新冠核酸检测-江苏硕世试剂
前处理-标本处置室：
穿防护服，标本灭活（56度30分钟）
一区：试剂储存和准备区（正压）：
配制试剂
二区：标本准备区(正压)-全自动核酸提取仪SSNP-3000A（64通
道）
1、
穿防护服，取灭活样本200uL加入到试剂板，
放置在核酸提取仪中，缺口朝外，插入八联磁棒套，关上试剂仓，核酸提取（快提20分钟）。
2、
3、
在准备好的PCR反应管中加提取好的核酸待测样本、阳性对照、空白对照各5uL终体积为25uL/管，盖紧管盖瞬时低速离心。
三区：扩增产物分析区(负压)-罗氏COBAS Z480核酸扩增仪
1、将反应管放入罗氏COBAS Z480核酸扩增仪进行扩增检测。约70分钟。 2、阳性：Ct≤37，曲线呈S型，且有明显指数增长期。
阴性：Ct>40或者未检出。
可疑：当出现任一通道及双通道检测结果37< Ct≤40时，应对样本进行重复检测，如复检试验结果单通道Ct≤37或者两个通道Ct值在37-40范围，曲线呈标准S型且有明显指数增长期。则判断为阳性。否则判为阴性。
3、样本内标CY5通道检测结果应Ct≤37，否则采样复测。当样本结果判读为阳性如内标Ct>37或未检出，结果仍可信。
通道对照组 空白对照 阳性对照 FAM通道为：ORFlab基因 Ct值 VIC通道为：N基因 CY5通道为：内标 UNDET Ct≤30 UNDET Ct≤30 UNDET Ct≤30 试剂配制室及样品处理室宜呈微正压，以防外界含核酸气溶胶的空气进入，造成污染,可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。进风>排风=正压
扩增产物分析室应呈微负压，以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品，可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。排风>进风=负压
如果使用荧光PCR仪，扩增室和产物分析室可以合并。
1、工作人员A在“标本处置室”消毒灭活30分钟，工作人员B于30分钟快结束的时候在1区配试剂。（一般现在60多份标本需要50分钟）。
2、工作人员A脱防护服去2区，在2区重新穿防护服、加样，标本量多的情况B也去2区帮忙加样，快提20分钟。
3、取5微升提取物加入20微升反应体系里面；（这一步根据样本量多少时间不一）。
最后3区扩增70分钟。 50+20+70=140
提取试剂48T/盒，每批快提样本数为46个或48个。
检测试剂50T/盒，罗氏Z480核酸扩增仪为标准96孔，每批最多检测样本90或88个。（标准曲线4孔，阴阳性对照各1孔或2孔）
江苏硕世新冠核酸检测
