南方农业学报JournalofSouthernAgriculture2024，49（9）：1782-1786·1782·南方农业学报ISSN2095-1191；CODENNNXAABhttp://www.nfnyxb.com49卷DOI：10.3969/j.issn.2095-1191.2024.09.14烟蚜茧蜂产品生产及应用技术研究（Ⅲ）
——僵蚜产品低温冷藏技术
阙劲松1，白崇禄1，黄坤1，陈华祥2，周红雁1，雍容婧1，李庆伟1，
3*
沈小智1，彭跃1，尚官鹏1，吴伟2，，刘春明1*
（1云南省烟草公司红河州公司，云南弥勒
3
652300；2西南林业大学生物多样性保护与利用学院，昆明650224；
650224）
昆明润彩农业科技开发有限公司，昆明
摘要：【目的】明确僵蚜最适冷藏发育期、冷藏温度及僵蚜产品长效冷藏方法，为提高烟蚜茧蜂产品利用率提供理
论依据。【方法】将僵化1~4d僵蚜分别置于1、3和5℃下进行低温冷藏，比较低温对不同发育期僵蚜羽化率的影响；收集僵化2~3d僵蚜，分别制成僵蚜盒和僵蚜叶片盒，并进行不同外包装处理，比较僵蚜盒和僵蚜叶片盒冷藏后僵蚜的羽化率；测定低温冷藏7、12、17、22、27和32d僵蚜羽化的雌蜂平均寿命及对烟蚜的寄生量，比较低温冷藏对烟蚜茧蜂成蜂寿命和产卵能力的影响。【结果】在1℃下冷藏，僵蚜羽化率最低；5℃下冷藏期间僵蚜大量羽化；3℃下冷藏，僵化2d僵蚜的羽化率均高于其他发育阶段僵蚜，至冷藏30d时僵蚜羽化率仍达57.34%，其次为僵化3d僵蚜。僵蚜盒密封保湿和僵蚜叶片盒有效冷藏期分别为17和27d；冷藏后雌蜂寿命为4.33~4.83d，对烟蚜茧蜂的寄生量为81.36~87.78头/株，与未冷藏雌蜂均无显著差异（P>0.05）。【结论】以僵化2~3d僵蚜在3℃下进行冷藏为宜；僵蚜叶片盒有效冷藏期比僵蚜盒长，但冷藏僵蚜盒生产成本更低、效率更高；低温冷藏对烟蚜茧蜂雌蜂的寿命及产卵能力无明显影响。
关键词：烟蚜茧蜂；僵蚜；低温冷藏；羽化率；寿命中图分类号：S476.3文献标志码：A文章编号：2095-1191（2024）09-1782-05
ProductsproductionandapplicationtechnologyofAphidiusgifuensis（Ⅲ）—Techniquesofcoldstorageinmummified
A.gifuensisproducts
QUEJin-song1，BAIChong-lu1，HUANGKun1，CHENHua-xiang2，ZHOUHong-yan1，YONGRong-jing1，LIQing-wei1，SHENXiao-zhi1，PENGYue1，SHANGGuan-peng1，
3*
WUWei2，，LIUChun-ming1*
2
（1HongheBranch，YunnanTobaccoCompany，Mile，Yunnan652300，China；CollegeofBiodiversityConservationand
3
Utilization，SouthwestForestryUniversity，Kunming650224，China；RuncaiAgriculturalScienceandTechnology
DevelopmentCo.，Ltd.，Kunming650224，China）
Abstract：【Objective】Theoptimalstoragegrowthperiod，temperatureandlong-termcoldstoragemethodformum-mifiedaphidproductswerestudiedtoprovidereferenceforimprovingutilizationrateoftheproducts.【Method】Themum-mifiedaphidof1-4dwerestoredat1，3and5℃respectively，andthentheinfluencesoftemperatureonemergencerates
