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2024-2024学年高三生物第一轮复习规范训练7

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单元检测卷(十)(单独成册)

(时间:45分钟 满分:100分)

1.(12分)(2024·高考福建卷)GDNF是一种神经营养因子,对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:

(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白酶的目的是__________。 (2)构建含GDNF基因的表达载体时,需选择图1中的__________限制酶进行酶切。

(3)经酶切后的载体和GDNF基因进行连接,连接产物经筛选得到的载体主要有3种:单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种连接方式,选择Hpa Ⅰ酶和BamH Ⅰ酶对筛选得到的载体进行双酶切,并对酶切后的DNA片段进行电泳分析,结果如图2所示。图中第__________泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。

(4)将正向连接的表达载体导入神经干细胞后,为了检测GDNF基因是否成功表达,可用相应的__________与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定密度时,需进行____________________________培养以得到更多数量的细胞,用于神经干细胞移植治疗实验。

解析:(1)在动物细胞培养中,胰蛋白酶的作用是使细胞分散开。(2)由图可知,在GDNF基因两侧各有一个Xho Ⅰ酶切位点,在载体上有一个Xho Ⅰ酶切位点,使用该酶既可以将GDNF基因切割下来,又可以将其插入到载体中。(3)用HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对3种载体进行双酶切,然后对得到的DNA分子片段进行电泳分析。对于载体自连的DNA分子来说,只有HpaⅠ酶切位点,切割后只有一种片段,长度为6 000 bp;对于正向连接的载体来说,切割后产生两种片段6 000 bp和700(600+100)bp;对于反向连接的载体来说,切割后产生两种片段6 500 bp和200(100+100)bp。所以第②泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。(4)鉴定目的基因是否成功表达,可用抗原—抗体杂交法。用相应的抗体与提取的蛋白质杂交,若有杂交带,说明目的基因成功表达。当培养的细胞达到一定数量时,需进行传代培养以获得更多数量的细胞。

答案:(1)使细胞分散开 (2)XhoⅠ (3)② (4)抗体 传代

2.(14分)(2024·高考四川卷)将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中,可获得抗棉铃虫的转基因棉,其过程如下图所示(注:农杆菌中Ti质粒上只有T-DNA片段能转移到植物细胞中)。

(1)过程①需用同种__________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来,应使用__________培养基。

(2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让__________进入棉花细胞;除尽农杆菌后,还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养,目的是__________。

(3)若过程④仅获得大量的根,则应在培养基中增加__________以获得芽;部分接种在无激素培养基上的芽也能长根,原因是__________。

(4)检验转基因棉的抗虫性状,常用方法是__________。种植转基因抗虫棉能减少__________的使用,以减轻环境污染。

解析:(1)切割目的基因和载体应使用同种限制性核酸内切酶,筛选细菌应使用选择培养基。(2)农杆菌转化法的原理是农杆菌感染植物时,Ti质粒上的T-DNA片段能够转移并整合到植物细胞的染色体DNA上。因为T-DNA上具有卡那霉素抗性基因,所以可用含卡那霉素的培养基筛选出获得T-DNA片段的植物细胞。(3)植物组织培养过程中,可加入激素调节植物细胞的脱分化和再分化。生长素用量比细胞分裂素用量,比值高时,有利于根的分化、抑制芽的形成;比值低时,有利于芽的分化、抑制根的形成。幼嫩的芽顶端可以产生生长素并向基部运输,促进根的分化,故芽在无激素的培养基中也可以生根。(4)在个体水平上检测抗虫棉时可在抗虫棉上投放害虫来判断其是否具有抗虫的性状;抗虫棉因具有抗虫性状,故可减少农药的使用,以减轻环境污染。

答案:(1)限制性核酸内切 选择 (2)T-DNA 筛选获得T-DNA片段的植物细胞 (3)细胞分裂素浓度 芽顶端合成的生长素向基部运输,促进根的分化 (4)投放棉铃虫 农药

3.(16分)(2024·高考山东卷)治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下:

(1)过程①采用的是细胞工程中的________技术,过程②采用的是胚胎工程中的________技术。 (2)体细胞进行体外培养时,所需气体主要有O2和CO2,其中CO2的作用是维持培养液(基)的________。 (3)如果克隆过程中需进行基因改造,在构建基因表达载体(重组载体)时必须使用________和________两种工具酶。基因表达载体上除目的基因外,还需有________基因,以便选出成功导入基因表达载体的细胞。

(4)胚胎干细胞可以来自于囊胚中的________。在一定条件下,胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体________(填“A”或“B”),则不会发生免疫排斥反应。

解析:(1)过程①表示细胞核与去核卵母细胞结合,即核移植技术;过程②表示早期胚胎培养技术。(2)体细胞进行体外培养时,CO2气体的主要作用是维持培养液(基)的pH(或酸碱度)。(3)构建基因表达载体时需要限制酶和DNA连接酶两种工具酶;基因表达载体上的标记基因的作用是便于筛选出成功导入基因表达载体的细胞。(4)囊胚的内细胞团细胞具有发育的全能性,属于胚胎干细胞。在图示过程中,B个体提供的是细胞核,分化形成的组织器官的性状主要

