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尘螨肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118的表达及纯化

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尘螨肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118的表

达及纯化

杨小猛;袁谢芳;陈涛;杨平常;刘志刚

【期刊名称】《中国人兽共患病学报》 【年(卷),期】2014(030)009

【摘要】目的 研究尘螨肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118的表达和纯化,为研究其在尘螨疫苗免疫治疗中的作用奠定基础.方法 采用生物信息学方法,根据GenBank中Hypothetical protein CE2118蛋白的基因序列,将其中稀有密码子改造为大肠杆菌常用密码子并进行二级结构优化,合成Hypothetical protein CE2118基因,构建原核表达载体pGEX6P-1-hypothetical protein CE2118并经酶切鉴定,在大肠埃希菌Rosetta (DE3)中用异丙基β D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,重组产物采用GST亲和层析纯化柱纯化.结果 经密码子改造和二级结构优化后Hypothetical protein CE2118基因长度为588bp,其编码蛋白理论分子量为21 kDa.重组表达载体经酶切鉴定与理论推测结果相符,该基因经IPTG诱导在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中得到高效的可溶性表达,纯化后的重组蛋白分子量约为21 kDa,其单一蛋白纯度达95%以上.结论 本研究成功构建了Hypothetical protein CE2118基因的pGEX6P-1原核重组质粒,获得的可溶性重组蛋白为进一步研究肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118在尘螨疫苗免疫治中的作用机理奠定基础. 【总页数】5页(879-883)

【关键词】尘螨;肠道微生物;Hypothetical protein CE2118蛋白 【作者】杨小猛;袁谢芳;陈涛;杨平常;刘志刚

尘螨肠道微生物蛋白Hypothetical protein CE2118的表达及纯化

尘螨肠道微生物蛋白HypotheticalproteinCE2118的表达及纯化杨小猛;袁谢芳;陈涛;杨平常;刘志刚【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2014(030)009【摘要】目的研究尘螨肠道微生物蛋白HypotheticalproteinCE2118的表达和纯化,为研究其在尘螨疫苗
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