基因工程概论
重点知识：遗传工程、基因工程的概念；基因工程理论上的三大发现和技术上的三大发现；基因工程的基本步骤；基因工程的意义。
难点知识：基因工程的概念；基因工程的基本步骤；基因工程的基本原理。
第二章 基因工程的工具酶
重点知识：同位酶；同裂酶；同尾酶；星号活力；DNA操作酶的功能及应用（Bal 31, E. coli外切酶III,S1核酸酶，DNase I,测序酶，DNA连接酶， DTD, Ligase,逆转录酶，碱性磷酸酯酶，甲基化酶）；限制性内切酶的分类、命名原则；电泳后DNA的检测方法；DNA分子量的估算方法；怎样提高平头末端的连接效率；如何实现目的基因与载体连接效率；提高重组率的方法；构建酶切图谱的方法。
难点知识：DNA操作酶的功能及应用；怎样提高平头末端的连接效率；如何实现目的基因与载体连接效率；提高重组率的方法；构建酶切图谱的方法。
第三章 基因克隆的载体
重点知识：载体；克隆载体；表达载体；穿梭载体；质粒；严谨型质粒松弛型质粒；cos位点；λ cI突变体；溶源/溶菌性噬菌体；粘粒（cosmid）； 噬菌粒；2μm质粒；载体的基本要求；质粒的基本特征及其分类；λDNA的特点；M13作为载体的优点；如何测定DNA的浓度和纯度？质粒DNA的提取方法，纯化的原理与方法；噬菌体DNA的分离纯化方法；大肠杆菌质粒pBR322、pUC8、pGEM3Z-DNA的特点；不同载体克隆DNA的片段大小；M13、λDNA作为载体需要进行哪些改造？λ克隆载体的类型；建生物基因组文库需要克隆的数目；酵母克隆载体的类型；YAC载体包括那些结构，来源和构建方法。
1
难点知识：严谨型质粒松弛型质粒；粘粒（cosmid）；噬菌粒；M13、λDNA作为载体需要进行哪些改造？λ克隆载体的类型；建生物基因组文库需要克隆的数目；YAC载体包括那些结构，来源和构建方法
第四章 重组DNA的转化与筛选
重点知识：感受态细胞；插入失活；α-互补；Spi+；转化的方法有哪些？转化效率如何；噬菌体DNA转化大肠杆菌的方法；重组噬菌斑的鉴定方法；重组DNA的鉴定方法。
难点知识：α-互补；噬菌体DNA转化大肠杆菌的方法；重组噬菌斑的鉴定方法；重组DNA的鉴定方法。
第五章 从基因文库中克隆基因
重点知识：基因文库；cDNA文库；RT-PCR；菌落原位杂交；克隆基因的方法有哪些；标记探针的方法；如何从基因文库中克隆目的基因？克隆所使用探针的来源。
难点知识：菌落原位杂交；标记探针的方法；克隆所使用探针的来源。
第六章 克隆基因的分析
重点知识：在小分子上定位基因的方法；在大分子上定位基因的方法；DNA测序的方法及其原理、步骤；确定内元的位置的方法；鉴定DNA分子上的蛋白结合位点的方法；研究基因表达调控中使用的报告基因必须具备的特点，植物基因工程中应用的报告基因的种类；DNA体外突变的方法；DNase I足迹法；Oligonucleotide- directed mutagensis；Chromosome walking ；报告基因；Gel retardation；FISH；Southern blotting；Northern blotting；测序后读取DNA序列的方法。
难点知识：在小分子上定位基因的方法；在大分子上定位基因的方法；DNA测序的方法及其原理、步骤；鉴定DNA分子上的蛋白结合位点的方法；DNA体外突变的方法。
2
第七章 分子标记技术
重点知识：PCR的原理、应用，PCR引物的设计原则；PCR直接测序的方法；克隆PCR产物的方法；PCR产物的检测方法；分子标记的类型；RFLP; AFLP; SSR; 分子标记技术的应用；分子标记存在的问题及解决方法。
难点知识：PCR引物的设计原则；PCR直接测序的方法；分子标记存在的问题及解决方法。
第八章 蛋白质表达系统
重点知识：蛋白表达系统的种类，其适用范围；基因要转录、表达必须具有的信号，基因表达调控的方式？E. coli的表达载体中使用频率较高的几种启动子，分别需要那些物质作为诱导物？微生物基因工程中使用的融合系统有哪些优点？E. coli不能表达所有的人类蛋白，为什么？基因工程中使用频率较高的酵母有哪几种？其优缺点。
难点知识：蛋白表达系统的种类，其适用范围；E. coli不能表达所有的人类蛋白，为什么？昆虫表达系统使用的载体。
第九章 医学基因工程
重点知识：Vaccine；Gene therapy； 重组胰岛素方案；为什么胰岛素可以在大肠杆菌中合成；基因工程中第一个合成的人类蛋白的实施方案；可使用疫苗的种类；生产乙肝疫苗的方法（2种）；牛痘病毒作为活疫苗使用；基因诊断法；鉴定疾病相关基因的意义；基因治疗的方法及其应用；基因治疗的伦理性问题。
难点知识： 重组胰岛素方案；牛痘病毒作为活疫苗使用；鉴定疾病相关基因的方法。
3
第十章 动物基因工程
重点知识：GMO(转基因生物)；动物转基因的效率及影响因素；转基因沉默的原因；动物基因工程的载体；动物基因工程的应用；动物细胞基因转移的方法。
难点知识：转基因沉默的原因；动物细胞基因转移的方法。
第十一章 植物基因工程
重点知识：反义RNA技术；Ti质粒；Cre基因； Ti质粒的组成及其功能；Ti质粒作为载体的限制，及其解决方法；植物表达载体的构建策略；植物基因转移的方法，各自的优缺点；单子叶植物基因转移中的问题及克服方法；植物基因工程的策略；抗虫基因工程（BT）的方案；第一个基因工程植物的产生过程；植物基因工程中选择标记潜在的危险性；基因工程在农作物改良中的应用？杀虫蛋白的类型、应用范围；除草剂基因工程的策略；抗非生物胁迫基因工程的策略。
难点知识：反义RNA技术；植物表达载体的构建策略；植物基因工程中选择标记潜在的危险性；单子叶植物基因转移中的问题及克服方法。
4
基因工程概论
