生物技术制药考试题复习

由天下分享时间：2024/9/11 7:13:28 加入收藏我要投稿点赞

一：选择题）、酶的主要来源是（1C植物细胞与、动/A、生物体中分离纯化 B、化学合成 C、微生物生产 D 组织培养 (A)

2、所谓“第三代生物技术”是指、干细胞技术、单克隆技术A、海洋生物技术 B、细胞融合技术 C D、菌体生长所需能量与菌体有氧代谢所能提供的能量在什么情况下，菌体3(A)

往往会产生代谢副产物乙酸：、无关 A、大于 B、等于C、小于 D）基因能在大肠杆菌中表达，但却不能用大肠杆菌EPO4、促红细胞生长素（）的基因工程菌生产人的促红细胞生长素，这是因为：（E 、人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒性作用A

B、人促红细胞生长素基因在大肠杆菌中极不稳定

C、大肠杆菌内毒素与人的促红细胞生长素特异性结合并使其灭活、人的促红细胞生长素对大肠杆菌蛋白水解酶极为敏感D E、大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化(B)

、目前基因治疗最常用的载体是：5 、痘苗病毒A、腺病毒 B、反转录病毒 C、腺相关病毒 D E、疱疹病毒）6、cDNA第一链合成所需的引物是：（D C C、Poly G D、Poly T 、发夹结构EA A、Poly B、Poly

、为了减轻工程菌的代谢负荷，提高外源基因的表达水平，可以采取的措7(A) 施有： A将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段 B、在宿主细胞快速生长的同时诱导基因表达 C、当宿主细胞快速生长时抑制重组质粒的表达 D、当宿主细胞快速生长时诱导重组质粒的复制 8、基因工程制药在选择基因表达系统时，首先应考虑的是：(A) 、表达产物的功能 B、表达产物的产量 C.表达产物的稳定性 A D.表达产物分离纯化的难易 9、疫苗出产前需进行理化鉴定、效力鉴定和（安全性鉴定）。(C) 10、基因工程药物的化学本质属于：氨基酸类脂类 C.蛋白质和多肽类 D.A.糖类 B. (C) PEG11、用聚二乙醇（）诱导细胞融合时，下列错误的是：促进融合率高 B、PEG的浓度高，的相对分子量大，A、PEG促进融合率高4000 的最佳相对分子量为的相对分子量小，促进融合率高 D、PEGC、PEG 、以大肠杆菌为目的基因的表达体系，下列正确的是：(C) 12 、表达产物为糖基化蛋白质 B、表达产物存在的部位是在菌体内A 、表达产物为天然产物 C、容易培养，产物提纯简单 D (A) 、人类第一个基因工程药物是：13 D、乙型肝炎疫苗 B、重组链激酶C、促红细胞生成素、人胰岛素A 、下列不属于加工改造后的抗体是： (C)

14A、人-鼠嵌合抗体 B、单链抗体 C、鼠源性单克隆抗体 D、单域抗体 15、动物细胞培养的条件中，不正确的是：(D)

37±0.5C最适温度为 B.7.2-7.4 为pH最适A. 100% 最理想的渗透压为290-300mOsm/kg D.氧浓度为C.(D)

、第三代抗体是指：16、多发性骨髓瘤细胞产生的免疫球蛋B淋巴细胞合成和分泌的球蛋白 BA、白、利用基因工程技术制备的基因工程抗C、融合细胞产生的单克隆抗体 D 体(C)

、现代生物技术的标志是：17 测序技术的诞生 B、DNAA、DNA互补双螺旋结构模型的提出 D、人类基因组草图的完成C、第一只克隆羊“多莉”的诞生(B) 18、获得目的基因最常用的方法是：、DNA探针技术技术 C、逆转录法DBA、

化学合成法、PCR 、疫苗组成是由抗原和（佐剂）组成19 、鸟枪法克隆目的基因的战略适用于（A）20 、植物 E、人类、原核细菌 B、酵母菌 C、丝状真菌 DA 法获得目的基因的优点是：（B）21、cDNA C. B.不含内含子操作简便A.成功率高能纠正密码子的偏爱性D.表达产物可以分泌 E. 22、有机相酶反应的优点：

