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分子生物学试题整理

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直接用于某种工业化生产的一种技术体系。

7.植物组织培养概念(concept)狭义概念:指对植物体组织或由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养直至生成完整植株。广义概念:无菌操作分离植物体一部分(即外植体)接种到培养基,在人工条件下培养直至生成完整植株。

8.愈伤组织〔callus〕:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在植物体切面上产生。 9.外植体〔explant〕:从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。

10.细胞全能性(totipotency)理论,植物每一个具有完整细胞核的体细胞,都含有植物体的全部遗传信息,在适当条件下,具有发育成完整植株的潜在能力。 11.分化〔differentiation〕:细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变,从而在个体发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。 12.脱分化〔dedifferentiation〕:已分化好的细胞在人工诱导条件下,恢复分生能力,回复到分生组织状态的过程。 13.再分化〔redifferentiation〕:脱分化后具有分生能力的细胞再经过与原来相同的分化过程,重新形成各类组织和器官的过程。

14.原生质体(protoplast):去除全部细胞壁的细胞

15.亚原生质体(subprotoplast):只含有部分原生质的原生质体(有核或无核)

16.微原生质体(miniprotoplast):经细胞松弛素B处理得到的仅含少量胞质及核或染色体的小原生质体

17.原生质球(球状体,spheroplast):残存少量细胞壁的原生质体

18.胚状体:从体细胞或与生殖细胞有关的细胞发生的胚状结构,均称为“胚状体”。 19体细胞胚胎发生:从植物体细胞获得胚状体的过程.

20.转基因植物是指利用基因工程技术,在离体条件下,对不同生物的DNA进行加工,并按照人们的意愿和适当的载体重新组合,再将重载体转入受体中,并使其在体内表达的植物。

21.重组DNA技术(DNA recombination technique):是用酶学的方法将不同来源的DNA在体外切割,连接组成一个杂合的DNA分子的技术。

22限制性内切酶(restriction endonuclease,restrction enzymes)是一类专门切割DNA的酶,它们能特异结合一段被称为限制酶识别顺序的特殊DNA序列。并切割dsDNA。所谓限制(restriction)=切割(clearage)=水解(hydrolysis)该部位的核苷键(磷酸二酯键)

23.载体:要把一个有用的基因(目的基因——研究或应用基因)通过基因工程手段送到生物细胞(受体细胞),需要运载工具(交通工具)携带外源基因进入受体细胞,这种运载工具就叫做载体(vector)。

24PCR:又称多聚酶链式反应,是一种体外DNA 扩增技术,是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的酶促合反应,将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物延伸”三步反应的多次循环,使DNA片段在数量上呈指数增加,从而在短时间内获得我们所需的大量的特定基因片段。

25菌根:土壤中某些真菌与植物根的共生体。 26:分子标记:广义的:(molecular marker)是指可遗传的并可检测的DNA序列或蛋白质。狭义的:只是指DNA标记,而这个界定现在被广泛采纳:能反映生物个体或种群间基因组中某种差异特征的DNA片段,它直接反映基因组DNA间的差异。

简答题:1. 影响木本植物器官发生的主要因子

答:(1)基因型与外植体(2) 培养基与激素A:生长素类 在组织培养中,生长素主要被用于诱导愈伤组织形成,诱导根的分化和促进细胞分裂、伸长生长。在促进生长方面,根对生长素最敏感。 在极低的浓度下,(10-5~10-8mg/L)就可促进生长。生长素与细胞分裂素的比例决定着发育的细胞类型,决定着愈伤组织再分化, 是长根还是长芽。B 细胞分裂素类 ,这类激素是腺嘌呤的衍生物

(3) 其他因素:光照、温度等培养条件对诱导木本植物器官发生再生植株起着重要调控作用。

2. 胚状体与器官发生型的区别

1、胚状体的识别:A两极分化,有根和茎尖。有分化中心,可以镜检确定;B维管束不与愈伤组织相连,是独立的;C具有典型的胚胎发生形态:圆形,心形,鱼雷形, 子叶;D胚状体苗。有子叶和芽鞘,呈颗粒状。

2、器官发生型:A没有两极分化B维管束与愈伤组织相连C没有典型的胚胎发生过程D没有子叶E有根发生 3.转基因植物的步骤

A目的基因的分离b.载体构建c.导入细菌并利用细菌繁殖扩增重组DNAd.对植物组织或细胞进行转化e.植株再生f.转基因植株的鉴定h.转基因植株的种植 7.与其它遗传标记相比,分子标记的优点?

(1)直接以DNA的形式表现,在生物体的各个组织、各个发育阶段均可检测到,不受季节、环境限制,不存在表达与否等问题(2)数量极多,遍布整个基因组,可检测座位几乎无限(3)多态性高,自然界存在许多等位变异,无须人为创造(4)表现为中性,不影响目标性状的表达

(5)许多标记表现为共显性的特点,能区别纯合体和杂合体。 8.植物基因工程的优势(相对于传统育种的缺点)

(1)传统育种的缺点:a:杂交性状难选择,b:远缘亲本难杂交,c:杂交过程耗时,d:不同物种不能杂交

(2)植物基因工程优势A:植物细胞的全能性:几乎任何部位的单细胞都可以再生出完整的植株。叶片、茎尖分生组织、种子、幼胚、胚性悬浮细胞、胚性愈伤组织。B:植物容易大面积栽培:如大麦、水稻、甘蔗、玉米、向日葵等。C:能接受任何基因:可以把人的基因、植物的基因、动物的基因,任何一个基因都可以组合到植物里去。D:快速育种:拿一个抗病基因转进去,短时间内就得到一个抗病品种。转基因技术能对农作物的质量、数量进行精确的改良和提高,大大降低了生产成本,缓解了环境不断恶化的情况。

4.生物技术有哪些方面的风险?你如何评估这些风险?