是由来自B的遗传物质决定的,因此体外培养获得的组织器官移入个体B不会发生免疫排斥反应。

答案:(1)(体细胞)核移植 (早期)胚胎培养 (2)pH(或:酸碱度) (3)限制性核酸内切酶(或:限制酶) DNA连接酶(注:两空可颠倒) 标记 (4)内细胞团 B

4.(19分)(2024·甘肃兰州实战)胚胎工程和基因工程目前在生物技术中发展较快,回答下列问题:

(1)在哺乳动物的核移植实验中,一般通过________(物理方法)将受体细胞激活,使其进行细胞分裂并发育,当胚胎发育到________阶段时,将胚胎植入另一雌性(代孕)动物体内。

(2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行________处理。另外,培养的卵母细胞需要发育至________,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。

(3)利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因是 _______________________________________________ _______________________________________________。

(4)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、________、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的________(填“受精卵”或“乳腺细胞”),导入方法是________。

解析:(1)在哺乳动物的核移植实验中,一般通过电脉冲或电刺激(物理方法)将受体细胞激活,使其进行细胞分裂并发育,当胚胎发育到桑椹胚或囊胚阶段时,将胚胎植入另一雌性(代孕)动物体内。(2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行获能处理。另外,培养的卵母细胞需要发育至MⅡ中期,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。(3)体细胞分化程度高,不易恢复全能性,所以利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植。(4)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体包括某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、人干扰素基因(或目的基因)、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将该基因表达载体导入牛的受精卵,导入方法是显微注射法。

答案:(1)电脉冲(或电刺激) 桑椹胚或囊胚 (2)获能 MⅡ中期(减数第二次分裂中期) (3)体细胞分化程度高,不易恢复全能性 (4)人干扰素基因(或目的基因) 受精卵 显微注射法

5.(19分)(2014·高考福建卷)Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图:

(1)步骤①中,在核移植前应去除卵母细胞的________。

(2)步骤②中,重组胚胎培养到________期时,可从其内细胞团分离出ES细胞。

(3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的表达载体。可以根据Rag2基因的________设计引物,利用PCR技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有________酶的酶切位点。

(4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的________,用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。 解析:(1)核移植是把体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中。(2)囊胚期才有内细胞团。(3)可根据目的基因的核苷酸序列设计引物,要把目的基因和表达载体直接连接,目的基因和表达载体应具有相同酶的酶切位点。(4)欲检测

Rag2基因的表达情况,需提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,进行抗原—抗体杂交实验。

答案:(1)细胞核 (2)囊胚

(3)核苷酸序列 HindⅢ和PstⅠ (4)蛋白质

6.(20分)育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验。请据图回答问题。

(1)图Ⅰ过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗A的过程需要经过________两个关键步骤,该过程依据的原理是______________________。

(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、________、温度和光照外,还必须在________的条件下进行。 (3)已知番茄的红果(Y)对黄果(y)为显性,少室(M)对多室(m)为显性,控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。用红果多室(Yymm)番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验,则Ⅱ过程中,从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是________。Ⅲ过程中植物体C的基因型为________。(细胞A为两两融合细胞)

(4)图Ⅲ、Ⅳ过程中需要去除细胞壁,获得具有活力的________。

(5)在图中Ⅳ过程中,经过鉴别和筛选后,通常植物体D能表现出两个亲本的遗传性状,根本原因是________。 解析:(1)图Ⅰ中植物组织培养过程,需要经过脱分化和再分化两个关键步骤,其原理是植物细胞的全能性。(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、植物激素(生长素、细胞分裂素)、温度和光照外,还必须在无菌的条件下进行。(3)Ⅱ过程中,从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是有丝分裂。红果多室(Yymm)番茄植株产生的花粉基因型为Ym、ym,故Ⅲ过程中植物体C的基因型为YYmm、Yymm或yymm。(4)植物体细胞杂交时,要用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁,获得原生质体。(5)图Ⅳ中经植物体细胞杂交获得的植株具有两个亲本的遗传物质,能表现出两个亲本的遗传性状。

答案:(1)脱分化和再分化 植物细胞全能性 (2)植物激素(生长素、细胞分裂素) 无菌 (3)有丝分裂 YYmm或Yymm或yymm (4)原生质体 (5)具有两个亲本的遗传物质

2024-2024学年高三生物第一轮复习规范训练7

单元检测卷(十)(单独成册)(时间:45分钟满分:100分)1.(12分)(2024·高考福建卷)GDNF是一种神经营养因子,对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体(如图1所示),并导入到大鼠神经干细胞中,用于干细胞基因治疗的研究。请回答:(1)在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中,使用胰蛋白
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