江西***药业股份有限公司GMP文件
检验操作规程
题目：小茴香原药材检验操作规程 编号：TS-GC-YL-20120-02 制定人： 制定日期2024 年 月 日 版本：2 页数：1/3 审核人： 审核日期2024 年 月 日 颁发部门：质 量 部 批准人： 批准日期2024年 月 日 生效日期2024 年 月 日 目的：规范小茴香原药材检验操作 范围：小茴香原药材检验 分发部门： 质量部、 化验室、生产部 标 题 正 文 1 标准依据：《中国药典》2024年版一部及四部 2 【性状】 2.1 仪器：直尺。 2.2 方法：取本品,置日光下观察,并用直尺测量:本品为双悬果，呈圆柱形， 有的稍弯曲，长4～8mm，直径1.5～2.5mm。表面黄绿色或淡黄色，两端略尖，顶端残留有黄棕色突起的柱基，基部有时有细小的果梗。分果呈长 椭圆形，背面有纵棱5条，接合面平坦而较宽。横切面略呈五边形，背面 的四边约等长。有特异香气，味微甜、辛。 【鉴别】 3 （1）显微鉴别 3.1 仪器与试剂：生物显微镜、酒精灯，水合氯醛、稀甘油等。 3.1.1 方法：取本品适量，用水合氯醛装片，置显微镜下观察：（1）本品分 3.1.2 果横切面：外果皮为1列扁平细胞，外被角质层。中果皮纵棱处有维管束， 其周围有多数木化网纹细胞；背面纵棱间各有大的椭圆形棕色油管1个， 接合面有油管2个，共6个。内果皮为1列扁平薄壁细胞，细胞长短不一。 种皮细胞扁长，含棕色物。胚乳细胞多角形，含多数糊粉粒，每个糊粉粒 中含有细小草酸钙簇晶。 （2）薄层鉴别 3.2 3.2.1 仪器与试剂：分析天平、硅胶G薄层板、层析缸、乙酸乙酯、超声仪、石油醚（60～90℃）、三氯甲烷、茴香醛对照品、乙醇等。 方法：（2）取本品粉末2g，加乙醚20ml，超声处理10分钟，滤过， 3.2.2 滤液挥干，残渣加三氯甲烷1ml使溶解，作为供试品溶液。另取茴香醛对 照品，加乙醇制成每1ml含1μl的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法 （通则0502）试验，吸取供试品溶液5μl、对照品溶液1μl，分别点于同一 硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（17:2.5）为展开剂， 展至8cm，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液。供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的位置上，显相同的橙红色斑点。 【检查】 4 杂质：不得过4%（通则2301）。 4.1 4.1．1 仪器：分析天平、药筛。 4.1.2 方法：取本品适量,挑拣杂质、药屑合并称重杂质量。 4.1.3 计算公式: M1 杂质量= ×100% 式中: M0
第 1 页 共 3 页
江西***药业股份有限公司GMP文件
4.2 4.2.1 4.2.2 4.2.3 4.3 4.3.1 4.3.2 4.3.3 5 5.1
M0-------供试品重(g) M1-------杂质重(g) 总灰分 不得过10.0％（通则2302）。 仪器：粉碎机、药筛、分析天平、坩埚、箱式电阻炉等。 方法：取供试品2～3g，过二号筛混合均匀后，置炽灼至恒重的坩埚中称定重量，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量（%）。 计算公式： W1-W0 总灰分% = ×100% W样 式中： W0 ----------- 坩埚重量(g)。 W1----------- 坩埚与灰分的重量(g)。 W样----------- 样品的重量(g)。 二氧化硫残留量：照二氧化硫残留量测定法（通则 2331)测定，不得过150mg/kg 仪器与试剂：两颈圆底烧瓶、电热套、竖式回流冷凝管、磁力搅拌器、分析天平、甲基红乙醇溶液指示剂、氢氧化钠滴定液滴、盐酸溶液（6mol/L)等。 方法：测定法取药材或饮片细粉约10g(如二氧化硫残留量较髙，超过1000mg/kg，可适当减少取样量，但应不少于5g),精密称定，置两颈圆底烧瓶中，加水300?400ml。打开回流冷凝管开关给水，将冷凝管的上端二氧化硫气体导出口处连接一橡胶导气管置于100ml锥形瓶底部。