．从低沸点的溶31．有利于疏水性底物的反应；2．可提高酶的热稳定性；．减5剂中易分离纯化产物；4．热力学平衡向产物方向移动如脂合成和肽合成；．酶和产物易于回少由水引起的副反应，如水解反应；6．酶易于实现固定化；7 收；．可避免微生物污染。8 23、抗体发展阶段：抗血清、单克隆抗体、基因工程抗体。、24 、凝胶过滤层析进行分离的依据是：分子大小25 26、质粒载体必备三要素：复制子、选择标记、多克隆位点。、体外培养动物细胞三类型：贴壁依赖性细胞、非贴壁依赖性细胞、兼性27 贴壁细胞。）。、下列关于细胞冻存及复苏过程的描述不正确的是（28B 冻存的细胞提前一天更换全部培养液A. 细胞冻存的原则为快速冻存B. 个细胞为宜～1.5）×106C.每只冻存管中以冻存（1 D.冻存液中含有8％二甲基亚砜 E.复苏时将冻存细胞从液氮中取出迅速投入42℃温水中速溶 IgG水解成两个抗原片段和一个可结晶片段的是：（木瓜蛋白酶）。、29能将 30、单克隆技术抗体是B细胞和（杂交瘤细胞）的结合。(A)

、所谓“第二代基因工程”是指31 、抗体工程 D B、细胞工程 C、酶工程A、蛋白质工程(A)

、酶和细胞固定化最常用、最有效的方法是：32 B、交联法 C、包埋法 A、载体结合法D、选择性热变性法

33、真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式表达，下列错误的是：(D) A、基因操作简便 B、只能作抗原用

C、容易实现高效表达 D、易被细菌酶类水解 (A)

、目前应用最广泛的产酶菌是：34．

A.大肠杆菌 B.枯草杆菌 C.青霉菌 D.链霉菌(A) 35、大肠杆菌的基因表达系统为 DA、pBV220/pET B、YEp/YRp C、pUC/λgt11 、pBR322/λgt10 (A)

干扰素的动物细胞是36、用于生产α-MIRC-5

、A、Namalum Namalwa BVero C、WI-38 、D(A) 、外源基因在动物细胞与大肠杆菌中表达产物的主要区别是37 产量高A.糖基化 B. C.性质稳定 D. 疗效可靠(A)

、基因表达最常用的宿主菌是38 B.A.大肠杆菌枯草芽孢杆菌 C.链霉菌 D.酵母 (B) 39、筛选杂交瘤细胞（脾-瘤融合细胞）选用的培养基是 A、HT B、HAT C、RMP1640 D、BME

、采用凝胶过滤法分离单克隆抗体，最高峰属于40(A) A、IgG B、IgM C、IgA D、IgE

41、改造鼠源性单克隆抗体的首要目的是(C)

、延长半衰A、降低相对分子量 B、增加组织通透性 C、降低免疫源性 D 期(B) 42、鼠源性单克隆抗体改造后得到小分子抗体，常用的是、单链抗体 C、片段抗体Fab D、最小识别单位 A、单域抗体B 43、最具有抗原活性的蛋白是：（丙

种球蛋白）。）44、基因工程的单元操作顺序是（A ．酶切，连接，转化，筛选，验证A B.酶切，转化，连接，筛选，验证 C验证，酶切，连接，筛选，转化．连接，转化，筛选，验证，酶切 D. 酶切，连接，筛选，转化，验证E.

