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(时间：90分钟 满分：100分)
1．(12分)(2018届广西钦州一检)绿色荧光蛋白(GFP)能在蓝光的激发下发出荧光，这样可借助GFP发出的荧光来跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠。请回答问题：
(1)在构建GFP基因表达载体的过程中需要用到的工具酶是________________。 (2)将基因表达载体导入小鼠受精卵中常用的方法是________；受精卵在体外培养时，培养液中除了加水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸等分泌的营养成分外，往往需要特别加入________，同时在含5%________的无菌、恒温培养箱中进行培养。
(3)在胚胎移植前，通过________技术可获得较多的胚胎。在胚胎移植过程中，供体、受体动物选择好后，要用激素进行________处理，使供、受体的生理状态相同。
(4)由于荧光蛋白在自然界中不存在，所以科学家通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等，该工程最终是通过设计____________________________序列来完成的。
解析：(1)在构建GFP基因表达载体的过程中需要用到的工具酶是限制酶和DNA连接酶。 (2)将基因表达载体导入动物受精卵中常用的方法是显微注射法；受精卵在体外培养时，需要向培养液中添加血清、血浆等天然物质，同时在含5%CO2的无菌、恒温培养箱中进行培养，其中CO2的作用是调节细胞培养液的pH。
(3)胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。所以在胚胎移植前，常通过胚胎分割技术获得较多的胚胎；在胚胎移植过程中，供体、受体动物选择好后，要用激素进行同期发情处理，使供、受体的生理状态相同。
(4)由于基因决定蛋白质，因此，要对荧光蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过设计荧光蛋白基因的脱氧核苷酸序列来完成。
答案：(1)限制酶和DNA连接酶 (2)显微注射法 血清 CO2 (3)胚胎分割 同期发情 (4)荧光蛋白基因的脱氧核苷酸
2．(12分)(2018届贵州毕节联考)绞股蓝叶片对TMV(烟草花叶病毒)具有抗感染能力，原因是其细胞中含有抗TMV基因，可以合成一种抗TMV蛋白。烟草是有重要经济价值的双子叶植物，由于TMV的感染会导致大幅度减产。研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草，主要流程如图所示。
(1)理论上，基因组文库含有该生物的________基因。
(2)科学家从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中①过
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(3)④过程将重组Ti质粒导入烟草体细胞的常用方法是________。
(4)由图分析，在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是________基因。 (5)过程⑥可采取________的方法来检测植株是否合成了抗TMV蛋白。在个体水平的鉴定过程中，可通过________的方法来确定植株是否具有抗性。
解析：(1)基因组文库包含了一种生物的全部基因。
(2)图中①过程表示以RNA为模板合成DNA的反(逆)转录过程。启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA；终止子位于基因的尾端，起到终止转录的作用；可见，获得的目的基因必须在两侧添加启动子和终止子。
(3)④过程将重组Ti质粒导入烟草体细胞的常用方法是农杆菌转化法。
(4)由图示信息“在含有卡那霉素的培养基上培养”可知，在过程③构建的重组Ti质粒上应该含有的标记基因是卡那霉素抗性基因。
(5)检测抗TMV基因是否合成了抗TMV蛋白，可采用抗原—抗体杂交技术。在个体水平的鉴定过程中，可通过接种烟草花叶病毒的方法来确定植株是否具有抗性。
答案：(1)全部 (2)反(逆)转录 启动子 终止子
(3)农杆菌转化法 (4)卡那霉素抗性 (5)抗原—抗体杂交 接种烟草花叶病毒 3．(12分)如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。
(1)图中实验材料A可以是________等，研磨前加入的B应该是________。
(2)通过上述所示步骤得到滤液C后，再向滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是________，再过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水的目的是________。
(3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2 mL的4种溶液中，经搅拌后过滤，获得如表所示的4种滤液，含DNA最少的是滤液________。
1 2 3 4 B液中 2 mol/L的NaCl溶液中 0.14 mol/L的NaCl溶液中 冷却的95%的酒精溶液中 搅拌研磨后过滤 搅拌后过滤 搅拌后过滤 搅拌后过滤 滤液E 滤液F 滤液G 滤液H (4)DNA鉴定的原理是_____________________________。 解析：(1)用洋葱、菜花等破碎细胞时，加入一定量的洗涤剂和食盐，洗涤剂可以溶解细胞膜，有利于DNA的释放，食盐主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。(2)在含有DNA的滤液中，加入2 mol/L的NaCl溶液，可以使DNA溶解而杂质析出；在滤液D中加入蒸馏水，当NaCl浓度为0.14 mol/L时，DNA溶解度最小而析出。(3)在滤液E中，只是除去了部分
that deal in data, the oil of the digital age. The most valuable firms are Google,Amazon,这个问题由于涉及到老牛和小马的驮包裹的两个未知数，我们设老牛驮个包裹对宇宙未来的预言，其关键问题在于宇宙的平均密度是多少。作者认为宇宙的未来会有两种可能：如果它比临界值小，宇宙就将永远膨胀，但是如果它比临界值大，宇宙就会坍缩。简言之：或膨胀，或收缩。杂质，则含DNA较多；在滤液F中，除去了较多的蛋白质等，则含DNA最多；在滤液G中，因DNA析出，则含DNA较少；在滤液H中，因DNA不溶于体积分数为95%的冷酒精，则含DNA最少。(4)DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。
答案：(1)洋葱(菜花等) 洗涤剂和食盐 (2)使DNA溶解 使DNA(溶解度下降而沉淀)析出 (3)H (4)在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色
4．(15分)(2018届甘肃会宁联考)黄曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能合成AFB1解毒酶。将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图。请回答：
(1)AFB1属于________致癌因子，使细胞内的原癌基因和抑癌基因发生突变，导致正常细胞癌变。
(2)基因工程常见的运载工具(体)有________________等(至少写两个)。将目的基因导入酵母细胞，最常用的化学方法是________。
(3)酵母细胞导入AFB1解毒酶基因后，采用________技术，检测到AFB1解毒酶基因存在酵母细胞内。实验发现酵母菌中没有检测到合成的AFB1解毒酶，分析原因可能是__________________________________________。
(4)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高酶的活性出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的________________________________________________________。
(5)生态工程需遵循其基本原理，系统整体性原理强调各组分之间要有________，只有这样才能顺利完成能量、物质、信息等的转换和流通，并且实现__________________________________。
解析：(1)黄曲霉毒素B1(AFB1)是黄曲霉产生的，属于化学致癌因子。
(2)基因工程中常用的载体有质粒、λ噬菌体衍生物和动植物病毒。酵母细胞属于微生物，所以将目的基因导入受体细胞用CaCl2处理，使其处于感受态容易接受外源DNA。
(3)要检测目的基因是否导入，可以用DNA分子杂交技术，如果出现杂交带说明该基因已经导入成功。但没有检测到表达产物，是因为酵母细胞中AFB1解毒酶基因没有转录或翻译，即没有表达。
(4)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高酶的活性出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，根据氨基酸和密码子相对应关系和碱基互补配对原则，
2019高考生物一轮复习阶段质量检测11现代生物科技专题
