与分解代谢有关的生化实验(二)
1、了解各生化实验的原理
2、能配制相应的培养基,选用合适的指示剂 3、能准确判断结果,并进行表示 1、VP试验 2、硫化氢试验 3、尿素酶试验 4、复合生化试验
①动力靛基质尿素酶试验 MIU ②克氏双糖铁培养基试验 KIA
克氏双糖铁培养基试验 KIA
KIA可能出现的四种颜色所表示的意义
讲授为主
实验报告
反复强调微生物实验操作的注意事项
复习:相关理论知识
引入:不同种类的微生物能产生不同的酶类,因此,不同的微生物能够利用的营养物质是不同的。即使是针对相同的营养物质,不同的微生物有不同的利用方法(导致最终产物不同)。
人为的设计一些培养基和检测方法,可以比较方便的了解微生物的生理过程。
实验二 与分解代谢有关的生化试验 5.VP试验
①培养基: 葡萄糖蛋白胨水培养基(葡胨水) ②指示剂:VP试剂(VP甲液和VP乙液) ③原理: ④结果判断和表示方法
培养基颜色变红 —————— +
培养基颜色不变(或变棕色)—————— -
注意:
若滴加甲液和乙液后没有变色,不能马上判断结果为阴性。 乙酰甲基甲醇在碱性条件下被氧化需要一段时间。 再放入培养箱培养2—4h以后,判断结果。
6、硫化氢试验
原理:
含硫氨基酸 H2S + Fe2+ FeS, + Pb2+ PbS 7. 尿素酶试验 尿素培养基配方:
蛋白胨 1g NaCl 5g
葡萄糖 1g 磷酸二氢钾 2g 尿素 终浓度2% 酚红溶液 3ml 蒸馏水 1000ml ①培养基:尿素培养基(pH6.8) ②指示剂:酚红
③原理: 尿素 NH3,pH 指示剂变色,桔黄色 红色 ④结果判断和表示方法: 培养基颜色变红———— + 培养基颜色不变(桔黄) ————— —