中药化学成分的预试验检测方法汇总
系统预试法——应用一些简单的定性试验，对中药中所含各类化学成分作全面检查。 单项预试法——依照需要，有重点的检查某类成分或某药效成分。
方法：试管反应+薄层层析检查
中草药要紧来源于植物。植物的化学成分较复杂，有些成分是植物所共有的，如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉、糖类、色素等。有些成分仅是某些植物所特有的，如生物碱类、甙类、挥发油、有机酸、鞣质等。
各类化学成分均具有一定的特性，一样可由药材的外观、色、嗅、味等作为初步检查判定的手段之一。如药材样品折断后，断面不油点或挤压后有油迹者，多含油脂或挥发油；有粉层的多含淀粉、糖类；嗅之有专门气味者，大多含有挥发油、香豆精、内酯；有甜奈者多含糖类；味假设者大多含生物碱、甙类、苦味质；味酸者含有有机酸；味涩者多含有鞣质等等。
中草药所含化学成分均为多类的混合物，分析经常常互相干扰，不易得到正确结果。因此需依照中草药所含各种化学成分的溶解度、酸碱度、极性等理化性质，再用各类成分的鉴别反应加以鉴别。 一、 预试溶液的制备
1、水提取液——糖、多糖、有机酸、皂苷、酚类、鞣质、氨基酸、多肽、蛋白质…… 2、乙醇提取液——酚类、鞣质、有机酸、香豆素、强心苷、黄酮、蒽醌、甾体…… 3、5%HCl-乙醇提取液——生物碱
4、石油醚提取液——甾体、萜类、脂肪油…… 〔一〕鉴别本卷须知 1．依照各灰成分不同性质，选用适宜的溶剂提取，以保证等成分能被提取出来。 2．检品提取液的浓度应足以达到各该反应的灵敏度。
3．检品提取液的酸碱度〔pH〕值应不致阻碍鉴别反应中所需要的pH值。相差甚大时应事先调剂。
4．提取液较深时，常易阻碍观看鉴别反应的成效，现在可适当稀释，或进一步提纯。
5．鉴别反应时应注意防止多类成分的相互干扰，以免显现假阳性，或颜色不正等情形。最好在化学鉴别的同时，做空白试验和对比试验〔用含某类成分的中草药或纯品做阳性对比〕。
6．在鉴别试验中，假如某一类成分的几个鉴别反应结果不一致时〔即有的呈阳性反应，有的呈阴性〕那么应进行全面分析。第一应注意呈阳性反应的试验是否属于该类成分的专一反应，否那么应检查其他类成分能否产生该反应，从多方面加以判定。但也应注意，某些反应只能对某一类成分中的某个化学基团呈性反应，如检查黄酮类的盐酸――镁粉试验，它只对黄酮类中的羟基黄酮类〔黄酮醇类〕反应明显，其余类的黄酮类那么不甚明显，但也不能轻易否定不是黄酮类，为了幸免孤立和片面的下结论，一定要全面考虑综合分析。
中草药化学成分一样鉴别试验屯只是一个初步判定，最后确证尚需进一步提纯，以鉴定后才能予以确信。 〔二〕鉴别方法
1、 氨基酸、多肽、蛋白质
〔1〕加热沉淀试验：加热煮沸 →混浊或沉淀 〔蛋白质〕
+5%H2SO4〔不加热〕→混浊或沉淀
〔2〕双缩脲反应：+40%NaOH，1%CuSO4 →紫色、红色或紫红色〔多肽、蛋白质〕 〔3〕茚三酮反应：+0.2%茚三酮试液 →蓝或蓝紫色〔氨基酸、多肽、蛋白质〕 〔4〕吲哚醌反应：+吲哚醌试液 →各种颜色〔氨基酸〕
〔5〕Millon反应：+Hg，H2NO2 →红色〔蛋白质分子中有酪氨酸组成〕
〔6〕Hopkins-Cole反应：+乙醛酸，浓硫酸 →各色〔蛋白质分子中有色氨酸组成〕 〔7〕氨基酸的薄层层析检查：吸附剂——硅胶G
展开剂—— n-BuOH，n-BuOH：HAc：H2O 显色剂——0.25%茚三酮试液 →紫红色斑点
〔1〕加热或矿酸试验：取检品的水溶液1ml于试管中，加热至沸或加5％盐酸，如发生混浊或有沉淀示含有水溶性蛋白质。
〔2〕缩二脲试验：取检品的水溶液1ml，加10％氧化钠溶液2滴，充分摇匀，逐步加入硫酸铜试液，随加摇匀，注意观看，如出现紫色或紫红色示可能含有蛋白质和氨基酸。