细胞来源于：答案：中国仓鼠卵巢。45、CHO-K1 46、下列五个DNA）片段含有回文结构的是（DGAAACTGCTTTGAC B.GAAACTGGAAACTG

C.GAAACTGGTCAAAG ．AD.GAAACTGCAGTTTC E.GAAACTGCAGAAAG

、47片段连接在一起，其48、T4-DNA连接酶是通过形成磷酸二酯键将两段DNA 底物的关键基团是（D）-P '-P C. 3'-OH和3-OH．2'和5'-P B. 2'-OH和'2A-P

-OH和3'-P E. 5D. 3'-OH和5'' 49、目前工业上生产酶的方法大多数是（微生物发酵）。标记基因，那么与之相匹配的筛选方法是在筛选培50、若某质粒带有lacZ 养基中加入（D）、葡萄糖 C、蔗糖A、半乳糖 B E、异丙基巯基-b-半乳糖吲哚基-b-D-半乳糖苷（X-gal）、D5-溴-4-氯-3-苷（IPTG） 51、对酶活性有影响的物理化学方法是（温度，pH值，酶的浓度，底物浓度，激活剂，抑制剂）

52、分子杂交的化学原理是形成（E）

A.共价键 B.离子键 C.疏水键 D.配位键 E.氢键

二、填空题'(3'→5'),合成的DNA51、人工化学合成DNA新形成的核苷酸的合成方向是），3'末端是（-OH）。末端是（-P、理想载体应具备的条件：（至少有一个复制起点，有多克隆位点，具备2 转化的功能，遗传标记基因，具有较高的载装能力）。聚合酶，引物，时，反映体系应加入（DNA模板，DNA、进行3PCR扩增DNA 的缓冲液）。dNTP 、细胞培养基三大类：（天然培养基，合成培养基，无血清培养基）。4DNA(ocDNA),DNA（cccDNA),开环5、质粒DNA三种构型：（共价闭合环状线状）。DNA(1DNA) 、微生物转化中常用的微生物有：（细菌，真菌，放线菌）。6，生化工程生物技术的基础是)(7、生物技术的核心与关键是（基因工程），(细胞工程)，生物技术获得最终产物的手段是(生物技术的条件是发酵工程)。

、PCR全称是（聚合酶链反应），以（mRNA)为引物，基本反应步骤是（变8性，退火，延伸）。

9、在翻译过程中mRNA与核糖体的结合位点：（SD序列，SD序列与起始密码子AUG之间的距离）。

10、克隆真核基因常用的方法：（逆转录法，化学合成法）。 11、将抗体转变为酶的四种途径：（诱导，拷贝，引入，化学修饰）。 12、酶固定法中包埋法有（网格型和微囊型）两种。 13、噬菌体表达载体有（穿梭，插入，置换）三种。

14、鼠源性单克隆抗体改造后的小分子抗体类型（人-鼠联合抗体，改形抗体，Fab抗体，单链抗体，单域抗体，分子识别单位）。 15、抗体药物的特点：（多样性，定向性，特异性）。 16、质粒载体结构包括：（复制子，选择标记，多克隆位点）。 17、蛋白质药物按分子大小提取方法：（透析，层析，离心，超滤）。 18、核酸类药物分为：（反义核酸，核酶，脱氢核酶，抗基因寡核苷酸，裸DNA疫苗，基因药物）。

19、动物细胞的培养条件：（培养温度，pH值，通氧量，防止污染，基本营养物质，渗透压）。

20、根据动物细胞对生长基质的依赖性可分为：（贴壁依赖性细胞，非贴壁依赖性细胞，兼性贴壁细胞）。 21、答案：感受态细胞。 22、

、简答题三五、问答题

1、简述生物药物与生物技术药物的内涵。答：生物药物是指运用生物学、医学、生物化学等的研究成果，综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法，利用生物体、生物组织、细胞、体液等制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品。生物药物，包括生物技术药物和原生物制药。．生物技术药物：是指采用DNA重组技术或其他创新生物技术生产的治疗药物。细胞因子类药物、激素类药物、酶与辅酶类药物、疫苗、单克隆抗体药物、反义核酸药物、RNA干扰(RNAi)药物、基因治疗药物。

