慢病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞
汤浩;项永生;秦玲莎;姜晓丹;徐如祥;陈镇洲
【期刊名称】《中国组织工程研究》 【年(卷),期】2011(015)040
【摘要】背景:原代细胞的转染效率低下一直是制约其发展的主要因素之一,慢病毒转染以其独特的优势成为各种干细胞基因修饰良好的转染方法.目的:验证慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞的可行性.方法:将携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒在含血清或无血清条件下按不同的MOI值分别转染人骨髓基质细胞,长期观察荧光蛋白表达情况.将经修饰的细胞通过立体定向移植入大鼠纹状体内,观察移植细胞的存活及目的基因的表达情况.结果与结论:基因转染48 h后,可见人骨髓基质细胞成功表达绿色荧光蛋白,无血清条件下的转染效率高于含血清条件下的转染效率,转染成功的细胞在体外持续培养2个月以上未见明显的荧光消减.转染后的细胞可在大鼠纹状体存活并持续表达绿色荧光蛋白2个月以上.提示慢病毒是一种高效的转染人骨髓基质细胞的载体,慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白基因转染可以作为人骨髓基质细胞的示踪标志用于体内移植研究.oCKGROUND: Transfection of primary culture cells is an important investigation field on cell biology, but the low transfectionrate is one of the main obstacles which have limited its development and utility for a long time. Lentivirus transfection has becomea good method because of its unique advantages in transfection of primary culture cells.OBJECTIVE: To investigate the feasibility of transfection of human bone marrow stromal cells (hBMSCs)
慢病毒介导增强型绿色荧光蛋白基因修饰人骨髓基质细胞
