选修3《现代生物科技专题》中的流程图
1.基因工程的基本操作流程图 生物材料 DNA mRNA 蛋白质 氨基酸排列顺序 PCR cDNA 一定大小范围DNA mRNA碱基排列顺序 DNA 基因组文库 cDNA文库 获取目的基因 酶:限制酶、DNA连接酶 构建表达载体 质粒、λ噬菌体 运载体: 的衍生物、动植物病毒 方法: 植物细胞:农杆菌转化法、花粉管 导入受体细胞 通道法、基因枪法 动物细胞:显微注射技术 微生物细胞:Ca2+处理,增大细胞 壁的通透性,得到感受态细胞。 得到转基因生物 目的基因检测与鉴定 目的基因是否整合 mRNA 蛋白质 个体 到受体的染色体上 DNA分子杂交 分子杂交 抗原-抗体杂交 观察/检测 是否出现杂交带 目标性状
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2. PCR技术的原理示意图 模板DNA 原理:DNA双链复制 变性:加热至90~95℃ 解旋成单链DNA 复性:冷却至55~60℃ 变性:加热至90~95℃ Taq酶从引物起始进引物结合到互补DNA链 双链DNA 行互补链的合成 延伸:加热 至70~75℃ 需要热稳定DNA聚合酶 和4种游离的脱氧核苷酸
3.蛋白质工程流程图 分子
DAN合成 设计 预期功能 氨基酸序列 蛋白质 基因 mRNA 多肽链 三维结构 生物功能 DNA 转录 翻译 折叠
4.植物组织培养技术的操作流程 准备培养基 培养基包括: 琼脂、无机营 养物、有机营 养物、激素(生 长素和细胞分 裂素)
原理:植物细胞的全能性
外植体(离体的植物组织、器官、细胞)消毒 接种 培养基 脱分化(避光:有利于脱分化) 愈伤组织 薄壁细胞特点:排列疏松,高度液泡化。 再分化(光照:有利于叶片内叶绿素的合成)
胚状体或丛芽 试管苗 正常植株 2
5.植物体细胞杂交技术操作流程图 原理:细胞膜的流动性;植物细胞的全能性
甲植物体细胞 乙植物体细胞
酶解法去细胞壁 所需的酶:纤维素酶、果胶酶
甲原生质体 乙原生质体
诱导融合 诱导方法:物理法(离心、振动、 融合的原生质体 电激)化学法(聚乙二醇)
再生出细胞壁
高尔基体活跃 杂种细胞 (杂种细胞产生标志)
筛选 脱分化
愈伤组织
再分化
胚状体 多倍体,同时具有甲、乙的性状。 杂种植株 植物体细胞杂交技术完成标志
6.动物细胞培养过程示意图 原理:细胞增殖
动物组织块
剪碎组织
胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
单个细胞
加入细胞培养液
细胞悬液
培养条件:无菌无毒环境
一定的营养(特别加入血清)
原代培养 适宜的温度和pH
含95%空气加5%CO2的气体 细胞贴壁,接触抑制
环境(CO2主要作用是维持培养液的 胰蛋白酶处理,分瓶
传代培养 pH)
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9.单克隆抗体制备过程示意图
特定抗原
反复注射
小鼠
提取
(效应)B淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞
体外培养 诱导方法:电激、诱导融合 聚乙二醇、灭活的 病毒 多种融合细胞
筛选(选出杂交瘤细胞)
特点:既能迅速大量繁殖, 多种杂交细胞 又能产生专一的抗体
克隆化培养,多次检验,筛选得到 专一抗体检验阳性的杂交瘤细胞 能产生特定抗体 的杂交瘤细胞
小鼠体内培养杂交瘤细胞 体外培养杂交瘤细胞
提纯、制备 提纯、制备
单克隆抗体
特点:灵敏度高,特异性强,可大量制备
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7.动物体细胞核移植过程流程图(一):生殖性克隆
高产奶牛 牛卵巢 采集 采集
卵母细胞
体细胞 体外培养
MⅡ期卵母细胞 体外培养 去核
供体细胞 去核卵母细胞
将供体细胞注入去核卵母细胞,
电刺激使其两两融合
重构细胞
体外培养
早期胚胎
移入受体(代孕母牛)体内,
发育,分娩 犊牛
8.动物体细胞核移植过程流程图(二):治疗性克隆 体细胞 去核卵母细胞 病人 融合 重构细胞 体外培养 胚胎干细胞 体外培养,诱导分化 免疫匹配的组织器官 免疫匹配的移植
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