QDs-SA和Cy3荧光标记阿尔茨海默病细胞模型β淀粉样
蛋白的比较研究
唐薇婷;冯莉;肖波;李蜀渝;龙莉莉;杨晓苏;龙小艳
【期刊名称】《中国临床神经科学》 【年(卷),期】2010(018)003
【摘要】目的:观察利用量子点(QDs )标记的链霉亲和素复合物(QDs-SA)和传统荧光染料Cy3分别标记的阿尔茨海默病 (AD)转基因细胞模型β淀粉样蛋白(Aβ)在荧光强度和抗光漂白性能的差异.方法:将pcDNA3.1/APP质粒转染至HEK293细胞建立稳定表达株,Western blot法检测转染细胞APP蛋白的表达,细胞免疫荧光检测Aβ 蛋白生成.建立AD转基因细胞模型,分别应用QDs-SA和Cy3细胞免疫荧光染色技术靶向标记转基因细胞模型的A b蛋白,激光共聚焦显微镜下对荧光强度和抗光漂白特性进行检测.结果:Western blot法在稳定转染pcDNA3.1/APP质粒的细胞中检测到APP目的蛋白谱带,而未转染的空载体转染组细胞未见APP蛋白表达.共聚焦荧光显微镜下观察到: ①APP基因转染后能够生成大量Aβ蛋白;②QDs-SA特异标记的A b蛋白主要分布在细胞膜和胞质,显现出均匀分布的高密度橙红色强荧光;③Cy3特异标记Aβ蛋白荧光强度较QDs-SA标记弱,且细胞膜染色不均匀,部分细胞膜区域有染料少量团聚;④QDs-SA相较于传统Cy3荧光染料的平均荧光强度值更大( P<0.05),488 nm激发光连续激发12 min,QDs-SA荧光标记的Aβ蛋白仍发射较强的橙红色荧光,荧光强度下降了29.25%,而传统荧光染料Cy3荧光强度下降幅度达 76.82%.结论:QDs-SA能有效识别AD转基因细胞模型中Aβ蛋白,且在光稳定性和荧光强度等方面均优于传统的 Cy3荧光染料标记的免疫荧光成像.
【总页数】6页(225-230)
【关键词】阿尔茨海默病;量子点;β淀粉样蛋白;分子成像;激光共聚焦显微镜 【作者】唐薇婷;冯莉;肖波;李蜀渝;龙莉莉;杨晓苏;龙小艳
【作者单位】中南大学湘雅医院神经内科,410008;中南大学湘雅医院神经内科,410008;中南大学湘雅医院神经内科,410008;中南大学湘雅医院神经内科,410008;中南大学湘雅医院神经内科,410008;中南大学湘雅医院神经内科,410008;中南大学湘雅医院神经内科,410008 【正文语种】中文 【中图分类】R741 【相关文献】
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QDs-SA和Cy3荧光标记阿尔茨海默病细胞模型β淀粉样蛋白的比较研究
