原发性翼状胬肉与微血管密度的关系研究

原发性翼状胬肉与微血管密度的关系研究

涂晶晶，费秋香

【摘 要】[摘要]目的 探究原发性翼状胬肉与微血管密度（MVD）的关系。方法 将医院手术切除原发性翼状胬肉患者481例作为观察组，取翼状胬肉标本481份；将斜视手术治疗患者127例作为对照组，取切除的球结膜标本127份。各标本行常规组织病理和免疫组织化学染色检查，比较两组标本MVD值和血管内皮细胞生长因子（VEGF）阳性率，并分析翼状胬肉MVD值与VEGF阳性率的关系。结果 观察组翼状胬肉组织MVD值和VEGF阳性率均较对照组结膜组织显著升高（P＜0.05）；翼状胬肉静止期MVD值和VEGF阳性率均较进行期显著降低（P＜0.05）；随着胬肉浸润角膜缘的程度加重，VEGF阳性率也进行性的升高（P＜0.05）；Spearman相关性分析显示，翼状胬肉MVD值与VEGF阳性率呈正相关（r=0.504，P＜0.05）。结论 MVD值及VEGF阳性率均会随翼状胬肉病理分期及临床进展的提高而升高，可预示疾病发展进程，且二者呈正相关。

【期刊名称】西南国防医药 【年(卷),期】2017(027)012 【总页数】3

【关键词】[关键词] 翼状胬肉；角膜；微血管密度；浸润 ·临床论著·

原发性翼状胬肉是一种组织增生性眼科常见病，其主要病理特征为明显纤维血管组织增生，且新生组织超过角膜缘呈浸润性生长侵入角膜表面，随赘生组织侵犯面积逐渐增大，逐渐影响患者视力[1]。目前主要治疗方法是手术切除，但

术后复发率高[2]。大量研究表明，血管因素在翼状胬肉的发生、发展及复发中起重要作用。MVD是用来衡量血管新生定量指标，血管内皮细胞生长因子（VEGF）能促进血管内皮细胞（ECs）生长，二者在推断新生血管在胬肉发生、发展过程中有重要意义[3]。本研究旨在探究原发性翼状胬肉与MVD的关系，为进一步探讨翼状胬肉的发病机制及治疗策略提供参考。

1 材料与方法

1.1 标本来源 选取2015年6月～2016年6月襄州区人民医院治疗的原发性翼状胬肉患者481例，取手术切除的翼状胬肉标本481份，其中男302例，女 179 例，年龄 39～67（53.13±12.34）岁，病程 8～26（17.05±7.51）个月；临床分期：静止期（组织菲薄，无充血，可观察到少量纤细血管，头部较平坦，角膜透明）171例，进行期（组织肥厚，伴有充血，血管多且粗大，头部胶样隆起，角膜点状浸润）310例；胬肉浸润角膜缘程度；Ⅰ度（0.5～2.0 mm）61 例；Ⅱ度（2.1～3.0 mm）163 例；Ⅲ度（3.1～5.5 mm）257 例。 所有患者均为单眼发病，位于鼻侧。另选取同期行斜视手术治疗的127例患者为对照组，取切除的球结膜标本127份，其中男87例，女40例，年龄44～59（151.51±6.84）岁。

纳入标准：未合并角结膜急性炎症；患者知情同意。排除标准：双侧或颞侧翼状胬肉、复发翼状胬肉者；佩戴过眼角膜接触镜者；既往眼部手术史、创伤史者；合并角膜炎、葡萄膜炎、青光眼等眼部疾病者。 1.2 检测指标

1.2.1 组织标本MVD值 常规组织标本取材后，10%福尔马林固定，石蜡包埋连续切片（4μm），行苏木精-伊红染色法（HE）染色：切片脱蜡至水化，苏木

素液染色5min，蒸馏水冲洗去除浮色；0.5%盐酸酒精分色5 s，蒸馏水冲洗10min；复染伊红10 s，至细胞质被染成红色；光学显微镜下控制95%酒精分色2min后，脱水。中性树胶封片，光学显微镜下观察组织病理学变化。低倍镜（40～100倍）扫视玻片寻找到血管密度最高处后，更换高倍镜（200～400倍）计数被染色血管数目，根据计数单位面积微血管数目评价血管生成活跃度。

1.2.2 组织标本VEGF水平 10%福尔马林固定后的组织标本，石蜡包埋连续切片2张（4μm）行免疫组化染色：切片脱蜡至水化，3%过氧化氢孵育10 min，消除内源性过氧化物酶活性，蒸馏水冲洗，PBS缓冲液冲洗2min，冲洗3次。用微波炉行抗原修复，自然冷却至室温，滴加即用型抗体稀释液，4℃过夜；滴加CD31鼠抗人单克隆抗体，37℃孵育30min，PBS冲洗2min，冲洗3次；滴加VEGF鼠抗人单克隆抗体，37℃孵育30 min，PBS冲洗2 min，冲洗3次。二氨基联苯胺显色，苏木素复染，中性树胶封片后，光学显微镜下观察。观察到组织细胞胞浆中出现黄色颗粒即可判定为阳性。采用半定量分析法评分，随机选取5个高倍镜视野，视野内选取100个细胞，阳性率=（阳性细胞数/细胞总数）×100%。

1.3 统计学方法 应用SPSS19.0软件分析数据，计数资料以频数和百分率表示，采用χ2检验；计量资料以±s表示，采用t检验；相关性分析采用Spearman法，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组MVD值比较 观察组翼状胬肉组织MVD值显著大于对照组结膜组织MVD值 （P＜0.05）；翼状胬肉进行期MVD值显著大于静止期（P＜0.05）；