骨桥蛋白与基质金属蛋白酶9在子宫内膜病变中的表达
张岩1，王雪飞1，徐枫2，那飞1，赵巍1
【摘 要】摘要 目的 检测骨桥蛋白（OPN）和基质金属蛋白酶9（MMP9）在正常子宫内膜、子宫内膜病变及子宫内膜腺癌组织中的表达情况，探讨2者与子宫内膜癌变发生、发展的关系。方法 收集我院妇科经手术病理证实的子宫内膜腺癌标本75例、子宫内膜不典型增生标本22例及同期正常增殖期子宫内膜组织15例，采用免疫组织化学SP染色法检测OPN和MMP9的表达情况。结果 在子宫内膜不典型增生及子宫内膜腺癌组织中，OPN与MMP9的阳性表达率分别为72.73%、80.00%和63.64%、70.67%，均明显高于正常增殖期子宫内膜组织（P<0.05）。OPN、MMP9的阳性表达率与子宫内膜腺癌的组织分级及肌层侵润呈正相关（r=0.287 9，P<0.05）。结论 OPN及MMP9与子宫内膜癌变发生及发展关系密切。 【期刊名称】中国医科大学学报 【年(卷),期】2013(042)001 【总页数】4
【关键词】关键词 骨桥蛋白；基质金属蛋白酶9；子宫内膜病理学；免疫组织化学
骨桥蛋白（osteopontin，OPN）是一种分泌型磷酸化糖蛋白，在细胞的恶性转化及肿瘤细胞的侵袭和转移中起重要作用［1］，国外有研究报道OPN在子宫内膜癌中高表达［2］。基质金属蛋白酶9（matrixmetalloproteinase9，MMP9）能水解基膜和细胞外基质中的Ⅳ型胶原，与肿瘤的演进相关。目前研究认为OPN可能作为上游基因，使肿瘤细胞表达MMP9增高。本研究检测
OPN和MMP9在正常子宫内膜、不典型增生子宫内膜及子宫内膜腺癌组织中的表达情况，探讨OPN和MMP9与子宫内膜癌发生及发展的关系及其在子宫内膜腺癌诊疗及预后判断等方面的潜在价值。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 研究对象：2003年12月至2011年2月于中国医科大学附属第四医院妇科就诊的患者因诊治原因获取子宫内膜标本112例，均经病理学诊断证实。其中正常增殖期子宫内膜组织（normal endometrium，NE）15例，不典型增生子宫内膜组织（atypical hyperplasia，AH）22例，子宫内膜腺癌（endometrial adenocarcinoma，EC）75例。所有患者获取标本前均未接受过放、化疗或激素治疗。子宫内膜腺癌患者根据2000年国际妇产科联盟（FIGO）手术病理分期，Ⅰ～Ⅱ期45例，Ⅲ～Ⅳ期30例；组织学分级，G128例，G221例，G326例。
1.1.2 实验试剂：鼠抗人OPN单克隆抗体及鼠抗人MMP9单克隆抗体、DAB显色液试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。 1.2 方法
1.2.1 实验方法：所有标本均在同一条件下采用免疫组化SP法进行染色。用PBS替代一抗为阴性对照，用已知阳性片为阳性对照。
1.2.2 结果判定：OPN和MMP9染色阳性定位主要在细胞质，染色为棕黄色。采用双盲法：随机计数10个高倍镜视野共计1000个腺上皮及肿瘤细胞的阳性细胞数。评分方法：⑴按细胞显色有无及深浅对染色强度评分：0分为无色，1分为浅黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色；⑵按阳性细胞所占的百分比评分：
0分为阴性，1分为阳性细胞≤10%，2分为阳性细胞11%～50%，3分为阳性细胞51%～75%，4分为阳性细胞≥75%。每例染色积分为两种评分相乘，进行半定量分析，积分≥3为免疫反应阳性。 1.3 统计学分析
采用SPSS11.5统计分析软件，统计学处理采用χ2检验，检验水准取α=0.05。
2 结果
2.1 OPN、MMP9在不同子宫内膜组织中的表达
OPN、MMP9在正常增殖期子宫内膜组织中为阴性或弱阳表达，在不典型增生组织及子宫内膜腺癌组织中表达增加明显（图1、图2）。本研究在正常增殖期子宫内膜、不典型增生子宫内膜、子宫内膜腺癌中，OPN的阳性表达率分别为26.67%、72.73%和80.00%，MMP9的阳性表达率为20.00%、63.64%和70.67%。2者在不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜腺癌中的表达均明显高于正常增殖期子宫内膜组织，差异有统计学意义（P<0.05）。 2.2 OPN、MMP9与子宫内膜腺癌临床病理特征的关系
OPN、MMP9均与子宫内膜腺癌组织分级及肌层浸润程度相关，其中低分化腺癌中表达明显高于高分化腺癌（P<0.05）。OPN的表达与临床分期及淋巴转移相关（P<0.05），MMP9的表达在临床分期及淋巴转移方面差异不显著（P>0.05）。见表1。
2.3 OPN与MMP9子宫内膜腺癌中表达的相关分析
OPN和MMP9在子宫内膜腺癌中均呈高表达，二者的表达呈正相关（r=0.287 9，P<0.05）。
3 讨论
骨桥蛋白与基质金属蛋白酶9在子宫内膜病变中的表达
