黄酒多酚减轻阿霉素心脏毒性的初步研究*
林 辉1， 倪婷娟2▲， 张 杰1， 池菊芳3， 项美香2， 郭航远1, 3△
【摘 要】[摘 要] 目的： 探讨黄酒多酚化合物(YWPC)减轻阿霉素(即多柔比星,DOX)所致心脏毒性的作用及其机制。方法：将40只雄性SD大鼠随机分成4组:对照组、YWPC组、DOX组和DOX+YWPC组。干预4周后，超声心动图检测大鼠心功能；病理学染色观察心脏组织病理学改变；比色法、DHE染色、TUNEL染色和Western blot法检测心肌组织中心肌酶、氧化应激和凋亡水平的改变。结果：与对照组相比，DOX组左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短分数(LVFS)明显下降，而收缩期左室内径(LVIDs)和舒张期左室内径(LVIDd)明显增加；而与DOX组相比，DOX+YWPC组LVEF和LVFS增加，LVIDs和LVIDd下降(P<0.05)。DOX组血清心肌损伤指标乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、天冬氨酸转氨酶(AST)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)较对照组明显增加；而DOX+YWPC组上述指标较DOX组下降(P<0.05)。与对照组比较，YWPC组无明显病理学改变，DOX组出现心肌纤维排列紊乱、细胞核溶解和肌纤维解体，而DOX+YWPC组上述情况明显改善。与对照组比较，DOX组活性氧簇(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽(GSH)水平下降，丙二醛(MDA)水平增加；与DOX组相比，DOX+YWPC组上述指标均得到逆转(P<0.05)。同时，DOX组较对照组心肌细胞凋亡水平、Bax/Bcl-2比和cleaved caspase-3水平增加，而DOX+YWPC组心肌细胞凋亡明显受到抑制(P<0.05)。结论：黄酒多酚可以通过减少氧化应激和抑制心肌细胞凋亡拮抗阿霉素所致的心脏毒性。
【期刊名称】中国病理生理杂志
【年(卷),期】2018(034)012 【总页数】7
【关键词】[关键词] 多柔比星； 心脏毒性； 黄酒多酚化合物； 氧化应激； 细胞凋亡
【文献来源】
https://www.zhangqiaokeyan.com/academic-journal-cn_chinese-journal-
pathophysiology_thesis/0201270423775.html
[修回日期]2018- 05- 07
*[基金项目]浙江省省部共建重点项目(No. WKJ-ZJ-1729)；浙江省公益性技术应用研究实验动物计划(No. 2017C37141)；浙江省医药卫生科技项目(No. 2018KY172)；浙江省医药卫生省部培育计划(No. 2015PYA012) ▲并列第1作者
蒽环类药物，如阿霉素(即多柔比星，doxorubicin，DOX)是各种血液、软组织肿瘤和实体瘤治疗的基石类药物，具有超过50 年的临床使用历史。心脏毒性与阿霉素治疗呈剂量依赖性关系，这也成为临床限制其应用的主要原因[1]。阿霉素诱导心肌毒性的机制复杂，可能涉及氧化应激、脂质过氧化、凋亡和自噬等多条途径[2]。但是，目前尚无一种可以有效减轻阿霉素所致心脏毒性的理想药物。多酚类(polyphenols)物质是一类具有抗肿瘤、抗氧化、清除氧自由基和保护心血管作用的天然化学物。本团队先前一直致力于黄酒及其主要成分黄酒多酚化合物(yellow wine polyphenol compounds，YWPC)对心血管系统的保护作用的研究，发现黄酒多酚具有保护内皮细胞损伤，抑制平滑肌细胞增殖和表型转化，减轻动脉粥样硬化形成的作用[3-6]。但是黄酒多酚是否能减轻阿霉素所致心脏毒性仍未知。因此，本研究拟通过动物实验模拟阿霉素所致心脏
毒性，观察黄酒多酚对阿霉素所致心脏毒性的作用，并从氧化应激和细胞凋亡角度探讨其可能的作用机制。
材 料 和 方 法
1 实验材料
40只健康无特定病原体(specific-pathogen-free, SPF)级 Sprague-Dawley (SD)雄性大鼠购自浙江省医学科学院实验动物中心，许可证号为SYXK(浙) 2016-0022，8周龄左右，体重(250±20) g。阿霉素(Cat. HY-15142A)购自MedChemExpress；黄酒多酚由上海中药制药技术有限公司分离提取，纯度>60%；苏木素-伊红(HE)染色液(Cat. DH0006-2)和Mallory磷钨酸苏木素染色(PTAH自然氧化法)试剂盒(Cat. DC0002-3)购自北京雷根生物技术有限公司；TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Cat. 11684817910)购自瑞士罗氏公司；抗Bax抗体(Cat. ab32503)和抗Bcl-2抗体(Cat. ab32124)购自Abcam；抗cleaved caspase-3抗体(#9664)、抗β-actin抗体(#4970)和HRP标记兔 II 抗(#7074)购自CST；心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I，cTnI)酶联免疫分析试剂盒(Cat. ml003202)购于上海酶联公司；乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase，LDH)活性检测试剂盒(Cat. BC0680)、肌酸激酶(creatine kinase，CK)活性检测试剂盒(Cat. BC1140)和天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase，AST)活性检测试剂盒(Cat. BC1560)购自北京索莱宝科技有限公司；DAPI(Cat. D9542)购自Sigma；超氧化物阴离子荧光探针二氢乙啶(dihydroethidium，DHE； Cat. S0063)、过氧化氢酶(catalase，CAT)检测试剂盒(Cat. S0051)、 总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性检测试剂盒(Cat. S0101)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)检测试剂盒(Cat.
黄酒多酚减轻阿霉素心脏毒性的初步研究
