《植物组织培养技术》实验指导
实验一 组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌 一、目的要求:
1．通过参观,了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能.
2．通过实际操作,学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。 二、材料用具:
高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿（试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯），以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪，肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。 三、说明：
在进行各类具体的组培实验前，首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的,总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。
植物组织培养是一项十分细致的工作，为了保证植物外植体不受污染，第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒，使它们保持无菌状态，
做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧,因此每个学生必须学好这套基本功。 四、方法和步骤：
首先在老师带领下参观组培室,并听取讲解，然后配制洗液，称取工业用重铬酸钾40克,溶解在500ml在水中,然后徐徐加入450ml粗制浓硫酸(或废硫酸)配好的溶液呈红色,铬酸洗液是一种强氧化剂，去污能力强，但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效，铬酸洗液可反复使用，直到溶液呈青褐色为止.此溶液腐蚀性强，洗涤时需注意。
每人清洗部分玻璃器皿，方法:清水洗净→泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷→清水反复冲洗→蒸馏水淋一遍→烘干备用。
然后清洗部分较脏的玻璃器皿，方法：采用先碱后酸,即用洗衣粉洗刷后冲洗干净→晾干→侵入酪酸洗液,浸泡时间视器皿的肮脏程度而定→清水反复冲洗干净→蒸馏水淋洗一遍→烘干备用。
带有石蜡或胶布的器皿：先将其除去，再用常规洗涤，石蜡用水煮沸数次即可去掉，胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时，再用水冲洗，凉干后浸入洗液,以后的步骤同前。
对器皿和用具进行高压灭菌，即用手提式高压灭菌锅，在1。1个大气压下保持15～20分钟。解剖刀、手术剪、解剖针、镊子等用具 在
接种前还要用百分之七十的酒精棉球擦一下，再用酒精灯的火焰灭菌，冷却后即可应用。
五、作业：试阐述为什么要对器皿和用具进行严格的洗涤和灭菌? 实验二 母液的制备及培养基的配制、灭菌 一、目的要求:
通过掌握培养基对母液制备及常用培养基的配制和灭菌方法，为植物组织培养准备合适的营养条件. 二、材料用具：
高压灭菌锅、冰箱、普通及精密天平、电炉、铝锅、玻璃器皿（烧杯、量微、容量瓶、移液管、试剂瓶、三角瓶、漏斗），化学试剂（CaCl2·2H2O,KNO3,MgSO4·7H2O，
NH4NO3，KH2PO4，Na2—EDTA，FeSO4·7H2O，MgSO4·4H2O，Zn SO4·7H2O，H3BO3,KI，NaMoO4·2H2O,CuSO4·5H2O,CoCl2·6H2O，甘氨酸，盐酸硫胺素,盐酸吡哆醇，烟酸，肌醇，蔗糖，琼脂,若干种生长调节物质及天然复合物，HCL,NaOH,酒精)，以及称量纸、药匙、玻璃棒、精密度纸，瓶盖用纸，线绳或橡皮筋、铅笔、标签纸。 三、说明：
植物组织培养试验【范本模板】
