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从新型葡萄籽 IH636 中提取的低聚原花青素和盐碱酸内 的铬对治疗仓鼠的动脉粥样硬化症有良好的作用 摘要：动脉硬化症是大动脉
上的一种疾病， 患有此病在内部动脉壁上会长有脂肪 扁桃体颗粒， 这些脂肪颗粒最终会堵塞血液流通。 以确认的导致动脉硬化症的危 险因素包括：遗传、饮食习惯、生活方式、抽烟、循环流通着的脂质和胆固醇含 量以及慢性血管炎症和流通信号。黄酮类化合物和动脉硬化症之间有一定的关 系，主要是由于黄酮类化合物具有抗氧化剂类的性质， 并且黄酮类化合物还有抑 制体内低浓度脂蛋白的氧化作用。 美国人普遍存在着血脂醇过高现象， 而这正是 导致心脏血管疾病的主要危险因素。 从葡萄籽中提取的低聚原花青素已被证实具 有广泛的化学保护特性和心脏保护特性以免受氧危害。最近的一项研究表明从 IH636葡萄籽中提取的低聚原花青素与 NB—起使用能降低血脂醇过高的人体中 的胆固醇及低浓度脂蛋白和被氧化的脂蛋白总含量。 本实验通过分别给仓鼠单独 喂食葡萄籽中的低聚原花青素及和 NB—起服用，证实了低聚原花青素对仓鼠的 动脉硬化症有益处。因为当给仓鼠服用含 0.2%的胆固醇、 10%的椰子油的高血胆 脂醇食物时他们就会长有与血胆脂醇过多的人像似的脂脂膜。仓鼠食用 10 周椰 子油后就会长出泡沫细胞这是动脉硬化症早期的生物标志。与椰子油一起服用， 当低聚原花青素的浓度为 50mg/kg 、 100mg/kg 时，仓鼠得动脉硬化症的几率分 别降低50^及60%若低聚原花青素与 NBC —起使用时患病几率大约降低 32% 每一实验组用 7~9只仓鼠。无论是单独使用葡萄籽中的低聚原花青素或是与 NBC 一起使用都对胆固醇、 甘油三酸酯的含量， 不仅如此还对氧化性脂质损害有很好 的抑制作用。 这一点已通过硫酸反应物的形成所证明。 这一数据表明葡萄籽提取 物低聚原花青素（GSPE和烟碱酸内的铬（NBC可以提供良好的健康因子。这 是通过降低泡沫细胞的形成从而大幅度改变动脉硬化症的发生率来实现的。 关键词： GSPE NBC 动脉硬化症 仓鼠 泡沫细胞 胆固醇 甘油三酸酯硫 酸反应物 引言
氧分压升高是血胆脂醇过高的一个主要标准， 这导致了动脉粥样硬化。 心脏 内氧分压的形成是由于产生了过量的自由基， 正是这些自由基引起了脉管组织的 损伤。动脉粥样硬化症是一种疾病， 此病可使内部动脉壁上产生脂肪条纹， 从而 堵塞了血液流
通，动脉硬化症及其并发症如冠心病、心肌梗塞、 心肌梗死和心脏 中风这些都是导致死亡的头号杀手。 患有动脉硬化症的巨噬细胞和平滑肌肉细胞 内中无法控制的胆固醇和积累的脂质将导致泡沫细胞的形成和一系列动脉粥样 硬化薄片。通过对一种新型葡萄籽 IH636 种提取的低聚原花青素进行多次研究后 证实了低聚原花青素具有绝好的清除氧自由基和保护心脏的特性。
GSPE 具有清
除生物反应产生的自由基功能，如： 超氧化阴离子、 羟基自由基和过氧化氢自由 基，并且比维生素C、维生素E和B -胡萝卜素的抗氧化性能力更强更优越。 此 外，葡萄籽中的低聚原花青素对老鼠体内损伤和心肌局部缺血有独特的保护功 能，并且是亚德里亚霉素诱发了老鼠心脏中毒性物质的产生。 近期的一项人体研 究发现葡萄籽中的低聚聚原花青素和 NBC —起作为氧调和铬的盐碱聚合体可以 明显的降低人体内的胆固醇、低浓度脂蛋白和被氧化的低浓度脂蛋白的总含量。
本实验的研究就是为了确定葡萄籽中的低聚原花青素是否可以阻止泡沫细 胞的形成即是否可能阻止动脉粥样硬化症的形成。仓鼠连续
10周食用含 0.2%的
胆固醇、 10%的椰子油的血胆脂醇过高的食物，使这些动物体内产生泡沫细胞， 这是早期动脉粥样硬化症的生物标志。 葡萄籽中低聚原花青素的保护功能是由其 用量所决定的，这是通过分别单独使用花青素及与 NB—起使用使胆固醇和甘油 三酸酯的含量有所降低上来确定的。 而且在此类仓鼠中也证实了硫酸反应物和泡 沫细胞确实减少了。 原料和方法
