环境生物技术实验大纲
1. 教学单位名称：环境与资源学院 2. 课程名称：环境生物技术实验 代码:08264016 类别：学科基础课 性质：必修课 学时：12
学分：同理论课共3学分
面向专业：环境工程
3. 实验课程的教学任务、要求和教学目的
通过环境生物技术实验的教学，促进理论与实践相结合，充实教学内容, 进一步提高教学质量，提高学生运用现代科学技术和科学方法探索新知识的 能力，增强学生的分析问题、解决问题及实际工作能力，达到巩固理论知识, 训练基本实验技能，培养创新能力的目的。
4. 学生应掌握的实验技术及基本技能
使学生在熟练运用环境微生物基本的操作技能的基础上，
掌握降解环境
污染物的微生物降解菌筛选、驯化及诱变技术、微生物固定化技术、污染环 境细菌基因组DNA提取技术、污染物特定降解基因的分离纯化技术、质粒转 化等技术；学会进行综合实验的设计、准备、操作和结果分析；培养学生对 实验原理、方法和结果进行正确理解、仔细观察，认真思考的科学素养和综 合分析问题，解决问题的能力。 5. 实验项目内容、学时分配和每组人数
序 号 1 实验项目名称 实验内容 学时 人数 连续处理系统中紫外诱变菌降解有 机1. 紫外诱变技术方法 污染物 2. 提高微生物对污染物的降解能力 1?阿特拉津降解菌筛选培养基的设计 2?阿特拉津降解菌筛选 2 3 2 农药阿特拉津降解菌的驯化和筛选 3?阿特拉津降解菌驯化 4.阿特拉津降解最佳条件的确定 5?代谢产物分析 2 10
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6?降解效果分析 1. 海藻酸钠包埋固定化 3 微生物的固定化技术 2. 聚乙烯醇包埋固定化 3. 固定化效果 1. 水中DNA勺提取 2 2 4 污染环境细菌基因组DNA勺提取及群 2. 土壤中DNA的提取 落结构分析 3. 提取效果分析 1. 总DNA的提取 2 10 5 2. 引物的设计 阿特拉津氯水解酶基因的扩增及分 析 3. PCR扩增 4. 产里分析 1. 感受态细胞的制备 2 10 6
感受态细菌的制备及细菌的转化 2. 感受态细菌的保存与复苏 3. 转化 2 10 6. 实验教材和主要参考资料
实验教材：《环境微生物技术实验指南》 刘娜 张兰英主编，校内讲义，2006. 主要参考资料：1.《微生物学实验》沈萍 陈向东主编，高等教育出版社出版，2008. 《环境微生物实验技术》肖琳 杨柳燕等主编，中国环境科学出版社出版，
2004。
7. 考核要求、考核方式及成绩评定标准
基本操作要求规范、设计性实验设计合理、实验报告中能提出相关问题及新的想法。
8. 制定人：刘娜 审核人： 日期：2009年8月 9. 学院审定记录
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污染环境细菌基因组DNA勺提取及群落结构分析实验
注：试剂均为分子生物学级别 试剂和耗材：
Tris （超纯 500g） EDTA （超纯 500g） 氯化钠10元x1 75元 x3 异戊醇40元x1 Tris饱和酚160元 元 氯仿10元x5 58元 溶菌酶（1g）28兀 x5 SDS （100g） 48元 醋酸钾68元x1瓶 无水乙醇10元x 5 x1瓶 醋酸钠13元x5 异丙醇15元x5 内酮15兀x5 1.5ml EP 管 25元 X10包 50ml离心管（尖底 圆盖）45元x1包 枪头盒（蓝白 黄各5个）10元x15 冻存管盒（96孔） 22元x5个 蓝枪头30元x5包 白枪头30元x5包 黄枪头30元x5包 个 电泳级琼脂糖 医用PE 一次性手 EB染色剂（1g） 醋酸18x5瓶 泡沫浮子3元x10 （50g） 88元 x5 套8元x10包 聚乙二醇6000 （500g） 48元x1瓶 去离子水 58 元 x2 丙烯酰胺（超纯 250g） 78元x5 尿素（超纯500g） 去离子甲酰胺 48元x3瓶 Per试剂盒204元 （ACS 68元 x5 细菌16srdna引 物 4od（200 元 TEMED（ 100ml） 过硫酸铵 （100g） 丙二醇 88元 68元 27 元 x2 真菌18srdna引 物 4od （ 200元 设备: 咼速离心机 电泳槽 水浴锅 漩涡仪 1000ml 量筒 x5 镊子x 5 摇床 1000ml 烧杯 x5 圭寸口膜195元x1 卷 移液枪 凝胶成像仪 Per仪 电泳仪 制冰机 DGGE系统 玻璃进样针x5 微波炉 双头记号笔（蓝 色）4元x10支 60孔双面板架12 元x5个 3
微生物学实验