A:基因污染:基因工程、细胞融合等技术使物种间进行任意基因转移成为可能,完全打破了物种间的屏障,这就有可能造成无法预料的生态后果。 如,污染传统作物而改变其消费性质。 污染自然界的基因库。 影响自然界的生态平衡等。

B:转基因食品的安全性: 近几年来,对转基因食品的安全性争论非常热烈。关于转基因食品的安全性目前尚无定论,科学家认为,转基因食品可能带来的风险有两个:一是基因被破坏或其不稳定性将会带来新的毒素;二是外来基因产生的新的蛋白质可能会带来过敏性或毒性。因此,用转基因生物生产的转基因食品和药品要进入市场,必须进行消费安全评估。我国也十分重视对转基因生物和食品的管理,卫生部于2002年4月8日发布了《转基因食品卫生管理办法》,并于当年的7月1日起施行。

C:基因治疗的不确定性:首先,目前发现的有治疗价值的基因还不多,而多基因控制的遗

传病机理目前还不是非常清楚。 其次,治疗中为了使基因有效地进入细胞内,基因常与腺病毒或逆转录病毒整合在一起,但病毒对机体的潜在风险还没有得到很好的解决。 目前的技术还不能保证将基因引入生殖细胞对后代不造成伤害并且有效。 D:异种移植的危险性: 异种移植虽然能解决器官移植中的器官来源不足的问题,但从目前的技术水平来看,异种移植存在着相当大的风险,暂时还无法作为治疗手段展开。 E:生物武器的恐慌: 2001年在美国发现的多起炭疽热病例为全世界敲响了警钟:如果对生物技术的发展再不加以必要的限制,它很可能会成为未来恐怖分子施用的主要恐怖手段。1972年,一些国家发起缔结了《禁止生物武器公约》,我国于1994年也加入了这一公约。

总之,生物技术的发展是一把双刃剑,如果没有一个全世界认可并执行的国际准则,生物技术的发展将会遇到阻碍并产生偏差,甚至会威胁到整个人类和地球的生存和安全。2000年1月29日在加拿大蒙特利尔通过的生物安全议定书,建立了以信息共享和科学决策为基础的全球框架,协助政府对生物技术的益处与风险加以管理。中国是签署该议定书的国家之一。 5.转基因植物的风险

A转基因作物本身成为杂草;B转基因作物使其亲缘野生种成为杂草或超级杂草;C转基因作物可能产生新的病毒或疾病;d.转基因作物对非目标生物的危险;e转基因作物作为外来种对新生境的入侵,使生物多样性受到威胁;f转基因作物对生态系统及生态过程的影响;g其它一些不可预计的风险。 6.组织培养过程

一、培养材料的采集:组织培养所用的材料非常广泛,可采取根、茎、叶、花、芽和种子的子叶,有时也利用花粉粒和花药,其中根尖不易灭菌,一般很少采用。 对于木本花卉来说,阔叶树可在一、二年生的枝条上采集,针叶树种多采种子内的子叶或胚轴,草本植物多采集茎尖。 二、培养材料的消毒

(一)先将材料用流水冲洗干净,最后一遍用蒸馏水冲洗,再用无菌纱布或吸水纸将材料上的水分吸干,并用消毒刀片切成小块。

(二)在无菌坏境中将材料放入70%洒精中浸泡30-60秒。

(三)再将材料移入漂白粉的饱和液或0.01%升汞水中消毒10分钟。 (四)取出后用无菌水冲洗三、四次。

三、制备外植体:将已消毒的材料,用无菌刀、剪、镊等,在无菌的环境下,剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等,叶片则不需剥皮。然后切成0.2-0.5厘米厚的小片,这就是外植体。在操作中严禁用手触动材料。

四、接种和培养 (一)接种: 在无菌坏境下,将切好的外植体立即接在培养基上,每瓶接种4-10个。(二)封口:接种后,瓶、管用无菌药棉或盖封口,培养皿用无菌胶带封口。(三)温度:培养基大多应保持在25℃左右,但要因花卉种类及材料部位的不同而区别对待。

(四)增殖:外植体的增殖是组培的关键阶段,在新梢等形成后为了扩大繁殖系数,需要继代培养。把材料分株或切段转入增殖培养基中,增殖培养基一般在分化培养基上加以改良,以利于增殖率的提高。增殖1个月左右后,可视情况进行再增殖。

(五)根的诱导:继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根,必须转到生根培养基上进行生根培养。1个月后即可获得键壮根系。

五、组培苗的练苗移栽:试管苗从无菌到光、温、湿稳定的环境进入自然环境,必须进行炼苗。一般移植前,先将培养容器打开,于室内自然光照下放3天,然后取出小苗,

用自来水把根系上的营养基冲洗干净,再栽入已准备好的基质中,基质使用前最好消毒。移栽前要适当遮荫,加强水分管理,保持较高的空气湿度(相对湿度98%左右),但基质不宜过湿,以防烂苗。

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直接用于某种工业化生产的一种技术体系。7.植物组织培养概念(concept)狭义概念:指对植物体组织或由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养直至生成完整植株。广义概念:无菌操作分离植物体一部分(即外植体)接种到培养基,在人工条件下培养直至生成完整植株。8.愈伤组织〔callus〕:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在植物体切面上产生。9.外
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