间接免疫荧光法与印迹法检测抗核抗体的相关性研究

间接免疫荧光法与印迹法检测抗核抗体的相关性研究

左 克，李生勇

【摘 要】摘 要:目的 研究间接免疫荧光法(IIF)检测抗核抗体(ANA)与印迹法(LIA)检测ANA谱(ANAS)的诊断结果，并分析二者的一致性及相关性。方法 选取2013年2月至2014年11月在该院风湿科疑为自身免疫性疾病(AID)的住院及门诊患者为研究对象，采用IIF与LIA分别检测ANA与抗核抗体谱ANAS，并对结果进行统计分析。结果 检出ANA阳性共127例，ANAS阳性84例，最终确诊AID 96例，各种特异性抗体均有检出，优势性检验发现总体阳性率差异有统计学意义。结论 使用IIF检测ANA的阳性率高于LIA，但对于疾病的诊断价值，则LIA检测ANAS优于IIF检测ANA，临床上二者不可互相代替，应联合检测，防止漏检。 【期刊名称】国际检验医学杂志 【年(卷),期】2016(037)001 【总页数】3

【关键词】关键词:间接免疫荧光法； 印迹法； 抗核抗体； 相关性； 自身免疫性疾病 ·论 著·

抗核抗体(ANA)是以是非特异性自身抗体的总称，分布于人体的各种体液中，如血清、组织液、尿液、胸腔积液等[1]，用于自身免疫性疾病(AID)的诊断、鉴别、疗效的评价、预后等环节有十余年，自身免疫性疾病是一种病理性的免疫应答，表现为自身组织器官等功能障碍[2]。对于ANA的检测，有酶联免疫分析法、免疫扩散、免疫印迹法(LIA)、悬浮微阵列及抗原芯片多种方法[3-4]，

临床常用的主要有两种方法，即间接免疫荧光法(IIF)与印迹法(LIA)。IIF检测ANA，而LIA检测ANA谱(ANAS)。在临床应用这两种方法检测抗核抗体时，二者的结果有时并不完全一致[5]。因此，为研究IIF与LIA检测抗核抗体的诊断效果，探讨两种方法检测抗核抗体的一致性及相关性，以期为临床AID的诊疗提供借鉴，现将研究内容报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取在2013年2月到2014年11月本院风湿科住院及门诊疑诊为AID的患者1 346例为研究对象，采用IIF与LIA检测抗核抗体，其中检出ANA阳性有127例，最终确诊为AID有96例，如SLE、RA、干燥综合征SS、PSS、PM/DM 等。

1.2 诊断方法 IIF检测ANA试剂为ANA HEP-2 IgG IFA 诊断试剂盒由美国SCIMEDX CORPORATION公司生产，血清稀释滴度为1∶40，LIA检测抗核抗体谱试剂盒由苏州浩欧博生物医药有限公司生产，于硝化纤维素膜包被的特异性抗体包括:dsDNA抗体、核小体抗体、SmDl抗体、核糖体P蛋白抗体、组蛋白抗体、UlsnRNP抗体、SSA/60KD抗体、SSA/52KD抗体、SSB抗体、Scl-70抗体、抗着丝点抗体、Jo-1抗体。

1.3 设备 荧光显微镜(日本Olympus BH2),华诺公司生产的ANA谱蛋白检测仪。

1.4 统计学处理 SPSS17.0统计数据，计量资料用±s的形式表示，计量资料用t检验，计数资料用χ2检验、秩和检验方法进行分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两种方法检测ANA的结果比较 通过检测1 346例疑AID患者ANA阳性有127例，阳性率9.43%，其中男33例，女94例，男女比例为1.00∶2.85，男女比例差异有统计学意义(P<0.05)，ANA谱检测有84例阳性，阳性率6.24%，其中男28例，女56例，男女比例为1∶2，男女比例亦有显著性差异，两种方法进行关联性分析，提示方法具有一致性，进行优势性检验发现总体阳性率有差异，差异有统计学意义(P<0.05)，说明采用IIF检测ANA的阳性率高于LIA检测ANA谱的阳性率，见表1。

2.2 特异性ANA抗体检出分布情况 127例ANA阳性患者最终确诊为AID有96例，其中系统性红斑狼疮(SLE)51例，类风湿关节炎(RA)21例，干燥综合征(SS)13例，进行性系统性硬皮病(PSS)3例，混合性结缔组织病(MCTD)6例，多肌炎、皮肌炎(PM/DM)2例。ANA谱中各种特异性抗体有不同程度的检出，检测出特异性ANA阳性率分布见表2。

3 讨 论

IIF检测ANA作为AID诊断的标准方法，具有检测操作方便,且能针对细胞核、细胞浆、细胞骨架、细胞周期等各种自身抗体,并具有检测范围广等优点[6-7]。美国风湿学会(ACR)在2009年立场声明中建议将IIF作为ANA检测的金标准。本研究中127例ANA阳性患者最终确诊为AID有96例，占ANA阳性患者中的75.6%，其余31例为假阳性或多数老年人或少数健康者，目前国内对ANA的稀释度与判断还没有统一的标准，存在主观因素，对于阳性结果的滴度界限，仍存大较大分歧，国内缺乏统一的滴度稀释系统和标准化报告程序[8]，本次试验采用的血清稀释滴度为1∶40，故检出的阳性率相对会高些，51例SLE患者中ANA阳性率达96.1%，21例RA患者ANA阳性率也达80.9%，