人子宫内膜细胞体外诱导蜕膜化的效果观察
晁贺;刘英;张亚兰;王鹏;李建梅;王晶;王洁义
【摘 要】目的:观察孕激素(progestogen,P)、雌激素(estrogen,E2)和8-溴-环磷酸腺苷(8-Br-cAMP)不同组合的3种方法对人子宫内膜细胞体外诱导蜕膜化的效果.方法:收集因子宫良性疾病行全子宫切除术患者的子宫内膜,分离纯化子宫内膜间质细胞(endometrial stromal cell,ESC),进行细胞体外培养并传代,免疫荧光鉴定细胞类型.分别采用P+E2(PE组)、8-Br-cAMP(PC组)、P+E2+8-Br-cAMP(PEC组)3种不同组合方法蜕膜化诱导处理第3代ESC,并以空白对照为对照组.显微镜下观察蜕膜化过程中的细胞形态变化,化学发光法检测3种不同蜕膜化诱导方法处理24 h、48 h及96 h后细胞培养液中催乳素(PRL)水平,比较3种蜕膜化方法的效果.结果:蜕膜化过程中ESC形态从长梭形逐渐变为圆形,细胞体积变大,胞核增大,部分出现双核或多核,细胞边界变模糊.随着培养时间延长,各蜕膜化诱导组培养液中PRL呈不同水平升高.其中PC组PRL水平及蜕膜化细胞形态均较PE组和PEC组升高明显(P＜0.05).结论:P+8-Br-cAMP法,较P+E2、P+ E2+8-Br-cAMP法能更有效地诱导子宫ESC体外发生蜕膜化,是高效可靠、更合适的蜕膜化诱导方法. 【期刊名称】《生殖与避孕》 【年(卷),期】2014(034)001 【总页数】6页(P6-11)
【关键词】子宫内膜细胞;蜕膜化;8-溴-环磷酸腺苷(8-Br-cAMP);雌激素(E2);孕激素(P)
【作 者】晁贺;刘英;张亚兰;王鹏;李建梅;王晶;王洁义
【作者单位】首都医科大学附属北京妇产医院生殖中心,北京,100026;首都医科大学附属北京妇产医院生殖中心,北京,100026;首都医科大学附属北京妇产医院妇科,北京,100026;首都医科大学附属北京妇产医院妇科,北京,100026;首都医科大学附属北京妇产医院手术室,北京,100026;首都医科大学附属北京妇产医院检验科,北京,100026;首都医科大学附属北京妇产医院检验科,北京,100026 【正文语种】中 文 【中图分类】医药卫生
-6-第 34 卷第 1 期 Vol.34, No.1 2014 年 1 月 Jan.2014 生殖与避孕
Reproduction & Contraception本课题为北京市自然科学基金项目(5122015), 北京市科技新 星基金项目(H020821200190)及首都医科大学附属北京妇 产医院院内基金项目(201114)通讯作者: 刘英; Tel/Fax: +86-10-52276450; E-mail: yingliubj@hotmail.com着床机制。体外研究表明[1,2], 许多因素参与蜕膜化 的过程。其中信号转导因子环磷酸腺苷(cAMP)对 于蜕膜化的诱导作用已得到广泛认可[3]。另外, 孕 激素(progestogen, P)的作用也是发生蜕膜化的重要 条件之一[4]。本研究为进一步明确 P 及 cAMP 在蜕 膜化发生中的作用, 寻求更有效的体外诱导蜕膜化 方式,比较了 P+E2、P+E2+8-Br-cAMP、P+8-Br- cAMP 3种蜕膜化诱导方法的体外诱导效果, 以期为 进一步研究胚胎着床机制提供实验依据。1材料与方法 1.1 材料 1.1.1 标本来源 收集因子宫良性疾病如子宫肌瘤人子宫内膜细胞体外诱导蜕膜化的效果观察 晁贺 1刘英 1张亚兰 2王鹏 2李建梅 3王晶 4王洁义 4 (1.首都医科大学附属北京妇产医院生殖中心, 北京, 100026)(2.首都医科大学附属北京妇产医院妇科, 北京, 100026) (3.首都医科大学附属北京妇产医院手术室, 北京, 100026) (4.首都医科大学附属北京妇产医院检验科, 北京, 100026)【摘要】目的: 观察孕激素(progestogen, P)、雌激素(estrogen, E2)和 8- 溴 - 环磷酸腺苷(8-Br-
cAMP) 不同组合的 3 种方法对人子宫内膜细胞体外诱导蜕膜化的效果。方法: 收集因子宫良性疾病行全 子宫切除术患者的子宫内膜, 分离纯化子宫内膜间质细胞(endometrial stromal cell, ESC), 进行细胞 体外培养并传代, 免疫荧光鉴定细胞类型。 分别采用P+E2(PE组)、 8-Br-cAMP(PC组)、 P+E2+8-Br- cAMP(PEC 组)3 种不同组合方法蜕膜化诱导处理第 3 代 ESC, 并以空白对照为对照组。显微镜下 观察蜕膜化过程中的细胞形态变化, 化学发光法检测 3 种不同蜕膜化诱导方法处理 24 h、48 h 及 96 h 后细胞培养液中催乳素(PRL)水平, 比较 3 种蜕膜化方法的效果。结果: 蜕膜化过程中 ESC 形 态从长梭形逐渐变为圆形, 细胞体积变大, 胞核增大, 部分出现双核或多核, 细胞边界变模糊。随 着培养时间延长, 各蜕膜化诱导组培养液中 PRL 呈不同水平升高。其中 PC 组 PRL 水平及蜕膜化 细胞形态均较 PE 组和 PEC 组升高明显(P<0.05)。结论: P+8-Br-cAMP 法, 较 P+E2、P+ E2+8-Br- cAMP 法能更有效地诱导子宫 ESC 体外发生蜕膜化, 是高效可靠、更合适的蜕膜化诱导方法。 关键词: 子宫内膜细胞; 蜕膜化; 8- 溴 - 环磷酸腺苷(8-Br-cAMP); 雌激素(E2); 孕激素(P) 中图分类号: R711.6 文献标识码: A文章编号: 0253-357X(2014)01-0006-06doi: 10.7669/j.issn.0253-357X.2014.01.0006E-mail: randc_journal@163.com胚胎成功着床的一个重要因素就是子宫内膜发 生蜕膜化,即子宫进入“容受”状态。蜕膜化是 指子宫内膜间质细胞(endometrial stromal cell, ESC) 在形态和功能上发生的增殖分化, 即细胞发生蜕膜样 改变, 主要表现为: 细胞体积变大变圆, 胞质内充满 糖原颗粒和脂滴, 胞核变圆。发生蜕膜化的子宫内 膜是胚胎成功着床的必要条件, 对蜕膜样变的发生机 制、诱导因素等进行研究, 有利于进一步明确胚胎第 34 卷第 1 期 Vol.34, No.12014 年 1 月 Jan.2014生殖与避孕本课题为北京市自然科学基金项目(5122015), 北京市科技新星基金项目(H020821200190)及首都医科大学附属北京妇产医院院内基金项目(201114)通讯作者: 刘英; Tel/Fax: +86-10-52276450;E-mail: yingliubj@hotmail.com着床
人子宫内膜细胞体外诱导蜕膜化的效果观察
