雌二醇诱导子宫内膜癌细胞产生的VEGF和bFGF对
MAPK通路的影响
卢燕琼;蒋斯;张洁清;宋红林;李力
【期刊名称】《中华妇产科杂志》 【年(卷),期】2014(049)012
【摘要】目的 探讨雌二醇诱导子宫内膜癌细胞系Ishikawa细胞生成的血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路中主要基因蛋白的影响.方法 实验分为4组:雌二醇组(E2组,加入1 μmol/L的雌二醇作用30 min),抑制剂组[包括Bibf1120组:加入10 μmol/L的VEGF受体抑制剂——Bibf1120; Ponatinib组:加入2.5 μmol/L的bFGF受体抑制剂——Ponatinib; U0126组:加入10μmol/L的MAPK激酶(MEK)特异性抑制剂——U0126.各组均预处理1 h],抑制剂+E2组(包括Bibf1120+E2组、Ponatinib+E2组和U0126+E2组,各抑制剂预处理1h后,加入1μmol/L的雌二醇作用30 min);对照组(仅加入无血清DMEM培养基).(1)以不同浓度(分别为0.01、0.1、1、10、100μmol/L)雌二醇作用于Ishikawa细胞后,采用蛋白印迹法检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白活化水平.(2)采用荧光定量PCR技术检测各组细胞中VEGF、bFGF、MEK1/2、ERK1/2mRNA的表达,蛋白印迹法检测各组细胞中VEGF、bFGF蛋白的表达及磷酸化NEK1/2(p-MEK1/2)、p-ERK1/2蛋白活化水平,流式细胞仪检测各组细胞的细胞周期比例,体外穿膜实验检测各组细胞的迁移能力.结果 (1)不同浓度(分别为0.01、0.1、1、10、100 μmo1/L)的雌二醇作用30 min后Ishikawa细胞中p-ERK1/2蛋白的活化水平分别为0.16±0.03、0.10±0.03、0.41±0.04、0.19±.0.03、
雌二醇诱导子宫内膜癌细胞产生的VEGF和bFGF对MAPK通路的影响
