葡萄糖测定的标准操作规程
【目的】
体外检测血清中葡萄糖（GLU）的含量。
【职责】
1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。 【标本类型及实验前准备】 1.受检者的准备
病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况。孕妇应在产后或终止哺乳3个月后检验。此外，有无服用影响的药物以及采血的季节都应做相关记录。 2.静脉采血
除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 【仪器设备】
东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机 一、检测原理
本试剂所采用的反应式如下：
葡萄糖?ATP?HK??葡糖糖?6?磷酸?ADP葡萄糖?6?磷酸?NAD?????6?PG?NADH?H?G?6?PDH?
式中：ATP为三磷酸腺苷；ADP为二磷酸腺苷；HK为己糖激酶；G-6-PDH为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；6-PG为6-磷酸葡萄糖酸
上述反应中，NADH的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比，通过在340nm处测定吸光度的变化值，即可测得样本中葡萄糖的浓度。
二、试剂 1.试剂
本科使用上海复星长征医学科学有限公司HDL-C试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：
试剂1（R1）
三磷酸腺苷 0.75mmol/L
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 375U/L NAD
15mmol/L
哌嗪-N,N’-双（2-乙磺酸）缓冲液 50 mmol/L 试剂2（R2）
己糖激酶
60KU/L
哌嗪-N,N’-双（2-乙磺酸）缓冲液 50 mmol/L 2.校准要求
2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清（货号：4490050/4590050）对测定进行校准。 2.2校准间隔
2.2.1试剂批号变更时，使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。
2.2.2室内质量控制出现问题时使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清对测定进行校准并确认问题得到解决后方可对临床病人样本进行测定。 三、操作
按生化分析仪操作要求结合长征试剂说明书输入测定参数，并按校准、质量控制、样本测定的顺序进行常规测定。 四、计算
葡糖糖浓度(mmol/L)?
样本吸光度（?A）?校准液浓度(mmol/L)
校准品吸光度（?A）五、质控程序
1.建议采用朗道水平2(正常范围质控）和 水平3（病理范围质控）两个水平的血清进行室内质控。
2.可接受性判断 质控物的检测值应在给定质控范围，或可以通过参加卫生部室间质评对实验室的运作情况进行系统评估。
3.质控操作 每日进行样本检测之前首先应进行质控操作，以考察系统的在控情况。如果检测结果符合质控要求则进行样本操作；如果不符合质控要求，则应重复质控操作，以排除可能发生的偶然误差；如果仍不符合质控要求，则应考虑质控品的重新准备、试剂的重新校准或更新、仪器的维护等。建议在样本的检测过程中和/或结束后再次进行质控操作，以考察样本的检测全过程的在控情况。 六、参考范围 3.9-6.1mmol/L 七、危急值或警示
对超出可报告范围的结果的处理：取0.1ml样品加0.4ml蒸馏水，再测定，结果乘以5。 危急值：低值<2.2mmol/L 高值>28.9mmol/L 八、临床意义
病理性增高常见于胰岛功能低下,脑震荡,脑溢血等；病理性减低见于呆小症,长期营养不良,酒精中毒等。
生理性高血糖：见于饭后1～2小时；摄入高糖食物后或情绪紧张肾上腺素分泌增加时。病理性高血糖：内分泌腺功能障碍引起高血糖；颅内压增高，颅内压增加刺激血糖中枢使血糖水痘升高；脱水引起高血糖；如呕吐、腹泻和高热等也可使血糖轻度升高麻醉、感染性疾病、毒血症、抽搐、胰腺炎、胰腺癌等情况下也可出现高血糖。生理性低血糖：见于饥饿和剧烈运动。病理性低血糖：对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、肾上腺皮质激素分泌减少；严重肝病患者，由于肝脏储存糖原及糖异生等功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。血糖测定在临床上具有重要的诊断意义。
九、试剂性能概要 1.不精确度
采用NCCLS EP5-A2文件规定的程序，对两个不同水平的复星长征临床化学控制
检验科生化葡萄糖测定的标准操作规程
