个体发育或细胞分化时可以有选择性地越过某些外显子或某个剪接点进行变位剪接，产生出组织或发育阶段特异性的mRNA。 如果蝇与性别相关基因的特异性剪接。 （12）RNA的编辑和化学修饰，举例说明可变剪接的过程？举例说明RNA编辑的过程？ RNA的编辑(RNA editing)：是某些RNA，特别是mRNA的一种加工方式，它导致了DNA所编码的遗传信息的改变，因为经过编辑的mRNA序列发生了不同于模板DNA的变化。例：点突变编辑如哺乳动物载脂蛋白mRNA的编辑。下图分别是该基因的DNA序列以及在哺乳动物肝脏和肠组织中分离到的mRNA序列。载脂蛋白基因编码区共有4563个密码子，在所有组织中其DNA序列都相同。
RNA编辑的另一种形式是尿苷酸的缺失和添加。由指导RNA(即guide RNA)来完成，指导RNA含有与编辑后mRNA相互补的核苷酸序列。指导RNA与被编辑区及其周围部分核酸序列虽然有相当程度的互补性，但该RNA上存在一些未能配对的腺嘌呤，形成缺口，为插入尿嘧啶提供了模板。反应完成后，指导RNA从mRNA上解离下来，而mRNA则被用做翻译的模板。 有些RNA，特别是前体rRNA和tRNA，有特异的化学修饰
第四章 生物信息的传递(下)-从mRNA到蛋白质
思考题
（1）如何破译遗传密码？
①用有机化学的方法合成已知顺序的含3种碱基的共聚物。将它加入到无细胞体系中。 ②加入20种氨基酸，其中一种是同位素标记的。 ③如果标记的氨基酸与核糖体能形成复合物，滤过的溶液中同位素的含量低，反之高。
（2）密码子的特性？
（1）密码子的连续性； （2）密码子的简并性 ；（3）密码子的通用性与特殊性。
（3）RNA的氨酰化过程？ 氨酰tRNA合成酶的作用是将氨基酸接合于tRNA。它的反应包括两个步骤： （1）氨基酸活化生成酶－氨酰腺苷酸复合物。 AA＋ATP＋酶（E）→AA-tRNA+AMP+ppi
（2）、氨酰基转移到tRNA 3’端腺苷酸残基的2’或3’－羟基上。 E－AA－AMP＋tRNA→AA－tRNA＋E＋AMP
（4）蛋白质的翻译过程？
翻译的起始→肽链的延伸→肽链的终止
（5）SD、 anti-SD ？
SD：原核生物起始密码子上游的保守序列。 :
（6）原核生物和真核生物的起始氨基酸是什么，N-甲酰甲硫氨酸的形成？（百度） 甲酰蛋氨酸是细菌等原核生物的起氨基酸，蛋氨酸是哺乳动物等真核动物的起始氨基酸。
N-甲酰甲硫氨酸的形成:是一种存在于细菌及相关的真核生物细胞器中的蛋白氨基酸。它是氨基酸甲硫氨酸的衍生物，其中一个甲酸基被加到原甲硫氨酸的氨基上。他专门用于蛋白质合成的起始阶段，之后它可被移除。
（7）原核生物的蛋白质翻译过程及翻译过程中因子的种类及作用？（P137） 因子：（1）核糖体和多核糖体；（2）mRNA；（3） tRNA；（4）氨酰-tRNA合成酶；（5）密码-反密码子配对；（6）起始因子；（7）蛋白质生物合成的延伸因子；（8）蛋白质生物合成的终止和释放因子。
第五章 分子生物学研究法
思考题
（1）基因工程中酶的种类和作用特点？
I型限制性内切酶：在距离特异性识别位点约1000-1500处随机切开一条单链。
II型限制性内切酶：这类酶不但能识别特定的位点，而且识别位置与切割位置一致，产生具有粘性末端或具有平齐末端的两端DNA。 III型类限制性内切酶：在DNA的每条链上从识别序列的一侧开始测量一定距离后进行切割，产生仅一个碱基凸出来的3’末端。 （2）DNA克隆的基本步骤？（百度）
1、目的基因的获取；2、克隆载体的选择与改建；3、外源基因与载体的连接；4、重组DNA导入受体菌；5、重组体的筛选 。
（3）分子杂交的种类及原理？ 1、 DNA印迹杂交
原理：根据毛细管作用的原理，使在电泳凝胶中分离的DNA片段转移并结合在适当的滤膜上，然后通过同标记的单链DNA或 RNA探针的杂交作用检测这些被转移的DNA片段，这种实验方法叫做DNA印迹杂交技术。由于它是由E.Southern于1975年首先设计出来的，故又叫Southern DNA 印迹转移技术。 2、 RNA印迹技术
原理：1979年，J.C.Alwine等人发展而来，是将RNA分子从电泳凝胶转移到硝酸纤维素滤膜或其他化学修饰的活性滤纸上，进行核酸杂交的一种实验方法。由于这种方法与萨瑟恩DNA印迹杂交技术十分类似，所以叫做诺赛恩RNA印迹技术（Northern blotting）。 3、 蛋白质免疫印迹技术
原理：将经SDS－PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素膜）上，固相戴体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。转移后首先将膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附。用固定在膜上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的非标记抗体(一抗)发生免疫反应。与荧光素酶或放射性同位素标记的第二抗体起反应。显色或放射自显影法检测凝胶中的蛋白质成分。
