川芎嗪对糖尿病大鼠降血糖及肾脏保护作用的研究

川芎嗪对糖尿病大鼠降血糖及肾脏保护作用的研究

宋剑飞 邓九零 陈亮 张利棕 王辉?

【摘 要】【摘要】目的 探讨川芎嗪对糖尿病大鼠降血糖及肾脏保护作用。方法 将经链脲佐菌素诱导成功的24只糖尿病大鼠随机分为川芎嗪组，阳性对照组，模型组，分别以川芎嗪200mg/（kg·d）、缬沙坦25mg/（kg·d）、生理盐水10ml/（kg ·d）灌胃，另取8只正常大鼠为正常对照组，生理盐水10ml/（kg·d）灌胃，连续给药6周。给药后每周称量大鼠体重，第2、4、6周检测大鼠空腹血糖；第6周代谢笼法测定24h尿量，并检测尿蛋白总量（U-TP）与尿微量白蛋白（U-ALB）；第6周末心脏取血，处死大鼠，酶联免疫法检测血清中胰岛素的含量；取双肾，计算肾肥大指数，光镜下观察肾脏病理切片。结果 模型组大鼠的血糖、24h尿量、U-TP、U-ALB、肾重、肾肥大指数较正常组均有显著升高（P＜0.01或P＜0.05），血清胰岛素显著降低（P＜0.05），身体机能明显下降，肾脏病理明显加重；经川芎嗪治疗6周后，大鼠血糖、24h尿量、U-TP、肾重与肾肥大指数明显下降（P＜0.05），但血清胰岛素无明显升高（P＞0.05），身体机能显著改善，肾脏病理状态有所减轻。结论 川芎嗪对糖尿病大鼠有一定的降血糖与肾脏保护作用，但其降血糖机制并非通过增加胰岛素的分泌。

【期刊名称】浙江临床医学 【年(卷),期】2016(018)003 【总页数】3

【关键词】【关键词】川芎嗪 糖尿病 降血糖 肾功能 【文献来源】

https://www.zhangqiaokeyan.com/academic-journal-cn_zhejiang-clinical-medical-

journal_thesis/0201228806118.html

糖尿病是威胁人类健康的第三大非传染性疾病。糖尿病肾病（DN）是糖尿病微血管并发症之一，为糖尿病特有的肾脏并发症，目前已成为导致终末期肾病的首要致病因素。DN的基本病理改变为肾小球系膜基质增生、肾小球毛细血管基底膜（GBM）增厚与肾小球硬化［1］，目前西医尚无理想的治疗方法。川芎嗪是从伞形科植物川芎中提取的活性成分［2］，现代药理研究表明，川芎嗪单用或联用其他药物对糖尿病及其相关并发症有一定的治疗作用［3～5］。2014年3月至2015 年1月作者通过实验研究，探讨川芎嗪对糖尿病大鼠降血糖及肾脏保护作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物 健康SPF级雄性SD大鼠32 只，体重（270±20）g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，动物许可证号为SCXK（沪）2013-0018；饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心屏障系统内，使用SYXK许可证号为（浙）2013-0184。

1.2 药物与试剂 川芎嗪（上海源叶生物科技有限公司）；缬沙坦（北京诺华制药有限公司）；链脲佐菌素（Sigma）；胰岛素检测试剂盒（上海源叶生物科技有限公司）；其他有机试剂均为分析纯（华东医药股份有限公司）。

1.3 实验仪器 KQ-250DE型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；血糖测试仪及血糖试剂条（罗氏）；全自动血液生化分析仪（日立7020）；DMI 3000B显微镜（德国Leica）。

1.4 实验方法 （1）糖尿病大鼠模型的制备及分组：32只SD大鼠分为糖尿病组（DM组，n=24）和正常对照组（NC组，n=8），适应性喂养1周后，禁

食12 h，按40mg/kg对DM组大鼠行一次性尾静脉注射STZ （0.1mol/L柠檬酸盐缓冲液，pH4.5，新鲜配制）；NC组大鼠注射等量柠檬酸盐缓冲液。各组大鼠给予标准饮食喂养，自由饮水。1周后尾静脉取血，空腹血糖≥16.7mmol/L为糖尿病大鼠。将成模的24只大鼠按照血糖和体重随机分为川芎嗪组、模型组、阳性对照组，每组各8只。川芎嗪组给予川芎嗪200mg/（kg ·d）灌胃，阳性对照组给予缬沙坦25 mg/（kg·d）灌胃，模型组与NC组灌服等量生理盐水，连续灌胃6周。（2） 标本的收集与处理：实验结束前1d，代谢笼法收集各组大鼠24h尿液，取1ml尿液置于1.5 ml离心管中，2000 r/min离心5min，取上清液；大鼠处死前称重，以3%戊巴比妥1.5ml/kg 的剂量腹腔注射麻醉，心脏取血，置于10 ml离心管中，3500 r/min离心15min，分离血清，检测血清中胰岛素含量；取双侧肾脏，用滤纸吸干肾表面血液后称重，取特定部位肾组织固定于10%甲醛中用于病理HE染色。（3） 实验指标观察与检测：①一般情况观察：观察各组大鼠的精神状态、活动状况、毛发、体重及排便等情况。②血糖的测定：各组大鼠分别于灌胃后第2、4、6周尾静脉采血测定空腹血糖。③尿液生化指标的测定：取离心后上清液置于自动生化仪中测定24h尿蛋白总量（U-TP）与尿微量白蛋白（U-ALB）。④肾肥大指数的测定：将各组大鼠麻醉后处死，迅速剖腹取双肾，用滤纸吸干肾表面血液后称重。肾肥大指数=两侧肾重量之和（mg）/体重量（g）。⑤胰岛素的测定：酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组大鼠血清中胰岛素的含量，操作按ELISA试剂盒说明书。⑥肾脏病理检查：取肾皮质，10%甲醛固定，乙醇脱水、二甲苯透明、石蜡包埋、制成3μm石蜡切片，HE染色后光镜下观察。