产品编号: CAT：RY8002
产品概述：本产品由ds cDNA和pGADT7-Rec （Smal-lineared）载体同源重组构建文库质粒，含有多个克隆位点和限制性内切酶，可用于酵母单杂、酵母双杂筛库，可以与诱饵载体共转化酵母菌株筛选相互作用蛋白。 载体信息：
保存条件：-80℃~-70℃保存，运输条件：干冰。
产品质检参数：文库库容量>1*108，重组率>95%，空载率<5%，平均长度0.8-1kb。 案例
实验流程:
文库菌株与诱饵菌株交配融合
(1) 活化AH109诱饵培养物，挑取单克隆于5 mL的SD/-Trp培养基中摇菌，30℃，200 rpm，1-2d；
(2) 将摇培好的AH109诱饵培养物(≥1x109 cfu/mL)800 g离心5 min，再用5 mL 2×YPDA重悬诱饵菌，并和1 mL的Y187文库细胞(≥2x107 cfu/mL)混合在2 L无菌烧瓶中； 注意：烧瓶的大小至少2 L才能在低速旋转时对交配培养物进行充分的通气。 (3) 用1 mL的2×YPDA冲洗文库小瓶中的细胞，冲洗2次；
(4) 加入45 mL 2×YPDA，轻轻旋转，于30 ℃，30-50 rpm恒温摇床上孵育20-24 h； 注意：低速旋转是必要的，以防止细胞沉淀到烧瓶的底部。但是，以> 50 rpm的速度摇动培养物会显著降低交配效率。
(5) 800 g，10 min收集Mating产物，用50 mL ddH2O冲洗烧瓶并重悬沉淀两次，在离心收菌；
(6) 最后将细胞沉淀重悬于6 mL ddH2O中。 从中取20 ul培养物进行梯度稀释后涂SD-TL平板，用于检测文库转化效率。其余涂三缺、四缺平板20块。 注意事项
酵母工作菌液避免反复冻融，使用时请在冰上解冻。 技术支持
南京瑞源生物技术有限公司坐落于南京市栖霞区生命科技园，专注于基因组高通量研究领域，致力于生物高科技研发，目前产品的技术水平已达到省级实验水平，瑞源生物立足于生命科学，为基础研究领域科学工作者提供生物学技术服务，自2019年创立以来，全体员工致力于利用酵母系统研发新药物靶点，专注于生物学研究，长期与全国各大农林/医药院校在大型科研技术研发上紧密合作。
酵母文库工作菌液使用指南