（4）PCR的原理？
PCR反应过程包括以下3个方面：①变性。这是PCR反应的第一步，即将模板DNA置于95Ⅰ的高温下，使双链DNA的双链解开变成单链DNA；②退火(退火温度确定规则：引物Tm值低2-5度)。将反应体系的温度降低至55Ⅰ左右，使得一对引物能分别与变性后的两条模板链相配对；③延伸。将反应体系温度调整到Taq DNA聚合酶作用的最适温度72Ⅰ，然后以目的基因为模板，合成新的DNA链。如此反复进行约30个循环左右，即可扩增得到目的DNA序列。
（5）DNA测序的原理？
利用了DNA聚合酶所具有的两种酶催反应的特性：第一，DNA聚合酶能够利用单链的DNA作模板，合成出准确的DNA互补链；第二，DNA聚合酶能够利用2’，3’—双脱氧核苷三磷酸作底物，使之参入到寡核苷酸链的3’—末端，从而终止DNA链的生长。
（6）酵母双杂交的用途及原理？
用途：有效地分离能与一种已知的靶蛋白相互作用的蛋白质
原理：X基因和Y基因产物的相互结合，导致reporter gene表达。Reporter gene表达就可说明X基因产物于Y基因产物能结合。 （7）RNAi的用途及原理？
用途：为生物学家提供了一种快速、简便的反向遗传学技术,在后基因组时代功能 原理：双链RNA首先被降解为具5’单磷酸、长21～23bp 的小分子双链RNA , 这种RNA小分子称为小干扰RNA（siRNA）。
siRNA具相似的结构特征: 为长约21～23bp 的双链RNA ,具5’单磷酸和3’羟基末端, 互补双链的3’端均有一个2～3nt 的单链突出
第六章 基因的表达与调控(上)
思考题
（1）乳糖操纵子和色氨酸操纵子分别属于正控诱导、负控诱导、正控阻遏和负控阻遏中的哪一种？
乳糖操纵子属于负控诱导；色氨酸操纵子属于负控阻遏。
（2）色氨酸操纵子的结构及调控机理。
1、 当色氨酸的浓度高时，它作为辅阻遏物与阻遏蛋白结合使阻遏蛋白有活性，它与操纵基因结合，结构基因表达。
2、当色氨酸的浓度较低时，分为两种情况：
①当培养基中色氨酸的浓度很低时，负载有色氨酸的tRNATrp也就少，这样翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢，当4区被转录完成时，核糖体才进行到1区（或停留在两个相邻的trp密码子处），这时的前导区结构是2-3配对，不形成3-4配对的终止结构，所以转录可继续进行，直到将trp操纵子中的结构基因全部转录。
②当培养基中色氨酸浓度较高时，核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子，在4区被转录之前就到达2区，使2-3区不能配对，3-4区自由配对形成基一环终止子结构，转录被终止，trp操纵子被关闭。 （3）解释下图，画出乳糖操纵子的结构，并分析产生图中结果的原因？
1、)当大肠杆菌生长在含有葡萄糖和乳糖的培养基上时，实线代表细胞的生长状态，细菌成对数增长。
2、当葡萄糖用完后，细菌有一段时间停止生长，之后又呈对数增长。 3、虚线代表β-半乳糖苷酶的活性，它在葡萄糖用完后活性快速升高。 结构：
机理：
1、没有乳糖存在时，I基因的产物阻遏蛋白与操纵序列结合，基因不转录。
2、有乳糖存在时，乳糖与阴遏蛋白结合，使其失活，它不与操纵基因结合，结构基因转录。 在有葡萄糖和乳糖 同时存在的情况下，葡萄糖使细胞中的cAMP的浓度下降。cAMP与CRP蛋白结合能促进结构基因转录。因此在有葡萄糖 存在时结构基因不转录。当葡萄糖 利用完后，cAMP的浓度升高，cAMP与CRP蛋白结合能促进结构基因转录。β-半乳糖苷酶的活性升高。
第七章 基因的表达与调控(下)
思考题
（1）简单多基因家族、复杂多基因家族和发育调控的复杂多基因家族的定义。 简单多基因家族：家族中的基因一般以串联方式前后相连。
复杂多基因家族：一般由几个相关的基因家族构成，基因家族之间由间隔序列隔开，并作为独立的转录单位。
发育调控的复杂多基因家族：在生物个体发育的不同阶段，出现几种不同形式的基因家族。 （2）图解真核生物断裂基因的结构。
（3）基因扩增和基因重排与交换的定义？
基因扩增：指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象
基因重排：将一个基因从远离启动子的地方移到距离它很近的位点从而启动转录，这种方式称为基因重排。
基因交换：通过一种交配型转换的过程来改变自己的过程
（4）真核基因的转录过程？ 1、 真核启动子由核心启动子和上游启动子两个部分组成，是决定RNA聚合酶Ⅱ转录起点和转录频率的关键元件。
分子生物学PPT思考题
