乌头类中药有效成分的含量测定及分析论文

乌头类中药有效成分的含量测定及分析论文

乌头类中药有效成分的含量测定及分析 褚晶晶

(辽宁省阜新市药品检验所 阜新 123000)

摘要:目的:了解乌头类中药中新鸟头碱、鸟头碱、次乌头碱、新-t头次碱四种有效成分的含量，为临床提供研究依据。方法:采用高效液相色谱法进行各种有效成分的测定，色谱柱为Agilent Zobax XDB C18(250.0×2.lmm，Sum)，流动相为O.Ol%氨水溶液一乙腈，流速Iml/min，检测波长240nm，采用LC- MSn法进行生物碱成分的初步鉴定，了解各种成分的含量，将4种生物碱进行加热，分析受热稳定曲线变化情况，给家兔灌服附子，测定入血成分。结果:新

鸟头次碱的热稳定性更好，更适合作为药效指标成分，以新鸟头次碱作为乌头类中药有效成分的测定指标，进样量在0.51,10.2ug范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9998)}平均回收率为102 .1%，RSD= 2.2%(n-6)。结论:新乌头次碱作为乌头类中药中的有效成分，具有热稳定性好，可作为入血成分，具有良好的检测价值，可作为乌头类中药含量检测、赝品区分的有效指标。

关键词:乌头类中药 有效成分新鸟头次碱鉴别指标

乌头类中药是临床常用的一类中药材，包括乌头、附子等，此类中药的主要活性成分均为生物碱，同时也属于毒性成分，因此以炮制入药，药物的质量对疗效和安全性有着直接的影响。就此笔者以附子为对象进行了研究，以分析乌头类中药中目前已知的4种有效成分用于治疗和安全性检测的应用价值。

1材料与仪器

采用高效液相色谱法进行有效成分测定，Agilent1200，乙腈

为色谱纯，双蒸水，其他试剂均为分析纯，附子从四川江油购入，经鉴定为真品。

2方法与结果

2.1生物碱含量测定。采用LC- MSn法进行生物碱成分的初步测定，根据离子强度大小进行含量判别，结果显示含量新乌头次碱>新乌头碱>乌头碱>次乌头碱。

2.2人血成分测定。给家兔灌服附子，用LC - MSn法测定人血成分。结果显示新乌头次碱及新乌头碱为人血成分。

2.3受热稳定性。提取新乌头碱、乌头碱、次乌头碱、新乌头次碱4种生物碱成分，在100?下加热，观察峰面积的变化情况，评估4种成分的受热稳定曲线。结果显示新乌头次碱热稳定性最好，选取为进一步测定对象。

2.4新乌头次碱的含量测定。

2.4.1色谱条件。色谱柱:Agilent Zobax XDB C18(250 mm×2.1

mm,5um);检测波长:240 nm;流动相:0.01%氨水溶液(A) -乙腈(B)，梯度洗脱(0-40min85%B一40%B，10 - 55min，40%B，);柱温:25?;流速:Iml/min。

2.4.2溶液制备。?标准品储备液:取2.5 mg新乌头次碱标准品，加入0.01%盐酸一甲醇制备成0.51mg/ml的标准溶液;?供试品溶液:取样品粉末lg，放置于锥形瓶，加Iml的10%氨水溶液，充分浸润后加25ml乙醚，超声提取30min，取上清液，洗涤3次，合并，50?水浴挥干，溶解于0.01%盐酸一甲醇溶液，过滤后待用。

2.4.3线性关系考察。精密吸取标准品溶液0.5、1.O、1.5、2.Oml分别置于10ml量瓶中，加入O.Ol%盐酸一甲醇稀释至刻度，摇匀获得标准溶液，吸取10ul加入液相色谱仪进行测定，以峰面积为横轴(x)，进样量为纵轴(y)，最终获得回归方程为y-304.5x-3.53(r=0.9994)。

2.4.4精密度试验。取对照品溶液10ul进行测定5次，结果显示新乌头次碱的峰面RSD=0.51%。

2.4.5重复性试验。精密称取同一批药材粉末共6份，每份取1.0g，按照上述供试品液制备方法，进行重复测定，结果显示新乌头次碱平均含量RSD=1.5%。

2.4.6稳定性考察。取供试品溶液，室温下放置，分别于0、4、8、12、24h时进行测定，结果显示峰面积RSD=1.41%。

2.4.7加样回收率。取附子样品6份分别加入标准品储备液，按照上述方法制备供试品溶液，在同样的色谱条件下进行分析，结果显示峰面积RSD=1.24%。

2.4.8样品含量测定。分别取3个批次的样品按照上述方法制备供试品溶液，进行重复测定3次，评估新乌头次碱含量，3次结果RSD=1.31%、1.36%、1.40%。

3讨论

本次试验通过化合物的测定，评估了4种乌头碱成分的热稳定性，同时根据是否为人血成分建立了乌头类中药药效成分鉴定的初步标准，最终获得新乌头次碱作为主要研究对象。结果显示新乌头次碱在100?条件下加热180 min后仍能具有较好的峰面积，热稳定性较好，且家兔入血成分检测结果显示新乌头次碱属于有效成分。在进一步的研究中，新乌头次碱具有较好的稳定性，重复试验结果良好。不同批次附子中的新乌头次碱含量相近，重复试验结果显示RSD= 1.31%、1.36%、1.40%。这说明增加新乌头次碱作为乌头类中药质量监控的指标具有较高的应用价值。

综上所述，新乌头次碱作为乌头类中药中的有效成分，具有热稳定性好，可作为人血成分，具有良好的检测价值，可作为乌头类中药含量检测、赝品区分的有效指标。

参考文献