箱中，培养1.5小时。供试液贮存应不超过2小时。
注：V-浸提介质体积，单位为毫升（ml）
L-产品细菌毒素限值，单位为细菌毒素单位每毫升（EV/ml） λ-所用鲎试剂灵敏度标示值，单位为细菌毒素单位每毫升（EV/ml） 2、细菌毒素工作标准品用细菌毒素检查水1ml溶解，在旋涡混合器上混匀15分钟。
①用移液管取0.1ml工作标准品和0.9ml检查水在旋涡混匀器上混匀30秒钟。
②用移液管从第1管中取0.5ml混合液和0.5ml检查水在旋涡混匀器上混匀30秒钟。（阳性对照溶液）
③用移液管取0.1ml工作标准品和0.9ml供试液在旋涡混匀器上混匀30秒钟。
④用移液管从第3管中取0.5ml混合液和0.5ml供试液在旋涡混匀器上混匀30秒钟。（供试品阳性对照溶液）
3、把8支鲎试剂外表擦净全部打开放进试管架中，每支各加入0.1ml细菌毒素检查水，在旋涡器上混匀，其中2支作供试品管，2支作阴性对照管，2支作阳性对照管，2支作供试品阳性对照管。
每支供试品管加入0.1ml供试液；阴性对照管加入0.1ml检查用水；阴性对照管加入0.1ml阳性对照溶液；供试品阳性对照管加入0.1ml供试品阳性对照溶
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液。封闭管口，轻轻摇匀，垂直放入37±1℃恒温器中孵育60±2分钟，然后取出观察结果，试管在孵育期间应避免任何振动。
4、结果判断：将试管从水浴箱中轻轻取出，缓缓倒转180若管形成凝胶，并且凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性（＋），未形成凝胶或形成凝胶不坚实，变形并从管壁滑脱者为阴性（－）。阴性对照管均为阴性，阳性对照管，供试品阳性对照管均为阳性，试验有效，否则无效。若阴性对照管为阳性，表明鲎试剂或检查水或实验器具受污染；若阳性对照管为阴性，表明鲎试剂或标准毒素已失效，或鲎试剂灵敏度及标准毒素效价标示不准确或标准毒素稀释有误。供试品阳性对照管为阴性，表明反应体系有抑制反应干扰因素存在。
一、氯化物
1、配制标准溶液：0.1mol/L硝酸银溶液。
称取1.6987g分析纯硝酸银，定溶至100ml容量瓶中，转入棕色试剂瓶中，避光保存，贴标签。
2、取样，量取50ml样品水平行样（2份）倒入试管中，加5滴硝酸，再加入1ml硝酸银。均不得发生浑浊。
二、硫酸盐
1、配制标准溶液：称取5±0.5g氯化钡（分析纯），定溶至100ml容量瓶，倒入试剂瓶，贴标签。（如果浑浊，把蒸馏水烧开，放凉再用）
2、分析：取样50ml平行样（2份）倒入试管中，加2ml氯化钡溶液，不得发生浑浊。
三、钙盐
1、配制标准溶液：
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称取分析纯草酸铵3.5g，定溶至100ml容量瓶，贴标签。
2、分析：取样50ml平等样2份，倒入试管中，加2ml草酸铵溶液，均不得发生浑浊。
四、二氧化碳
1、配制标准溶液：
称取分析纯氢氧化钙0.3g，定溶至100ml容量瓶，用橡皮塞塞紧，用力振摇，放置1小时，用时取清液。
2、分析：取样25ml平等样（2份）倒入带盖的试管中，加25ml氢氧化钙溶液，放置1小时，振摇，1小时不得发生浑浊。
五、易氧化物
1、配制标准溶液：①高锰酸钾溶液：取3.3克高锰酸钾，加水1050ml，煮沸15分钟，加水到1000ml，密塞后静置2天以上，用微孔玻璃漏斗过滤，摇匀，标定其浓度。
②稀硫酸：取分析纯硫酸（98%）57ml，（注意烧杯里放蒸馏水，沿杯壁缓慢倒入硫酸57ml，定溶至1000ml，放凉再用）
2、标定：取在105℃干燥至恒重的基准草酸钠约0.2克，精密称定，加新沸过冷水250ml与硫酸10ml搅拌使溶解，自滴定管中迅速加入本液约25ml，待褪色后，加热到65℃，继续滴定至溶液显微红色并保持30秒钟不褪；当滴定终了时，溶液温度应不低于55℃，每1ml高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）相当于6.70mg草酸钠，根据本液消耗量与草酸钠取用量，算出本液浓度，即得。
贮藏：置玻璃塞棕色玻璃瓶中，密闭保存。
3、分析：取样100ml平行样（2份）加稀硫酸10ml，煮沸后，加高锰酸钾
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滴定液（0.02M）0.10ml，再煮沸10分钟，粉红色不得完全消失。
六、氨
1、配制标准溶液
①纳氏试剂：称取60g氢氧化钾，溶于约250ml无氨水，冷却至室温。另外称取20g碘化钾溶于100ml无氨水，边搅拌边逐步加入二氯化汞结晶粉末（约10克），至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯化汞溶液，保持搅拌，到出现少量朱红色沉淀不易溶解时，停止滴加饱和二氯化汞溶液，然后把该溶液缓慢注入上述已冷却的氢氧化钾溶液中，边注入边搅拌，并用无氨水稀释至400ml，然后静置过夜。最后将该溶液上清液至聚乙烯塑料瓶中，常温避光保存。
②氯化铵溶液：称取分析纯氯化铵0.0315g，定溶至1000ml（0.0032g 100ml）容量瓶中，转入试剂瓶中保存，贴标签。
2、分析：取样50ml，加纳氏试剂2ml，放置15分钟。如果显色，加氯化铵溶液1.5ml，加无氨水48ml，加纳氏试剂2ml，对照颜色不得更深。（氨含量0.00003%）
七、重金属
1、配制标准溶液
①醋酸盐缓冲溶液：（PH=3.5）称取分析纯醋酸铵25g，加蒸馏水25ml溶解后，加盐酸液[7mol/L(称取0.0255g至100ml定溶至100ml)]38ml，再用盐酸液[2mol/L(称取0.0073g至100ml定溶)]准确调节PN值3.5（电位计指示）用水稀释至100ml，倒入试剂瓶待用。
②硫代乙酰胺溶液：称取硫代乙酰胺4g，加水溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液[由1mol/L氢氧化钠（氢氧化钠4克＋100ml蒸馏水）15ml，
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沉降菌测试方法..