ofmummifiedaphidsatdifferentgrowthstageswerecompared.Mummifiedaphidsof2-3dwerecollectedandmadeintomummifiedaphidsboxesandmummifiedaphidsbladeboxes，andpackagedinvariousways.Thentheemergenceratesofmummifiedaphidsstoredinmummifiedboxandmummifiedbladeboxwerecompared.LongevityandparasiticquantitytoMyzuspersicaeofmummifiedaphidsstoredinlowtemperaturefor7，12，17，22，27and32dweredetermined，andef-fectsoflowtemperaturestorageonadultAphidiusgifuensisandfecundityweresurveyed.【Result】Theresultsshowedthattheemergencerateofmummifiedwasthelowestat1℃，andtherewereanumberofmummifiedaphidsemergencingstoredat5℃.Theemergencerateofmummifiedaphidof2dwerehigherthanotherperiodsstoredat3℃，therewere57.34%mummifiedaphidcouldemergeafter30d.Theemergencerateofmummifiedaphidof3drankedthesecond.Theeffectivecoldstorageperiodofmummifiedboxandmummifiedbladeboxwere17and27d.Thefemalebeehadalifespanof4.33-4.83daftercoldstorage，andtheparasiticamounttoA.gifuensis81.36to87.78beesperplant，therewere收稿日期：2024-03-11基金项目：中国烟草总公司科技重点项目（110201402008）；中国烟草总公司云南省公司科技计划项目（2015YN18）作者简介：*为通讯作者：吴伟（1960-），副教授，主要从事有害生物综合治理研究工作，E-mail：13888480223@139.com；刘春明
（1970-），高级农艺师，主要从事烟草植保技术研究与应用工作，E-mail：13988031660@163.com。阙劲松（1969-），主要从事烟叶生产研究及科技推广工作，E-mail：quejs888@126.com
9期阙劲松等：烟蚜茧蜂产品生产及应用技术研究（Ⅲ）——僵蚜产品低温冷藏技术
·1783·nosignificantdifferencewiththefemalebeeswithoutcoldstorage（P>0.05）.【Conclusion】Themummifiedaphidsof2-3
dbeingstoredat3℃istheoptimalmethod.Theeffectivestorageperiodofmummifiedbladeboxislongerthanmummi-fiedbox，However，thecostofproductionofmummifiedboxislessthanmummifiedbladebox，anditismoreefficient.ThecoldstoragehasnoobviouseffectsonlongevityandfecundityoffemaleA.gifuensis.
Keywords：Aphidiusgifuensis；mummifiedaphid；lowtemperaturestorage；emergencerate；longevity
0引言
【研究意义】天敌昆虫产品化是生物防治的必
