欧阳化创编 2024..02.12
组氨酸标签蛋白的纯化 HisTag融合蛋白是目前最常见的表达方式，而且很成熟，它的优点是表达方便而且基本不影响蛋白的活性，无论是表达的蛋白是可溶性的或者包涵体都可以用固定金属离子亲和色谱去（IMAC）纯化。 2．1 IMAC(Immobilized Metalion
affinity
是
chromatography)
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Porath et al.1975年
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用固定IDA作为配基的填料螯合过渡金属铜、镍、钴或锌离子，可以吸附纯化表面带组氨酸、色氨酸或半胱氨酸残基的蛋白，1987年Smith et al. 发现带有几个组氨酸或色氨酸小肽和螯合金属离子的IDAsephadex G25作用力更强，此前在1986年他和他的合作者用Ni2+IDAsephadex G25亲和纯化在氨基端带组氨
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酸和色氨酸的胰岛素原。同年1987年Hochuli et al.发现带有相连组氨酸的多肽和Ni2+NTA填料作用力更强于普通的肽，1988年他第一次用这样的方法纯化了带六个组氨酸标签的多肽，无论是在天然还是变性条件下一次亲和纯化都得到很好效果，此后表达带六个组氨酸标签的蛋白配合IMAC变得非常普遍，相对而
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His-Tag 表达蛋白纯化原理、方法和问题分析之欧阳化创编
