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猪流行性腹泻病毒JS2008株的传代培养及遗传变异分析

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猪流行性腹泻病毒JS2008株的传代培养及遗传变异分析

朱琳; 孙冰; 孙杰; 郭容利; 范宝超; 李彬; 索朗斯珠; 何孔旺

【期刊名称】《《南方农业学报》》 【年(卷),期】2018(049)009

【摘要】【目的】明确猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)JS2008株的序列特征及其连续传代后的序列变化规律,为筛选出新的疫苗候选毒株提供参考依据。【方法】将分离自华东地区某发病猪场的PEDVJS2008株在Vero细胞系上传代培养至100代,选取部分代次进行病毒滴度测定;每隔10代提取病毒RNA,采用RT-PCR对各代次病毒的S基因、ORF3基因和N基因进行扩增,并与PEDV经典和流行参考毒株进行序列比对及遗传变异分析。【结果】PEDVJS2008株经连续传代至100代,其病毒滴度由105.5TCID50/0.1mL上升至107.5TCID50/0.1mL。JS2008株在传代过程中共有11处碱基发生突变,其中9处发生在传代培养的第10~20代,变异主要位于S基因上(7/11);同时发现JS2008株及其传代株与attenuatedDR13株的相似性最高。基于S基因和N基因序列构建的PEDV系统发育进化树均表明JS2008株各代次与attenuatedDR13株同处于Group3进化群;基于ORF3基因序列构建的PEDV系统发育进化树则显示,JS2008株各代次与attenuatedDR13株均处于同一进化群(Group2)。【结论】PEDVJS2008株通过Vero细胞系进行体外连续传代至100代,其碱基突变主要发生在病毒传代培养的第10~20代,病毒滴度明显提高,抗原量增加,为研制新型PEDV疫苗提供可能,同时推测病毒传代培养10~20代是病毒发生变异以适应细胞培养的活跃期。

【总页数】8页(P.1833-1840)

【关键词】猪流行性腹泻病毒(PEDV); JS2008株; 传代培养; 遗传变异 【作者】朱琳; 孙冰; 孙杰; 郭容利; 范宝超; 李彬; 索朗斯珠; 何孔旺

【作者单位】西藏农牧学院动物科学学院 西藏林芝860000; 江苏省农业科学院兽医研究所 南京210014 【正文语种】中文 【中图分类】S858.28 【相关文献】

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猪流行性腹泻病毒JS2008株的传代培养及遗传变异分析

猪流行性腹泻病毒JS2008株的传代培养及遗传变异分析朱琳;孙冰;孙杰;郭容利;范宝超;李彬;索朗斯珠;何孔旺【期刊名称】《《南方农业学报》》【年(卷),期】2018(049)009【摘要】【目的】明确猪流行性腹泻病毒(Porcineepidemicdiarrheavirus,PEDV)JS2008株的序列特
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