2、简述生物技术药物和生物技术制药的概念。答：生物技术药物是指采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防、治疗和诊断疾病的药物；生物技术制药是指利用基因工程、细胞工程、发酵工程、酶工程、蛋白质工程等生物技术，来研究、开发和生产用于预防、治疗和诊断疾病的药物。

3、比较基因工程疫苗与传统疫苗？答：传统疫苗是用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂或用理化方法将病原微生物杀死制备的生物制剂。传统疫苗受制作工艺的限制，其保存、使用和接种副反应等方面都容易出现一些问题。基因工程疫苗指使用重组DNA技术克隆并表达保护性抗原基因，利用表达的抗原产物，或重组体本身制成的疫苗。

基因工程亚单位疫苗优点： ①纯度高；产量高。②易制备。③安全性好。④这种疫苗稳定性好，免疫期长，便于保存和运输。

4、如何控制基因工程药物的质量？

答：①原材料：主要检查目的基因、表达载体及宿主细胞（如细菌、酵母、人和动物的细胞），防止其产生我们不想要的遗传变异。

②培养过程：无论是发酵还是细胞生产，关键是保证基因的稳定性和不被污染。主要控制生产用的细胞库、有限代次的生产、连续培养过程。

③纯化工艺过程：要求能保证去除微量DNA、糖类、残余宿主蛋白质、纯化过程带入的有害化学物质、致热原，或者将这类杂质减少至允许量。

④最终产品：主要表现在生物学效价测定、蛋白质纯度检查、蛋白质的比活性、蛋白质的性质鉴定几个方面。

⑤杂质检测：蛋白类，由于降解、聚合或者错误折叠而造成的目的蛋白变构体在体内往往会导致抗体的产生；非蛋白类，主要有细菌、病毒、热原质和DNA几种

类型，往往在极低的水平就可产生严重的危害作用。

⑥安全性试验：其中的无菌试验、热原试验、安全性和毒性试验按我国新颁布的《中国生物制品规程》进行。

5、简述单克隆抗体的制备。答：（1）．对动物注射特定的抗原蛋白，使其产生免疫反应；提取合成专一性抗体的单个B淋巴细胞，但这种B淋巴细胞不能在体外生长。（2）．应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞。这种细胞既具有B淋巴细胞合成专一抗体的特性，也有骨髓瘤细胞能在体外培养增殖永存的特性。（3）．对杂交瘤细胞进行细胞培养，用特定的选择培养基选出所需要的细胞群，体外或体内培养，从培养液或动物腹水中提取单克隆抗体。

、简述基因工程操作流程。6．答：1目的基因的获取 2构建表达载体

3将重组DNA导入受体细胞 4重组DNA筛选与鉴定

4目的基因的检测与表达。

7、动物大规模培养有哪些方式？答：（1）悬浮培养法、（2）微载体培养法、（3）多孔载体培养法、（4）微囊化培养法、（5）中空纤维培养法。

8、生产用动物细胞的种类有哪些？各有什么特点？答：（1）原代细胞,特点：不能直接获得，需临时制备，生长不旺盛；

（2）传代细胞系，特点：接触抑制和贴壁依赖性，增值能力有限，无致瘤性；（3）转化细胞系，特点：无限增殖，倍增时间短，较低的营养条件要求，适用于大规模生产；

（4）工程细胞系（包括融合细胞系和基因工程细胞系），特点：稳定遗传

9、获得部分或全部人员化的质量抗体采用何种方法？

10、何为治疗性疫苗？比较治疗性疫苗和预防性疫苗的主要区别。（p129）. 答：治疗性疫苗：指在已感染病原生物或患某些疾病的机体中，通过诱生机体的特异性或非特

异性免疫应答，以达到治疗或防止疾病恶化的天然、人工修饰合成或用基因重组技术表达的产品或生物制品。

区别：a.使用对象不同：治疗性疫苗的使用对象为已病者，而预防性疫苗的使用对象为未病者。

b. 使用目的不同：治疗性疫苗的目的是治疗疾病，预防性疫苗的目的是预防疾病。