要途径，特别是用于大规模释放的天敌（时敏和陈学新，2015）。寄生蜂被大量用于生物防治，由于其重要的科学及经济价值，早在80年前即开展对寄生蜂低温冷藏的研究。影响寄生蜂低温冷藏效果的因素复杂，主要来自于寄生蜂体外环境与虫体本身，而温度强度和冷藏时间是最主要的体外因素（王虎诚等，2011；赵静等，2014）。低温冷藏是延长天敌昆虫储存期的一种最简单、最常用的方法，大多数天敌昆虫在3~15℃的条件下生长发育减缓，因此可增加冷藏时间（徐学农和王恩东，2008；陈华祥等，2017）。对于烟蚜茧蜂而言，如何长时间存储僵蚜并使其保持较高的羽化率和生命力，一直是烟蚜茧蜂产品化生产的中心问题。【前人研究进展】相关研究表明，烟蚜茧蜂不同虫态的冷藏效果差异明显，一般情况下，成虫受低温影响最严重，而蛹相对适合用于冷藏（李玉艳，2011）。受地域的影响，不同地域烟蚜茧蜂的冷藏结果也有所差异。在福建，陈茂华等2005）在5℃冰箱中对不同发育阶段烟蚜茧蜂的耐冷藏性进行比较，结果表明，僵化3d僵蚜为烟蚜茧蜂最适冷藏期，冷藏30d后羽化率可保持在72.33%左右；在贵州，陈文龙和闫玉芳（2012）对僵化1~5d僵蚜进行不同温度冷藏，发现僵化3d僵蚜在5℃下进行冷藏为宜，冷藏25d后僵蚜羽化率为74.00%；在冷藏后成蜂寿命和产卵能力方面，两项研究的结果相似，即在一定时间范围内（<30d），低温冷藏对烟蚜茧蜂成蜂寿命及产卵能力无明显影响。不同地域烟蚜茧蜂的滞育情况也有所不同。在河北，李玉艳等（2013）对诱导烟蚜茧蜂滞育的方法进行详述报道，指出以2~3龄烟蚜茧蜂幼虫在8℃、L∶D=8∶16的条件下低温处理后，其滞育率可达54.35%；吴兴富等2000）发现，在云南玉溪烟蚜茧蜂无越冬现象、不滞育。【本研究切入点】烟蚜茧蜂的发育受温度（气候）影响较明显，不同地区烟蚜茧蜂生态学特性存在差异，因此，应根据当地气候条件，结合烟蚜茧蜂的发育状况进行烟蚜茧蜂低温冷藏研究。【拟解决的关键问题】比较不同低温对僵化1~4d烟蚜茧蜂羽化率的影响，并进一步测试僵蚜盒和僵蚜叶片盒的有效冷藏期及低温冷藏对成蜂寿命和产卵能力的影响，以明确烟蚜茧蜂（云南种群）的最适冷藏发育期，为烟蚜茧
蜂商品化生产打下基础。
1材料与方法
1.1
试验材料
供试烟苗品种为K326，包衣烟籽由玉溪中烟种子公司生产提供。种蚜、种蜂为云南省红河州弥勒县新哨三角地烟蚜茧蜂繁育基地饲养。僵蚜盒、冷藏箱等材料由昆明润彩农业科技开发有限公司提供。
1.2试验方法
1.2.1烟蚜茧蜂最适冷藏发育期及冷藏温度试验毛笔挑取僵化1、2、3和4d的僵蚜各100头分装入自制僵蚜盒中，分别置于1、3和5℃、相对湿度70%的人工气候箱中冷藏，5d后取出（以后每隔5d取出一批，至冷藏30d）置于25℃、相对湿度70%的恒温箱中，每天定时观察统计僵蚜羽化情况，若连续3d无僵蚜羽化，结束试验，以不分僵化天数僵蚜冷藏后羽化率为对照。每处理重复3次。
1.2.2僵蚜盒和僵蚜叶片盒低温冷藏试验收集（采摘）僵化2~3d僵蚜，分别制成僵蚜盒和僵蚜叶片盒，Ⅰ量水后用塑料袋密封僵蚜盒；：把僵蚜盒和僵蚜叶片盒进行不同外包装后用塑料袋密封僵蚜盒；处理处理Ⅱ：［处理Ⅲ在僵蚜盒上喷少：僵蚜叶片盒不密封；对照Ⅰ（CKⅠ）：僵蚜盒不密封、不冷藏；对照Ⅱ（CKⅡ）：僵蚜叶片盒不密封、不冷藏］置于15℃下处理12h→10℃下处理12h→5℃下处理24h→3℃冷库中分别冷藏5、10、15、20、25、30和35d后取出，先置于10~15℃的冷藏箱内2d、再转入25℃的人工气候箱内任其羽化（实际冷藏时间分别为7、12、17、22、27和32d），每天定时统计羽化数量，连续5d不再有羽化时结束统计，并解剖未羽化的僵蚜。对照为载有僵蚜的烟叶置于25℃的人工气候箱内任其羽化，每处理重复3次。
1.2.3低温冷藏对成蜂寿命和产卵能力的影响取低温冷藏7、12、17、22、27和32d僵蚜羽化的雌蜂各10头，分别引入透明塑料瓶内（10头/瓶），置于20~27℃室温条件下，每天饲喂1次10%蜜糖水，每隔24h观察记录1次雌蜂成活数；以未冷藏僵蚜羽化的成蜂为对照。各处理重复3次，以加权平均数计算雌蜂的平均寿命。
将低温冷藏7、12、17、22、27和32d僵蚜羽化的成蜂，分别引入透明塑料瓶内，置于20~27℃室温条件下，饲喂10%蜜糖水让其自然交配5h后，再分别（（·1784·南方农业学报49卷将不同冷藏时间的1头雌蜂引入有200头烟蚜的1株烟苗上（用60目防虫网罩），置于25℃、相对湿度70%、光照775lx的人工气候箱内任其产卵寄生，各处理10头雌蜂，即10个重复。接蜂6d后统计烟苗上的僵蚜和寄生蚜数量。以未冷藏僵蚜的雌蜂为对照。1.3统计分析
采用GraphpadPrism7和SPSS17.0进行试验数据差异性显著分析，先进行正态性检验及方差齐性检验，若数据符合正态分布且方差齐性，则采用LSD方法比较各组差异性；若数据不符合正态分布且方差不齐，则采用秩和检验。按以下公式计算羽化率：