锥形瓶内加入3%过氧化氢溶液50ml作为吸收液（橡胶导气管的末端应在吸收液液面以下）。使用前，在吸收液中加人3滴甲基红乙醇溶液指示剂（2.5mg/ml),并用0.Olmol/L氢氧化钠滴定液滴定至黄色（即终点；如果超过终点，则应舍弃该吸收溶液）。开通氮气，使用流量计调节气体流量至约0.2L/min；打开分液漏斗的活塞，使盐酸溶液（6mol/L)10ml流入蒸馏瓶，立即加热两颈烧瓶内的溶液至沸，并保持微沸；烧瓶内的水沸腾1.5小时后，停止加热。吸收液放冷后，置于磁力搅拌器上不断搅拌，用氢氧化钠滴定（O.Olmol/L)滴定，至黄色持续时间20秒不褪，并将滴定的结果用空白实验校正。 计算公式： 6 （V供-V空）×C×0.032×10 二氧化硫残留量（mg/kg） = W供 式中： V供为供试品溶液消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； V空 为空白消耗氢氧化钠滴定液的体积，ml； C 为氢氧化钠滴定液的浓度，mol/L； W供为供试品的重量，g。 0.032为lml氢氧化钠滴定液（lmol/L)相当的二氧化硫的质量，g。 【含量测定】 挥发油 照挥发油测定法（通则2204）测定。本品含挥发油不得少于 第 2 页 共 3 页
江西***药业股份有限公司GMP文件
5.1.1 5.1.2 5.1.3 5.2 5.2.1 5.2.2 5.2.3 5.2.4 6.5 1.5%（ml/g）。 仪器与试剂：分析天平、挥发油提取装置、电热套、回流装置、等。 方法：取供试品适量（相当于含挥发油0.5～1.0ml），称定重量（准确至0.O1g），置烧瓶中，加水300～500ml（或适量）与玻璃珠数粒，振摇混合后，连接挥发油测定器与回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶时为止。置电热套中或用其他适宜方法缓缓加热至沸，并保持微沸约5小时，至测定器中油量不再增加，停止加热，放置片刻，开启测定器下端的活塞，将水缓缓放出，至油层上端到达刻度0线上面5mm处为止。放置1小时以上，再开启活塞使油层下降至其上端恰与刻度0线平齐，读取挥发油量，并计算供试品中挥发油的含量（％）。 计算公式： V 含量% = ×100% M样 式中： V --------------- 体积（ml） M样 -------------取样量（g） 反式茴香脑 照气相色谱法（通则0521）测定。本品含反式茴香脑（C10H12O）不得少于1.4%。 仪器与试剂：气相色谱仪、分析天平、超声波清洗仪、反式茴香脑对照品、乙酸乙酯等。 色谱条件与系统适用性试验 聚乙二醇毛细管柱（柱长为30m，内径为0.32mm，膜厚度为0.25μm）；柱温为145℃。理论板数按反式茴香脑峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备 取反式茴香脑对照品适量，精密称定，加乙酸乙酯制成每1ml含0.4mg的溶液，即得。 供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）约0.5g，精密称定，精密加入乙酸乙酯25ml，称定重量，超声处理（功率300W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用乙酸乙酯补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl，注入气相色谱仪，测定，即得。 本品含反式茴香脑（C10H12O）不得少于1.4%。 计算公式： A样 × C对 ×f 含量% = ×100% m ×（1－水分）×A对 式中： A样 ------------------------- 样品的面积。 A对 ------------------------ - 对照品的面积。 C对 ------------------------- 对照品的浓度(mg/ml)。 m ------------------------- 样品的重量（g）。 f ------------------------- 稀释体积。 第 3 页 共 3 页
YL-20120小茴香原料检验操作规程
