基因打靶常用小鼠模型
(1)完全性基因敲除小鼠(Conventionai Knockout, KO)
完全性基因敲除是通过基因敲除技术,把需要敲除目的基因的所有外显子或几个重要的外显子或者功能区域敲除掉,获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。应用:用于研究某个基因(要求该基因非胚胎致死性基因)对全身生理病理的功能。
(2)条件性基因敲除小鼠(Conditional Knockout, CKO)
条件性基因敲除是通过基因敲除把两个loxp位点放到目的基因一个或几个重要的外显子的两端制备出floxed小鼠, 该floxed小鼠在与表达Cre酶小鼠杂交之前,该目的基因表达完全正常,而当该floxed小鼠与组织特异性表达Cre酶的小鼠进行杂交后,可以在特定的组织或细胞中敲除该基因,而该基因在其它组织或细胞表达正常。
应用:用于具有胚胎致死性目的基因的研究;用于研究基因在特定的组织或细胞中的生理病理功能;与控制Cre或Flp表达的其它诱导系统相结合,还可以对某一基因的表达同时实现在时间和空间两方面的调控。
(3)基因敲入小鼠(Knockin, KI)
基因敲入可以在目的基因位置引进特定的突变或外源基因。比如在目的基因上引入点突变(模拟人类遗传疾病模型) ;或将报告基因(如EGFP,mRFP,mCherry,mYFP,或LacZ等)通过同源重组的方式引入目的基因的特定位点,从而可以通过报告基因的表达跟踪目标基因的表达。通过报告基因的表达可以研究基因的表达谱。也可以用报告基因取代小鼠本身的基因,使KO/KI同时发生。
应用:用于药物筛选相关研究;用于信号通路的研究;用于示踪的相关研究。