羽化率（%）=羽化数/僵蚜总数×100
2结果与分析
2.1
烟蚜茧蜂最适冷藏发育期和冷藏温度
不同发育阶段的烟蚜茧蜂僵蚜羽化率随冷藏时间的变化趋势如图1所示。僵蚜羽化率随冷藏时间的延长而降低，不同发育阶段烟蚜茧蜂对低温的
僵化1dMummified1d
僵化2dMummified2d僵化3dMummified3d僵化4dMummified4d对照（CK）aab
ba
aba
ababba
bbab
c
A
适应能力存在差异，1℃下冷藏5d后，僵化2和3d及对照组的羽化率分别为74.36%、75.77%和71.75%，显著高于僵化1和4d僵蚜的羽化率（P<0.05，下同）；僵化2d僵蚜冷藏20和30d后的羽化率分别为27.08%和9.02%，与僵化3d冷藏20和30d后的羽化率（27.78%和7.08%）无显著差异（P>0.05，下同）（图1-A）。
冷藏温度为3℃时，冷藏5d后，僵化2、3和4d及对照组僵蚜的羽化率均在70.00%以上，而僵化1d僵蚜的羽化率（63.35%）最低；冷藏15d后，僵化2d僵蚜的羽化率为79.38%，略高于僵化3d僵蚜的羽化率（74.34%），而僵化1和4d僵蚜的羽化率分别为37.34%和28.74%，对照组僵蚜羽化率为69.32%；冷藏30d后各发育阶段僵蚜的羽化率均低于60.00%，其中以僵化2d僵蚜的羽化率最高（57.34%），其次是僵化3d僵蚜的羽化率（54.09%），以僵化1d僵蚜的羽化率最低（7.34%）（图1-B）。
僵化1dMummified1d
僵化2dMummified2d僵化3dMummified3d僵化4dMummified4d对照（CK）aad
cb
aaabc
40.0020.00
0
5
10
15
20
25
30
冷藏时间（d）Lowtemperaturestoragetime
c
c
c
d
aab
b
aa
bc
B
羽化率（%）Emergencerate75.0060.0045.0030.0015.00
0
羽化率（%）Emergencerate90.00
100.0080.0060.00
aa
bd
c
aa
bc
abaabc
bcc
a
ababab
b
51015202530
冷藏时间（d）Lowtemperaturestoragetime僵化1dMummified1d僵化2dMummified2d僵化3dMummified3d僵化4dMummified4d对照（CK）
羽化率（%）Emergencerate100.0080.0060.0040.0020.00
0
5
10
15
20
25
30
冷藏时间（d）Lowtemperaturestoragetime
aaa
C
60.00羽化率（%）Emergencerate僵化1dMummified1d
僵化2dMummified2d僵化3dMummified3d僵化4dMummified4d对照（CK）
D
abaa
baaaaababcabb
bb
c
40.00
20.00
0
5
10
15
20
25
30
冷藏时间（d）Lowtemperaturestoragetime
图1恒温冷藏对僵蚜羽化率的影响
Fig.1Theemergencerateofmummifiedaphidsafterbeingstoredatconstantlowtemperature
A：1℃冷藏僵蚜；B：3℃冷藏僵蚜；C：5℃冷藏僵蚜；D：5℃冷藏期间僵蚜羽化情况。
相同冷藏时间图柱上不同小写字母表示差异显著（P<0.05）
A：Storingmummifiedaphidsat1℃；B：Storingmummifiedaphidsat3℃；C：Storingmummifiedaphidsat5℃；D：Theemergencerateofmummifiedaphidsbeingstoredat5℃.Differentlowercaselettersonthebarforthesamelowtemperaturestoragetimerepresentedsignificant
difference（P<0.05）
烟蚜茧蜂产品生产及应用技术研究（Ⅲ）——僵蚜产品低温冷藏技术<p><br/></p>
