产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达

产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达

朱慧;王云霞;胡白石;刘凤权

【期刊名称】《江苏农业学报》 【年(卷),期】2008(024)002

【摘要】利用PCR方法从OH11菌株中克隆到β-1,3-葡聚糖酶基因,通过同源性比较发现其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的β-1,3-葡聚糖酶有90%以上的同源性.该基因经Nde Ⅰ、XhoⅡ或Hind Ⅲ酶切后连接到含T17启动子的高表达载体pET21a(+)和载体pET30a(+)上构建重组质粒,并分别转化宿主菌BL21(AI)和BL21(DE3)产生表达菌株.表达菌株BLGluA和BLGluC经IPTG诱导后分别产生相对分子量约为29 000(GluA蛋白)和44 000(GluC蛋白)的蛋白.酶活性和抑菌活性测定结果表明,GluA蛋白和GluC蛋白能将海带多糖水解,在海带多糖培养基上产生透明的水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用,具有一定的生物防治作用. 【总页数】6页(136-141)

【关键词】产酶溶杆菌OH11菌株;β-1,3-葡聚糖酶基因;克隆;表达 【作者】朱慧;王云霞;胡白石;刘凤权

【作者单位】南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室,江苏,南京,210095;南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室,江苏,南京,210095;南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室,江苏,南京,210095;南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室,江苏,南京,210095 【正文语种】中文