1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导嗜铬细胞瘤细胞自噬应激并导
致α-突触核蛋白的自噬性清除障碍
石际俊;蔡增林;张萍;杨亚萍;王芬;毛成洁;孙雪;刘春风
【期刊名称】《中华神经科杂志》 【年(卷),期】2009(042)009
【摘要】目的 探讨1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)所诱导的自噬应激在嗜铬细胞瘤(PC12)细胞损伤中的作用以及MPP+导致α-突触核蛋白自噬性清除障碍及其异常聚集的可能机制.方法 在MPP+处理细胞24 h后,采用四甲基偶氮盐法检测细胞活力,Western blot检测α-突触核蛋白及微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)在蛋白水平表达的变化,并用MDC染色和免疫荧光标记观察自噬水平的变化及α-突触核蛋白、LC3-Ⅱ和溶酶体相关膜蛋白-1(LAMP-1)在细胞内的共定位情况.结果 MPP+处理后细胞的活力明显下降;与未处理组相比(PC12组
:0.20±0.08;A30P
组
和
:0.76±0.09),PC12+MPP+
A30P+MPP+
组
组(1.71
(0.66±0.07,t=5.7271,P=0.0023)
4±0.40,t=8.6100,P=0.0005)α-突触核蛋白表达增加;LC3-Ⅱ蛋白的表达水平及自噬泡的平均数目均增高.另外,MPP+处理后,α-突触核蛋白和LC3-Ⅱ的荧光信号及其共定位增加,尽管LAMP-1标记的溶酶体荧光信号增加,但与LC3-Ⅱ标记的自噬体共定位程度却减小.结论 MPP+导致自噬体与溶酶体的融合出现障碍,引起α-突触核蛋白的自噬性清除障碍与自噬应激的出现,最终导致细胞的损伤甚至死亡.%Objective To investigate the role of autophagie stress induced by 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP+) in pheochromocytoma (PC12) cell injury,and the mechanism of autophagic clearance impairment and
1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导嗜铬细胞瘤细胞自噬应激并导致α-突触核