凡蛋白质结构中含有两个或两个以上肽键〔－CONH－〕者均有此反应，能在碱性溶液中与Cu2+生成仙络合物，出现一系列的颜色反应，二肽呈蓝色，三肽呈紫色，加肽以上呈红色，肽键越多颜色越红。
〔3〕茚三酮试验，取检品的水溶液1ml，加入茚三酮试液2－3滴，加热煮沸4－5分钟，待其冷却，出现红色棕色或蓝紫色〔蛋白质、胨类、肽类及氨基酸〕。 氨基酸与茚三酮的水合作物作用，氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳，而茚三酮被还原成仲醇，与所后成的氨及另一分子茚三酮缩合生成有蓝紫色的化合物。 【注】①茚三酮试剂要紧是多肽和氨基酸的显色剂，反应在1小时内稳固。试剂溶液pH值以5－7为宜，必要时可加吡啶数滴或醋酸钠调整。 ②此反应专门灵敏，但有个别氨基酸不能呈紫色，而呈黄色，如脯氨酸。 〔4〕氨基酸薄层层析检出反应： ①吸附剂：硅胶G。
②展开剂：〔1〕正丁醇：水〔1：1〕〔2〕正丁醇：醋酸：水〔4：1：5〕 ③显色剂：0.5％茚三酮丙酮溶液，喷雾后于1100烘箱放置5分钟，显蓝紫允或紫色。 2、 皂苷
〔1〕泡末试验：振摇 →大量连续性泡末
+0.1M HCl 二管泡末高度相同〔三萜皂苷〕 +0.1M NaOH 碱管高于酸管〔甾体皂苷〕 〔2〕溶血试验：+2%红血球悬浮液 →溶血
〔3〕Lieberman—Burchard反应：+醋酐-浓硫酸—— 紫红色〔三萜皂苷〕 黄-红-紫-污绿〔甾体皂苷〕 〔1〕泡沫试验：取检品的水溶液2ml于带塞试管中，用力振摇3分钟，即产生持久性蜂窝状泡沫〔坚持10分钟以上〕，且泡沫量许多于液体体积的1／3。
【注】常用的增溶剂吐温、司盘，振摇时均能产生持久性泡沫，要注意区别。 〔2〕溶血试验：取试管4支，分别加入滤液0.25、0.5、0.75 ml，然后依次分别加入生理盐水2.25、2.0、1.75、1.5 ml，使每一个试管中的溶液都成为2.5ml, 再将各试管加入2％的血细胞悬液2.5ml，振摇平均后，同置于370水浴或25－270的室温中注意观看溶血情形，一样观看3小时即可，或先滴红细胞于显微镜下，然后滴加检液看血细胞是否消逝。如有溶血现象示正反应。
【注】①鞣质对血红细胞有凝集作用，干扰溶血试验的观看，应事先除去〔可用取胜酰胺粉吸附或用明胶沉淀〕。 ②检液应为中性溶液。 〔3〕醋酐浓硫酸试验〔Liebrmann Burchard反应〕取检品的水溶液置蒸发皿中，于水浴上蒸干，残渣加入少量冰醋酸使溶解，再加入醋酐浓硫酸〔19：1〕试液，出现红紫色并变成污色绿色〔甾类、三萜类成分或皂甙〕
〔4〕区别甾体皂甙和三萜皂甙：取带塞试管两支，各盛检品的水溶解1 ml，1支加0.1N盐酸溶液2ml，另一支加0.1N氢氧化钠溶液2ml用力振摇1分钟〔需左右手交替振摇各半分钟〕，观看两管泡沫的多少，假设两管泡沫体积相同或酸管多，示含三萜式皂甙；假设加碱管泡沫多于加酸管示含甾示含甾体皂甙。
三萜皂甙为酸性皂甙在酸性水溶液中形成较稳固的泡沫；甾体皂甙为中性皂甙在碱笥溶液中能形成较稳固的泡沫。
浓硫酸、高氯酸、高氯酸-香草醛、浓硫酸-香草醛等的显色原理要紧是使羧基脱水，增加双键结构，再经双键位移，双分子缩合等反应生成共轭双键系统，又在酸作用下形成阳碳离子盐而显色
3、 糖和苷
〔1〕斐林试剂：+硫酸铜、酒石酸钾钠 —— 砖红色沉淀〔还原糖〕
〔—〕+1%HCl +NaOH 沉淀〔苷元〕 △30min 上清液〔+〕
〔多糖、苷〕
〔2〕Molish反应：+α-萘酚-浓硫酸 →紫红色环
〔3〕银镜反应：+0.1N硝酸银、5N氨水 →银褐色〔还原糖〕 〔4〕薄层层析检查：：吸附剂——硅胶G或纤维素
中药化学成分的预试验检测方法汇总
