IL-2基因启动子区域T-384G基因多态性与中国汉族人肠
易激综合征的关系
谭力学，张东常，邱小丽，阳爱芳，丁淑敏，罗文静(东莞市常平人民医院消化科，广东 东莞 523573)
【摘 要】摘要：目的 探讨IL-2基因启动子区域T-384G基因多态性与肠易激综合征(irritable bowel syndrome，IBS)及其血清IL-2水平的关系。方法 采用病例-对照研究方法纳入IBS患者(IBS组，n=213)及年龄、性别相匹配的健康人群(对照组，n=213)。以聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度(PCR-RFLP)方法分析2组IL-2基因启动子区域T-384G基因多态性。以酶联免疫吸附方法(ELISA)测定2组血清IL-2水平。结果 IBS组及对照组TT、TG及GG基因型分布频数分别为77、100、36及115、86、12。IBS组GG基因分布显著高于对照组(P<0.05)。GG基因型人群血清IL-2水平显著高于TT+TG(P<0.05)。结论 GG基因型是IBS易患基因，可能与其具有较高的IL-2表达水平有关。 【期刊名称】实用临床医学 【年(卷),期】2015(000)009 【总页数】3
【关键词】肠易激综合征； IL-2; 基因多态性; GG基因型
肠易激综合征(irritable bowel syndrome，IBS)是以腹痛、腹胀、排便习惯和(或)粪便改变的持续或间歇发作的一组临床综合征。临床症状出现而缺乏胃肠道结构和生化异常的肠道功能紊乱性疾病。根据主要症状可分为腹泻型、便秘型及腹泻便秘交替型。IBS发病机制虽未被阐明，但在IBS患者中，无论外周血或肠黏膜均存在Th1/Th2漂移现象，即Th1细胞因子增多而Th2细胞因子
减少[1]。因此，Th1细胞因子的改变可能与IBS发病机制有关。
白细胞介素-2(IL-2)主要由Th1细胞激活后分泌，因此是主要的Th1细胞因子之一。有研究[2]表明，感染后的IBS患者结肠黏膜IL-2水平升高而非感染后IBS患者IL-2水平无变化；活动期IBS患者结肠黏膜IL-2表达增强。由此推断，IL-2水平可能是IBS发病的重要因素之一。IL-2基因启动子区域存在单核苷酸基因多态性，而这些多态性改变可能直接提高IL-2的表达强度。这些基因多态性与IBS相关性目前少见报道，本研究旨在通过病例-对照研究观察IL-2基因多态性在IBS与对照人群中的差异，探讨IL-2基因多态性是否与IBS发病有关，旨在为IBS的诊断提供更多的思路。
1 对象与方法
1.1 对象
选取2010年1月至2014年11月经东莞市常平人民医院及中山大学孙逸仙纪念医院诊断为成人IBS患者213例(IBS组)。均符合罗马Ⅲ诊断标准。排除标准：1)明确感染，包括全身各系统细菌、病毒或真菌感染，如呼吸道、消化道及泌尿系统感染等；2)自身免疫系统疾病；3)扩张型心肌病；4)哮喘；5)恶性肿瘤及其他系统疾病。对照组(n=213)为年龄、性别相匹配的同期健康体检者。入选对象均为出生并生长于中国的汉族人。 1.2 方法
1.2.1 基因组DNA的提取
留取受试者静脉血2 mL，以酚-氯仿法抽提基因组DNA并置于-80 ℃待用。 1.2.2 基因分型
采用文献[3]方法使用限制性内切酶片段长度(RFLP)方法分析IL-2基因启动子区
域T-384G多态性。使用文献引物以聚合酶链反应(PCR)扩增包含IL-2基因启动子区域T-384G多态位点在内的核苷酸片断，后以相应内切酶进行酶切，最后以聚丙烯酰胺凝胶电泳区分不同长度扩增产物以判断基因分型。PCR所使用引物如下：正向引物：5′-ATTCACATGGTTCAGTGTAGTTCT-3′；反向引物：5′-GTGATAGCTCTAATTCATGC-3′。 1.2.3 血清IL-2水平的检测
留取受试者血清1 mL后置于-80 ℃待测。使用酶联免疫吸附(ELISA)方法检测血清IL-2水平。检测过程按照试剂盒(R&D公司，美国)说明进行。 1.2.4 统计学方法
通过凝胶电泳结果直接判断入选对象基因型后，以频数表示2组基因型分布并计算等位基因频率。以Hardy-Weinberg平衡检验确认对照组人群代表性。计量资料采用(均数±标准差)表示，2组间比较采用成组t检验，3组间比较采用方差分析；计数资料采用频数表示，以卡方检验判断组间差异。P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 纳入人群一般资料
IBS组213例，男103例，女110例；年龄(36.32±13.66)岁；除IBS疾病本身外，不合并其他系统疾病。对照组213例，男108例，女105例，年龄(35.76±12.99)岁，年龄、性别与IBS组匹配。入选对象均为长期居住在广东省内的中国汉族人。
2.2 IL-2基因T-384G多态性分析
T-384G基因多态性基因分型结果见图1。TT及GG纯合子条带分别分布在
IL-2基因启动子区域 T-384G 基因多态性与中国汉族人肠易激综合征的关系
