D. 应用PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变 ［答案］C
［解析］PCR技术是人工合成 DNA的方法，原料是脱氧核苷酸，而不是核糖核苷酸。 20. （2015 ?晋江检测）人们试图利用基因工程的方法， 用乙种生物生产甲种生物的一种 蛋白质。生产流程是：甲生物的蛋白质T mRNA①目的基因T②与质粒 细胞T④获得甲生物的蛋白质。下列说法正确的是
A. B.
酶将目的基因与质粒连接在 一起
C. 如果受体细胞是动物细胞，③过程可用农杆菌转化法 D. ④过程中用的原料不含有 A、U G C ［答案］B
［解析］甲生物的mRNA经①过程合成目的基因为反转录法，
需反转录酶，原料是A、T、
DNA和目的基因, DNA重组宀③导入乙
（ ）
①过程需要的酶是反转录酶，原料是 A、U G C ②要用限制性核酸内切酶切断质粒 DNA再用DNA连接
G C;②为基因表达载体的构建，需用同一种限制性核酸内切酶切断质粒
再用DNA连接酶将目的基因与质粒连接在一起； 如果受体细胞是动物细胞， ③过程可用显微 注射法；④过程为目的基因的表达，需用的原料含有
、非选择题（共40分）
21. （10分）（2015 ?北京检测）I .反转录病毒载体是一种表达型质粒,
结构如图1所示。
A、U G Co
图上的“反转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基 因。（E、F、H分别为限制酶 E、F、H的酶切位点）。
扰生當A
抗件站训
推|1
（1）反转录的原料是 _____________
⑵在构建重组质粒时，目的基因应插入到该质粒的位置是 _____________________ ，此过程需 使用的酶是 __________________________。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，
一般需要用添
加 _____________________ 的培养基进行培养。获取大量重组质粒后，将其再转入到某种哺乳 动物细胞中，可获得大量重组反转录病毒。
n .图2为培育转基因小鼠基本过程的示意图。请回答下列问题:
X —
(3) 如A为重组质粒溶液，将其导入原核期受精卵的方法是 ___________________ ;如A为重
组反转录病毒，还可采取 __________________ 方法。
(4) 小鼠出生后可从其尾巴中提取 __________________ 分子，通过 _______________ 的方法, 可检测出携带目的基因的小鼠。
(5) 若目的基因进入细胞后插入一条染色体
DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法
［答案］1.(1)(四种)脱氧核苷酸
(2) F(反转录病毒序列)限制酶和DNA连接酶(缺一不可)抗生素A
n .(3)显微注射法 感染(侵染)
⑷DNA DNA分子杂交(或核酸分子杂交)(5)转基因小鼠间相互交配(或杂交)
22. (10分)多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟过程中 合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少
PG
PG基因的表
达，可延长果实保质期。 科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转 基因番茄。请据图回答:
|#A
揩师虹咋疑协
pc 用 ZHNA
(1) 提取目的基因:
①若已获取PG的mRNA可通过
法获取PG基因。
②在该基因上游加结构 A可确保基因的反向转录，结构 A上应具有 ____________ 结合位点。 得到的目的基因两侧需人工合成
BarHI黏性末端。已知BanHI的识别序列如下图中甲所示，
请在下图中乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。
i-Rir n|. ■ J J
—CCTAfX - 卜 ------------ 口的并囲--------
甲
乙
1
③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是 ___________ 。 (2) 用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，
可用含有 _______ 的培养基进行筛选，
与此同时，为能更好地达到培养目的， 还需在培养基中加入 _________ 。培养24?48h后取样, 在质量分数为25%勺蔗糖溶液中，观察细胞 ___________ 现象来鉴别细胞壁是否再生。
(3) 由于导入的目的基因能转录反义 RNA且能与 ____________ 互补结合，抑制 PG基因的正 常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄 ____________ ，则可确定转基因番茄成功。
(4) 获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用 使子代保持转基因番茄的优良性状。
［答案］(1)①反转录
②RNA聚合酶如下图所示
GG
GCTA
________ 方法
③使目的基因随质粒的复制而增加 (2)
卡那霉素适量植物激素 是否发生质壁分离
⑶天然PG基因转录的mRNA长
(4)无性繁殖(或植物组织培养)
［解析］(1)①由mRNA获得DNA的过程为反转录。②通过反转录得到的目的基因不含 RNA聚合酶结合位点，为了保证转录的正常进行，需要在基因的上游添加 点。目的基因两端均有该限制酶识别的序列，
RNA聚合酶结合位
③
所以酶切后的目的基因两端都有黏性末端。
可以利用PCR技术对目的基因进行扩增，也可以将重组质粒导入细菌中进行扩增。 用标记基因对基因的导入结果进行检测。植物激素是植物组织培养中不可缺少的组分。 因目的基因转录得到的是反义
(2)可利
(3)
RNA与天然PG基因转录得到的 RNA可以互补配对，从而抑
制正常的翻译过程。(4)由图示可知，目的基因整合到了细胞核染色体上，故获得的转基因 植株相当于杂合子，有性生殖产生的后代不一定带有目的基因， 保持转基因番茄的优良性状。
23. (10分)农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下感染植物，因而在 植物基因工程中得到了广泛的运用。下图为农杆菌转化法的示意图，试回答下列问题:
可以利用无性繁殖技术确保 子代
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(1) 一般情况下农杆菌不能感染的植物是
，利用农杆菌自然条件下感染植物的
特点，能实现 _________ 。具体原理是在农杆菌的 Ti质粒上存在T- DNA片段，它具有可转移
至受体细胞并整合到受体细胞 ___________ 上的特点，因此只要将携带外源基因的 DNA片段插入 到 ________ (部位)即可。
(2) 根据T- DNA这一转移特点，推测该DNA片段上可能含有控制 _________ (酶)合成的基 因。
(3) 图中c过程中，能促进农杆菌向植物细胞转移的物质是 ____________ 类化合物。 (4) 要获取能表现出新性状的植株， d过程涉及的生物学技术是 __________ 。
(5) 植物基因工程中除了农杆菌转化法之外， 还可采取 _________________________ 方法。 (至少写出两种)
［答案］(1)单子叶植物 部)
(2) DNA连接酶、限制酶 (3) 酚
(4) 植物组织培养
(5) 基因枪法、花粉管通道法
［解析］(1) 一般农杆菌不能感染的植物是单子叶植物， 利用其感染性，可实现目的基因导入到植物细胞。
可感染双子叶植物和裸子植物。
目的基因导入到植物细胞
染色体的DNA T- DNA片段(内
真正可转移至受体细胞并整合到受体细胞
染色体的DNA上的是农杆菌T- DNA片段，因此目的基因必须插入到该部位才能成功。
(2)
根据T- DNA这一转移特点，可以推测该 DNA片段能控制合成 DNA连接酶、限制酶，以实现 与双子叶植物细胞染色体 DNA的整合。(3)植物细胞受伤后可产生酚类物质，促进农杆菌向 植物细胞转移。(4)d过程涉及的生物学技术是植物组织培养，通过脱分化、再分化，最终 形成植物体。(5)植物基因工程中除了农杆菌转化法之外，
还有基因枪法和花粉管通道法等。
24. (10分)将动物致病菌的抗原基因导入马铃薯制成植物疫苗，饲喂转基因马铃薯可 使动物获得免疫力。以下是与植物疫苗制备过程相关的图和表。
2019人教版高中生物选修3专题1《基因工程》word综合检测