化学原料
GSP—作为商业上所公认的苯丙酸诺龙（商品名）和 NBC-作为商业上所公 认的铬合金巴拉圭茶均来自美国加州一所内部营养食品健康合作机构。 从葡萄籽 中提取的低聚原花青素是一种天然提取物，含有大约
76%的齐聚物花青素和 3%
的单节显性生物黄酮类化合物， 通过对严重的口腔病、 皮肤病和初级眼疾病的研 究及为期90天的慢性口腔毒性和长期毒性的研究， 证实了 GSPE是安全的并无任 何毒副作用，最近低聚原花青素又通过了一致的安全认定。
NBC是一种独特的铬 复
合物可以很好的提高人体内的生物功能及铬的生物活性， 增强胰岛素的新陈代 谢作用。老鼠体内每千克体重大约含有一克铬中静脉内的脂质蛋白， 而且在食物 中添加盐碱酸铬的浓度达 4.6g/kg 连续使用 20 周，并未出现生长缓慢或其他毒 副作用。美国环境保护局科技部人类危险性鉴定组织调查了铬的安全性和毒性， 并且确定了相关剂量标准为：
每天每千克食物中铬含量为 1000 微克。除非有其 他明文规定，所有化合物和试剂均来自斯格码化学所，并且是分析级或最高级。 动物和治疗
本实验所用的是雄性、 刚断奶的叙利亚婴幼仓鼠来自查尔斯饲养实验室并且 连续四周喂食商业的未纯化的啮齿目动物食物。 尔后这些动物被分成数组， 每组 都具有相对均匀的重量。
这些动物饲养在塑料笼子里，每只笼子有 3?4只老鼠，笼子内设有木条小 床，温度控制在室温（20C）,光照周期光/黑暗为12小时，给他们提供充足的 食物和水。总之这些动物的饲养遵循了 Scranton 大学的指南协会动物护养和用 途委员会的指导方针。
为实验组的动物提供高胆固醇和高脂肪的食物，简要地说就是 1000克粉状 啮齿目动物食物中加入 600毫升水， 并且含有 0.2%的胆固醇和 10%的椰子油， 而 后融化混合物。除此之外，水中还要加入十个独自的地甜味剂。 低花青素食物中 大约每千克啮齿目动物食物含有 0.88 克低聚原花青素，而高花青素食物中大约 每千克啮齿目动物食物含有 1.76 克低聚原花青素。在低花青素食物中每千克原 花青素大约加0.88克NBC每千克啮齿目动物食物加40毫克，半固体混合物就 会凝固，从而分裂成综合色物质。
在喂养十周后接着给仓鼠断食 12小时，用戊巴比妥将其麻痹，从而造成心 脏穿孔。在含有乙二酸四乙胺的微量容器内血液就会聚集，
学浆被分离，在90C
下储存一作分析使用。麻痹后的仓鼠喷洒含 10%的甲醛磷酸缓冲液从而分离出大 动脉已备组织学研究使用。
按 Kowalaet al 所描述的方法进行解刨和分析。从离心脏 1 毫米处截取大约 4?5毫米长的一段大动脉，进行脱脂、修饰并拥油红 O着色。在16x40倍放大 镜下观察上层样品以确定泡沫细胞的数量、大小和分布。
泡沫所覆盖的面积用微型放映机放大后可通过电脑数字垫料块进行测定。 甘 油三酸酯总量可用斯格码酶分析技术测定出来。胆固醇总量可用斯格码配套元件 测定。通过斯格码磷酸盐试剂降低浓度脂蛋白沉淀后， 高浓度脂蛋白可用相似的 方法测定。
为了确定GSPE在仓鼠体内的作用，使用了一种体内型仓鼠，因为当给仓鼠 服用含0.2%的胆固醇、10%勺椰子油的高血胆脂醇食物时他们就会长有与血胆脂 醇过多的人像似的脂脂膜。仓鼠食用
10周椰子油后就会长出泡沫细胞这是动脉
硬化症早期的生物标志。在喂食 GSPE勺动物中可以测定动脉粥样硬化的指数。 结果
仓鼠的食物中葡萄籽中低聚原花青素的含量分别为
50g/kg和100g/kg,都
连续10周服用含0.2%的胆固醇、10%勺椰子油的高血胆脂醇食物，结果得动脉 粥样
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