第40讲 微生物的培养与应用
[考纲明细] 1.微生物的分离和培养 2.某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用
知识自主梳理
一 微生物的实验室培养 1．培养基
(1)概念：人们按照微生物对01营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的02营养基质。
(2)营养成分：水、03碳源、04氮源、无机盐四类营养物质，另外还需要满足微生物生长对05pH、特殊营养物质以及06氧气的要求。
(3)培养基的分类 ①按物理状态分类 培养基种类 07液体培养基 半固体培养基 特点 不加凝固剂 加凝固剂(如琼脂) 用途 工业生产 观察微生物的08运动、分类鉴定 微生物分离、10鉴定，活菌计数，菌种保藏 ②按化学成分分类 培养基种类 天然培养基 特点 含化学成分11不明确的天然物质 培养基成分12明确(用化学成分已知的化学物质配成) ③按功能分类 种类 制备方法 原理 依据某些微生物选择培养基 培养基中加入某些化学物质 对某些物质的特殊需求或抗性而设计 鉴别培养基 培养基中加入某种产生特定的颜色或其他变化 用途 从众多微生物中13分离所需的微生物 鉴别不同种类的微生物 举例 加入14青霉素分离得到酵母菌和霉菌 用途 工业生产 09固体培养基 加凝固剂(如琼脂) 合成培养基 微生物的分类、鉴定 用16伊红美蓝15指示剂或化学药品
为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？
培养基鉴别大肠杆菌 提示 在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。
2．无菌技术
(1)含义：指在培养微生物的操作中，所有防止17杂菌污染的方法。 (2)关键：防止18外来杂菌的入侵。 (3)不同对象的无菌操作方法(连线)
答案 ①、②、⑥—b—Ⅰ、Ⅱ ③、④、⑤—a—Ⅲ、Ⅳ 3．大肠杆菌的纯化培养 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 ①操作步骤
计算→19称量→溶化→20灭菌→21倒平板 ②倒平板的方法及注意事项
a．请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：22丙→乙→甲→丁。 b．乙中的灭菌方法是23灼烧灭菌。
c．丁中的操作需要等待24平板冷却凝固才能进行。
1．倒平板操作为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 提示 通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。 2．平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
提示 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
(2)纯化大肠杆菌的两种方法 1)平板划线法
①概念：是通过25接种环在琼脂固体培养基表面26连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②注意事项： a．灼烧接种环 第一次划线 每次划线之前 杀死上次划线后接种环上残留的菌目的 杀死接种环上原有的微生物 种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端，使每次划线菌种数目减少 划线结束 杀死接种环上残存的菌种，避免污染环境和感染操作者 b．灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 c．第二次及其以后的划线操作总是从上一次划线末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终得到由单个细菌繁殖而来的菌落。
d．划线时最后一区不要与第一区相连。
e．划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 2)27稀释涂布平板法
①概念：是将菌液进行一系列的28梯度稀释，然后将29不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
②操作过程
2021高考生物一轮复习第11单元生物技术实践第40讲微生物的培养与应用学案新人教版选修1
