金黄色葡萄球菌β-溶血素的原核表达及其溶血活性检测

金黄色葡萄球菌β-溶血素的原核表达及其溶血活性检测

李冬野;崔玉东;侯喜林;朱战波;朴范泽

【期刊名称】《中国人兽共患病学报》 【年(卷),期】2007(023)002

【摘要】目的 为进一步研究金黄色葡萄球菌β-溶血素的致病性及免疫保护作用,对金黄色葡萄球菌β-溶血素进行了表达.方法 应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从金黄色葡萄球菌中扩增出β-溶血素基因,将该基因克隆到原核表达载体PET-32a中,获得重组质粒PET-32a-β,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达.对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot检测分析,并对纯化后表达产物进行平板溶血试验,检测其溶血活性.结果 PCR扩增的β-溶血素基因片段全长为982bp;表达的β-溶血素重组蛋白大小为57kD;纯化的重组蛋白可使绵羊红细胞发生明显溶血.结论 结果表明所克隆的β-溶血素基因在大肠杆菌中得到了良好的表达,并保持良好的溶血活性. 【总页数】4页(136-139)

【关键词】金黄色葡萄球菌;β-溶血素(hlb)基因;原核表达;western blot 【作者】李冬野;崔玉东;侯喜林;朱战波;朴范泽

【作者单位】黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学,大庆,163319 【正文语种】中文 【中图分类】R3 【相关文献】