干扰ski基因对视网膜色素上皮细胞增生和周期的影响
郭斌;王莉;刘晓娟;范钦华
【期刊名称】《中华眼外伤职业眼病杂志》 【年(卷),期】2015(037)011
【摘要】目的 观察siRNA干扰c-ski对视网膜色素上皮(RPE)细胞增生和周期的影响.方法 RPE细胞分为3组:空白对照组(转染时加脂质体)、阴性对照组(无关序列非特异性siRNA转染)和ski-siRNA转染组,另设阳性对照转染组(采用β-actin siRNA转染).采用蛋白电泳检测转染24h和48 h时的c-ski和Cyclin D1蛋白表达变化;比色法检测转染1、2、3、4d时细胞的增生速率;流式细胞术检测转染24 h和48 h细胞周期的变化.结果 与空白对照组和阴性对照组相比,siRNA转染hRPE细胞增生在各个时间点均受到明显抑制(P＜0.05);3组间RPE细胞c-ski和Cyclin D1蛋白表达比较,差异有统计学意义(P＜0.05),与空白对照组和阴性对照组相比,c-ski siRNA转染组c-ski、Cyclin D1蛋白表达下降(P＜0.05).各组G0/G1、S和G2/M期RPE细胞比例比较,差异有统计学意义(P＜0.01),c-ski siRNA组G0/G1期细胞比例高于空白对照组和阴性对照组siRNA组(P＜0.05),S期细胞比例低于空白对照组和阴性对照组siRNA组(P＜0.05).结论 c-ski基因干扰可以有效地抑制RPE细胞增生,该分子机制可能是抑制RPE细胞G1期的调节子cyclin D,造成G0/G1期阻滞,不能进入S期.%Objective To investigate the effect of silencing c-ski gene with small interfering RNA (siRNA) on cell proliferation and cell cycle of human retinal pigment epithelial (RPE) cells.Methods The RPE cells were divided into 3 groups : blank control group, negative control group and
干扰ski基因对视网膜色素上皮细胞增生和周期的影响
